酵母RNA聚合酶Ⅱ转录活性的调控研究进展

真核生物基因转录活性的调控过程十分复杂,许多蛋白质在这一过程中发挥作用。酵母中对ＲＮＡ聚合酶Ⅱ转录活性的调控可分为以下４种类型：（１）阻遏物的直接抑制作用;（２）阻遏物的间接抑制作用;（３）激活物的直接活化作用;（４）激活物的亚细胞定位调节作用。本文拟就近来酵母中ＲＮＡ聚合酶Ⅱ转录活性的上述４种调控机制的研究进展作一综述。１　阻遏蛋白的直接抑制作用１．１半乳糖代谢作用的调控　目前对于酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）利用半乳糖（包括摄取、转运、代谢等）的过程以及相关酶基…     

视黄酸诱导细胞分化分子机制的研究进展

本文从视黄酸（ＲＡ）对早期即刻反应基因表达,多种蛋白激酶活性变化及核转录因子ＡＰ－１和Ｑｃｔ－３／４基因转录产物功能、白血病细胞对ＲＡ出现抗生的可能原因以及ＰＲ蛋白在ＲＡ诱导造血干／祖细胞,白血病细胞分化成熟中的调节作用,ＰＲＢ与其它核转空蛋白的相互关系等方面分析,综述了近年来有关ＲＡ诱导细胞分化可能的分子机制。     

肺动脉内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞增殖的相互调节

血管内皮细胞和血管平滑肌细胞在结构和功能上关系密切,二者的相互关系在血管舒缩和血管壁结构的调节中起重要作用。本文观察了培养的小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）在细胞增殖方面的相互调节作用。混合培养的ＰＡＥＣ和ＰＡＳＭ细胞的３Ｈ－ＴｄＲ参入明显降低（Ｐ＜０．００１,与对照组相比）。无论向培养的ＰＡＥＣ和ＰＡＳＭ中分别加入ＰＡＳＭ和ＰＡＥＣ的条件培养基还是二者共培养时,均发现ＰＡＥＣ的３Ｈ－ＴｄＲ参入明显降低,而ＰＡＳＭ的３Ｈ－ＴｄＲ明显升高（Ｐ＜０．０５,与对照组相比）。流式细胞测定也发现共培养时ＰＡＥＣ的Ｇ１期细胞增多,Ｇ２／Ｍ期细胞减少;而ＰＡＳＭ的Ｇ１期细胞减少,Ｇ２／Ｍ期细胞增多。共培养的ＰＡＳＭ细胞内ｃＡＭＰ增加,ｃＧＭＰ含量降低;而ＰＡＥＣ细胞的ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ含量均降低（Ｐ＜０．０１,与对照组相比）。上述结果提示,ＰＡＥＣ和ＰＡＳＭ相互作用可能通过第二信使而调节它们本身的增殖     

油松林带对径流的调节作用

油松林带对径流的调节作用王维华,朱劲伟（中国科学院沈阳应用生态研究所,１１００１５）ＴｈｅＥｆｆｅｃｔｏｆＰｉｎｕｓｔａｂｕｌａｅｆｏｒｍｉｓＳｋｅｌｔｅｒｂｅｌｔｉｎＲｕｎｏｆｆＲｅｇｕｌａｔｉｏｎ￥ＷａｎｇＷｅｉｈｕａ;ＺｈｕＪｉｎｗｅｉ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＡｐｐｌｉｅｄＥｃｏｌｏｇｙ,ＡｃａｄｅｍｉａＳｉｎｉｃａ,Ｓｈｍｙａｎｇ１１００１５）．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｍａｌｏｆＥｃｏｌｏｇｙ,１９９３,１２（６）：１７－２０．ＴｈｅｒｏｌｅｏｆＰｉｎｕｓｔａｂｕｌａｅｆｏｒｍｉｓｓｈｅｌｔｅｒｂｅｌｔｉｎｒｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆａｔｍｏｓｐｈｅｒｅｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｉｓｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｂｙｆｉｅｌｄｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓｏｎａｗａｔｅｒｂａｌａｎｃｅｔｒｉａｌｆｉｅｌｄ．３８．３％ｏｆｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｗａｓｉｎｔｅｒｃｅｐｔｅｄｂｙｔｈｅｃａｎｏｐｙ,Ｄｏｍｉｎａｎｔｆａｃｔｏｒｓｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇｃａｎｏｐｙｉｎｔｅｒｃｅｐｔｉｏｎａｒｅｒａｉｎｆａｌｌａｍｏｕｎｔａｎｄｒａｉｎｆａｌｌｉｎｔｅｎｓｉｔｙ,Ｔｈｅｓｌｏｐｅｒｕｎｏｆｆｇｅｎｅｒａｔｅｄｗａｓ１     

