不同固定条件下细胞与活细胞的原子力显微镜实时观察

用原子力显微镜（atom force microscope,AFM）观察固定细胞的最佳条件并在生理溶液中对活细胞实时观察.用不同固定剂和同一固定剂的不同浓度处理细胞;不加任何固定剂而直接在生理溶液中对细胞进行AFM成像.以戊二醛为固定剂并使用0.5%～1%的浓度固定细胞,后用缓冲溶液漂洗,再对细胞进行成像时可获得质量良好的图像.直接在生理溶液中进行观察,成像质量低于使用固定剂的细胞,但保持了细胞的生活原貌.在用原子力显微镜高分辨率观察生理条件下细胞的特点时,需要在制样与观测系统两方面进行改进.     

髓鞘碱性蛋白对不同头部基团的髓磷脂质单层膜影响的热力学特性

髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)是中枢神经系统(central nervous system,CNS)髓鞘成熟期的主要蛋白质之一.研究资料表明,MBP与变态反应性脑脊髓炎(allergic encephalomyelitis,EAE)、多发性硬化等多种神经疾病有关,是反映中枢神经系统有无...     

滑子菇多糖的体外生物活性初步研究

为了研究滑子菇水提粗多糖(PNP)的体外生物活性,对滑子菇多糖的总还原力、清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)和由Fe2+诱发的脂质过氧化反应的抑制作用进行研究,采用MTT比色法和胎盘蓝细胞计数检测对滑子菇水提粗多糖的体外抑制K562细胞生长作用进行了研究,采用流失细胞术对滑子菇多糖作用人白血病K562细胞后的细胞周期进行了研究。结果表明:滑子菇水提粗多糖PNP具有一定的还原能力;在高质量浓度(800μg/mL)时具有接近于Vc清除DPPH·的能力,达41.28%;PNP对Fe2+诱发的脂质过氧化反应具有一定的抑制作用,并且随着浓度的增加抑制作用逐渐增强,但总的增长趋势不大;MTT实验表明PNP对K562细胞的体外增长有抑制作用,在质量浓度为800μg/mL和作用时间为48 h时,可达到最高的抑制率35.03%。流式细胞术对细胞周期的检测表明滑子菇多糖能够阻滞人白血病K562细胞于G1期。     

结合AFM探测副伤寒沙门氏茵B感染红细胞膜的生物力学特性

采用原子力显微镜和衍射显微术,在纳米精确尺度探测副伤寒沙门氏菌B（Sp B）感染宿主红细胞（RBC）膜微观结构和力学特性,涉及细胞的形变、膜面内剪切模量和弯曲模量。结合这两种单分子测量技术,利用相关的数学模型表述RBC膜对菌体印B的入侵非常敏感。实验结果显示,不同感染期间的SpB寄生菌体,能够引起宿主RBC膜结构改变,形变能力降低,膜剪切模量和弯曲模量显著增加。这些力学特性的变化影响RBC的输氧和循环功能。实验结果表明,印B具有独特的鞭毛调控系统,入侵的毒性菌体寄生蛋白与血影蛋白网络中的运输蛋白有特异结合位点,导致RBC膜骨架网络、波动力学和细胞内、外基质都产生应激反应,这有可能为理解勋曰感染RBC的发病机理和寄生途径提供一些新的实验思路和分析依据。     

亚油酸铂靶向脂质体抗肿瘤特性的研究

用超声波制备了内部包裹亚油酸铂,表面有抗人乳腺癌单克隆抗体ＭｃＡｂＧｐ－１Ｄ８的亚油酸铂靶向脂质体和亚油酸铂非靶向脂质体,研究了这些脂质体绎腹部注射到荷瘤裸鼠之后的组织分布和抑瘤效果,实验结果表明,靶向脂质体亚油酸铂在肿瘤组织的含量明显高于游离亚油酸铂组;在肾,肝,肺,脾,心脏等器官中,前者的含量比后者有所降低,分别在接种癌细胞后６天,１２天和２４天,按６ｍｇ／ｋｇ的剂量分别注射ＰＢＳ,游离亚油酸     