Ce~（3＋）与G－肌动蛋白结合引起的构象变化及对聚合的影响

用Ａｅｄａｎｓ标记肌动蛋白单体Ｇ－Ａｃｔｉｎ上Ｃｙｓ３７４残基作为探针,研究了稀土离子Ｃｅ~（３＋）与Ｇ－Ａｃｔｉｎ的结合及引起的微构象变化。Ｃｅ~（３＋）在低浓度（Ｃｅ~（３＋）／Ａｃｔｉｎ摩尔比＜１）和Ｃａ~（２＋）竞争Ｇ－Ａｃｔｉｎ上二价离子的高亲合位点。Ｃｅ~（３＋）取代Ｃａ~（２＋）引起Ａｅｄａｎｓ荧光强度增强与Ｍｇ~（２＋）取代Ｃａ~（２＋）的结果相同。Ｃｅ~（３＋）／Ａｃｔｉｎ＞ｌ则导致Ａｅｄａｎｓ荧光强度下降。说明Ｃｅ~（３＋）在高低两种浓度条件下结合的位点及对Ｃｖｓ３７４的微构象的影响不同。时间分辩测得的Ａｅｄａｎｓ荧光寿命也支持这一结论。ＣＤ谱结果表明Ｃｅ~（３＋）／Ａｃｔｉｎ＜０．４,Ａｃｔｉｎ的二级结构增加,大于０．４又导致其失去。Ｃｅ~（３＋）－Ａｃｔｉｎ在有／无游离ＡＴＰ时用聚合液诱导的聚合结果表明,无游离ＡＴＰ时,极低浓度Ｃｅ~（３＋）促进聚合,高浓度虽有促进但有所减弱;有游离ＡＴＰ时,Ｃｅ~（３＋）／Ａｃｔｉｎ在实验范围内促进聚合。     

HAP转录因子与DNA结合的活力受细胞内氧化还原系统的调节

ＨＡＰ 转录因子（ ＨＡＰ２／ＨＡＰ３／ＨＡＰ４／ＨＡＰ５） 是存在于酿酒酵母中的一种异源多聚蛋白,它能与酵母中许多启动子上游的ＣＣＡＡＴ盒（ 顺式作用元件） 专一性结合, 以增强基因的转录。在酵母ｈａｐ５ 突变株的细胞中,用酵母单杂交系统从水稻ｃＤＮＡＧＡＬ４ 表达文库中筛选出的阳性克隆是编码谷胱甘肽氧还蛋白的ｃＤＮＡ,提示细胞内的氧化还原系统可能作用于ＨＡＰ蛋白,从而对ＣＣＡＡＴ盒的结合活力起调节作用。对ＨＡＰ３ 亚基分子中半胱氨酸残基的突变实验结果支持上述推测     

甲状旁腺素对成骨样细胞增殖的调节作用

甲状旁腺素（ＰＴＨ）是调节钙磷代谢的经典激素,有报道ＰＴＨ对其靶细胞－成骨细胞有促增殖分化作用。经多层次、多水平的实验研究证实,ＰＴＨ对成骨样细胞ＲＯＳ１７／２．８确有促增殖作用。（１）细胞计数、ＭＴＴ［３－（４,５－ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａ－ｚｏｌ－ｚ－ｙｉ）２,５－ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ］测定及ＳＲＢ（ｓｏｄｉｕｍｒｈｏｄａｍｉｎｅＢ,ＳＲＢ）染色均显示经ＰＴＨ（１０－９ｍｏｌ／Ｌ）处理的细胞,其数目明显增加;（２）３Ｈ－ＴｄＲ参入增加;（３）与增殖相关的原癌基因（ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｋｉ－ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ）的表达增强;（４）成骨细胞特征性蛋白－碱性磷酸酶活性降低．这些结果不仅表明该激素具有非经典样作用,同时意味着激素也参与其靶细胞增殖分化的调节作用     

表面活性剂CHAPS对紫膜脂双层微环境的作用

利用顺磁性自旋标记技术,探测在表面活性剂ＣＨＡＰＳ（３－〔（３－Ｃｈｏｌａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ）ｄｉｍｅｔｈｙｌ－ａｍｍｏｎｉｏ〕ｐｒｏｐａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ）作用下,紫膜脂双层微环境的物理参数（序参数Ｓ和旋转相关不同。表层序参数Ｓ值随ＣＨＡＰＳ浓度的增加而逐渐减小;深层旋转相关时间τｃ值开始随ＣＨＡＰＳ浓度的增加而增大,在ＣＨＡＰＳ浓度为５ｍｍｏｌ／Ｌ时,τｃ值呈现最大值,随着ＣＨＡ     

番荔枝种子中的3个新的番荔枝内酯

从番荔枝（Ａｎｎｏｎａ ｓｑｕａｍ ｏｓａ Ｌ．）的种子中分离到Ａ１—Ａ７共７个化合物,其中Ａ２、Ａ３和Ａ５为新的番荔枝内酯,分别命名为新－去乙酰紫玉盘素（ｎｅｏ－ｄｅｓａｃｅｔｙｌｕｖａｒｉｃｉｎ, Ａ２）、新阿诺宁乙（ｎｅｏ－ａｎｎｏｎｉｎ Ｂ, Ａ３）和新牛心番荔枝素甲（ｎｅｏ－ｒｅｔｉｃｕｌａｔａｃｉｎ Ａ, Ａ５）。     

膜去极化与cAMP在胰岛细胞株HIT中诱导CBP片段的转录活性

为了研究 Ｃ Ｂ Ｐ在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中调节基因转录的机制,将不同的 Ｃ Ｂ Ｐ片段瞬时转染到细胞中,观察其转录活性．实验表明,在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中,膜去极化及 ｃ Ａ Ｍ Ｐ 均可诱导 Ｃ Ｂ Ｐ３０（ Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ结合功能区）转录活性增强,并有协同效应． Ｐ Ｋ Ｃ对 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 的转录活性无影响;与 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ有更强结合力的 Ｃ Ｂ Ｐ Ｋ Ｉ Ｘ Ｓ／ Ｂ（氨基酸序列短于 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 的 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ结合功能区）其基本转录活性及膜去极化、ｃ Ａ Ｍ Ｐ诱导下的转录活性均比 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 更强．反义 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ 的过度表达可降低 ｃ Ａ Ｍ Ｐ诱导的 Ｃ Ｂ Ｐ的转录活性．提示在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中,膜去极化及 ｃ Ａ Ｍ Ｐ对共转录因子 Ｃ Ｂ Ｐ转录活性的调节作用通过 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ介导．     