柴胡多糖的结构和抗氧化活性分析

用超声波辅助提取法从柴胡中提取、分离得到多糖SAP3。高效液相色谱法测定其相对分子质量,红外光谱、气相色谱和原子力显微镜对其结构进行初步分析。结果表明:柴胡多糖SAP3是组分均一的多糖,由鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,平均相对分子质量为3.3×105。红外光谱分析表明:柴胡多糖具有一般多糖类物质的特征吸收峰,单糖残基以吡喃环的形式存在。原子力显微镜显示柴胡多糖糖链具有分支结构,并缠绕形成环状结构。在0.2~1.2 mg/mL的实验浓度范围内,随着多糖质量浓度的升高,柴胡多糖SAP3对.OH的清除率逐渐增大,最大清除率可达45.2%。     

激光对干旱胁迫下油松种子萌发的生物学效应

用He-Ne激光以不同的时间辐照油松种子,在聚乙二醇(PEG6000)模拟干旱胁迫条件下对其进行萌发实验。结果表明:激光辐照油松种子在干旱胁迫条件下的发芽率、活力指数、生物量等分别提高32.23%、81.19%和46.58%;萌发期油松种子幼苗保护酶系统的超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性显著提高,与对照组相比分别提高28.70%、46.52%。膜脂的过氧化物丙二醛含量明显下降,防止或降低了膜脂过氧化作用对膜的伤害。激光辐照油松种子其保护酶活性的提高,可能是激光促进干旱胁迫条件下种子发芽率、活力指数、生物量等生物学效应增强的原因。     

莲子多糖的结构分析及抗氧化活性

用热水浸提、乙醇沉淀、Sevag法除蛋白分离得到水溶性莲子粗多糖。经十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）沉淀,硼酸反应以及SephadexG-150层析纯化,得到3种莲子多糖SN1、SN2、SN3。用气相色谱、红外光谱、紫外光谱分析其化学结构。结果表明：SN1主要由葡萄糖、半乳糖组成,含a—D-吡喃葡萄糖环;SN2主链为葡聚糖、并含有其他4种单糖;SN3含7种单糖,并推测是一种酸性氨基多糖或蛋白多糖。体外抗氧化活性实验表明莲子多糖具有一定的清除自由基能力,清除·O2-的能力较强。     

猪肚菇多糖WPG1的相对分子质量测定及原子力显微镜观测

热水提取猪肚菇粗多糖中的酸性多糖WPG1,经凝胶纯化后用高效液相色谱（HPLC）测定其相对分子质量,用气相色谱对其单糖组成进行分析,用原子力显微镜（AFM）对其形态结构进行观测。结果表明：酸性多糖WPG1经SephacrylS-300凝胶层析纯化后得到WPG1-1和WPG1-2这2个组分; 经HPLC分析可知WPG1-1与WPG1-2均为单一组分,其相对分子质量分别为1.7×106和1.6×104; WPG1-1与WPG1-2的单糖组成主要是糖醛酸、甘露糖、葡萄糖和半乳糖; 原子力显微镜观测图分析表明WPG1-1为网链状聚集体结构,WPG1-2呈梭状聚集体,两者均非单链存在。     

多烯脂肪酸对磷脂胆固醇液晶态结构影响机理

用小角Ｘ 射线散射法、３１Ｐ 核磁共振技术和扫描隧道显微镜技术,对多烯脂肪酸多相脂质体的液晶态结构进行了研究。实验结果表明：胆固醇、多烯脂肪酸、非离子表面活性剂均对ＰＥ 脂质体的液晶态结构有明显的影响。在含有高效分散剂的磷酸缓冲溶液中制成的液晶态油酸多相脂质体和亚油酸多相脂质体均由片层六角相和片层立方相组成, 而蓖麻酸多相脂质体由立方六角相组成。