环腺苷一磷酸对人Ⅰ型17β羟类固醇脱氢酶在绒癌细胞系中表达的调节作用

由Ｈ ＳＤ１７Ｂ１基因编码的人Ⅰ型１７β－羟类固醇脱氢酶（１７β－ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｔｙｐｅ１简称Ⅰ型１７ＨＳＤ）催化雌酮与雌二醇之间的转化。本文研究环腺苷一磷酸简化（ｃＡＭＰ）对该酶在培养的绒癌胞系（ＪＡＲ和ＪＥＧ－３）中表达的调节作用。用８－ｂｒｏｍｏ－ｃＡＭＰ处理两种绒癌细胞后,观察到在伴随１．３ｋｂⅠ型１７ＨＳＤｍＲＮＡ表达的同时,Ｉ型１７ＨＳＤ蛋白浓度     

α1肾上腺素受体亚型在家兔胸主动脉平滑肌细胞生长中的作用

本实验在体外培养的家兔胸主动脉平滑肌细胞上,利用＾３Ｈ－Ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入的方法,观察了α１－肾上腺素受体（ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＡＲ）及其亚型对平滑肌细胞ＤＮＡ合成的影响。结果显示：去甲肾上腺素激动α１－ＡＲ能促进平滑肌细胞ＤＮＡ合成,并有以下特点：（１）α１Ａ激动促进平滑肌细胞ＤＮＡ合成,但α１Ｂ激动抑制这一合成作用;（２）α１Ａ促进ＤＮＡ合成的作用与ｃ     

细胞外钙调素诱导番茄县浮细胞rbcS—3A基因表达

利用番茄（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ Ｍｉｌｌ．）县浮培养细胞为材料,以＾３２Ｐ标记的寡核苷酸（４０ｂｐ）为探针检测了细胞外钙调素对番茄细胞ｒｂｃＳ－３Ａ及ｒｂｃＳ－３Ｃ基因表达的影响。当向暗中培养的番茄悬浮细胞（第７天）中加入外源纯化钙调素（１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ）并处理２４ｈ后,ｒｂｃＢ－３Ａ基因的表达明显增加,而相同深度的Ｓ－１００蛋白和ＢＳＡ则没有作用。加入外源钙调素（１     

HAP转录因子与DNA结合的活力受细胞内氧化还原系统的调节

ＨＡＰ转录因子（ＨＡＰ２／ＨＡＰ３／ＨＡＰ４／ＨＡＰ５）是存在于酿酒酵母中的一种异源多聚蛋白,它能与酵母中许多启动子上游的ＣＣＡＡＴ盒（顺式作用元件）专一性结合,以增强基因的转录。在酵母ｈａｐ５突变株的细胞中,用酵母单杂交系统从水稻ｃＤＮＡ－ＧＡＬ４表达文库中筛选出的阳性克隆是编码谷胱甘肽氧还蛋白的ｃＤＮＡ,提示细胞内的氧化还原系统可能作用于ＨＡＰ蛋白,从而对ＣＣＡＡＴ盒的结合活力起调节作用。对Ｈ     

牡丹冬季到内催花过程中内源激素含量的变化

牡丹品种朱砂垒（Ｐａｅｏｎｉａ ｓｕｆｆｒｕｔｉｃｏｓａ Ａｎｄｒ．ｃｖ．Ｚｈｕｓｈａｌｅｉ）在冬季室内催花过程７种内源激素含量变化不同。玉米素核苷（Ｚ＋ＡＲ）、生长素（ＩＡＡ）和赤霉素（ＧＡ３）的含量在花生长发 处于较高水平;而脱落酸（ＡＢ）、异戊烯基腺苷（ＩＰ＋ＩＰＡ）、二氢玉米素核苷（ＤＨＺ＋ＤＨＺＲ）、赤霉素（ＧＡ４）的含量低于上述３种内源激素。激素平衡方面,ＧＡｓ／ＡＢＡ、ＣＴＫｓ／ＡＢ     

核酶对bcl－2mRNA的体外切割

通过微机对ｂｃｌ－２ＲＮＡ二级结构的分析,设计针对ｂｃｌ－２片段５＇ＣＧＣＧＡＣＣＣＧＧＵＣＧＣＣＡＧＧＡＣＣＵＣＧ３＇的“锤头状”（Ｈａｍｍｅｒｈｅａｄ）核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ,ＲＤ）基因,平端连接于ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（－）ＨｉｎｃⅡ位点,克隆后经测序表明序列正确,ｂｃｌ－２和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因经体外转录,５０℃作用２ｈ,从１６５６－１６５７（Ｃ－Ｇ）位之间切断ｂｃｌ－２ＲＮＡ片段．     

Epstein—Barr病毒膜抗原基因免疫的研究

将Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒（ＥＢＶ）膜抗原（ＭＡ）ＢＬＬＦ１基因,插入含有ＣＭＶ启动子的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３下游ＢａｍＨＩ位点,构建成真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ＭＡ。将纯化的ＤＮＡ注射Ｂａｌｂ／ｃ小鼠股四头肌。经免疫的动物产生抗ＥＢ病毒ＭＡ特异性的抗体和中和抗体,依赖抗体细胞介导的细胞毒作用（ＡＤＣＣ）,特异性Ｔ淋巴细胞增生性反应及细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤作用。基因免疫与基因－蛋白     

环六亚甲基双乙酰胺对胃癌不同细胞周期两条信号系…

环六亚甲基双乙酰胺（ＨＭＢＡ）对ＭＧｃ８０－３不同时相细胞内ｃＡＭＰ－ＰＫＡ与ＤＡＧ－ＰＫＣ两大系统不仅具有正负调控作用,而且其作用具有周期特异性。其中Ｇ１期是最敏感的调控时相,与对照组相比,ｃＡＭＰ水平上升１０２．３％,ＰＫＡ活性升高３４８％,ＤＡＧ含量下降５１．４％,ＰＫＣ活性降低３２．３％;次敏感时相为Ｇ２期;Ｍ期基本没受影响,Ｓ期变化规律不同于其他时相。     

三价盐对C_8-卵磷脂胶团溶液相分离的作用

用激光散射技术结合浊点法测定了加有不同离子强度的四种三价稀土盐（ＬａＣｌ３,ＣｅＣｌ３,Ｌａ（ＮＯ３）３,Ｃｅ（ＮＯ３）３）的Ｃ８－卵磷脂溶液的液－液相分离曲线,从中得出了相分离临界温度（Ｔｃ）和临界浓度（Ｘｃ）随盐类型和盐离子强度变化曲线。发现各种三价盐都使Ｔｃ和Ｘｃ随离子强度的增加先降低,然后再使之升高。其变化也遵循我们导出的式子：ＴＣ＝ＴＣ０＋Ａ１Ｉ１２－Ａ２Ｉ所描述的规律。各种正、负离子对Ｔｃ和Ｘｃ的相对作用程度分别为：Ｃｅ３＋＞Ｌａ３＋;ＮＯ３－＞Ｃｌ－。用液－液相分离曲线的实验数据,根据吉布斯自由能模型,还计算了胶团的作用因子Ｃ和形成因子Δμ．借助这两个表象参数,利用加盐表面活性物胶团溶液的唯象理论,从理论上算出了各两相共存曲线,其结果与实验值的吻合令人满意。     

丙型肝炎病毒C33_c单克隆抗体的研制和鉴定

用丙型肝炎病毒重组蛋白Ｃ３３_ｃ抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,运用杂交瘤技术成功地建立了７株能稳定分泌抗Ｃ３３_ｃ单克隆抗体的杂交瘤细胞１Ｈ６Ｄ２、２Ｇ１Ａ６、３Ａ４Ａ８、３Ｅ３Ｅ７、４Ｇ１２Ｃ１０、４Ａ１０Ｃ２、５Ｆ４Ｂ６．试验结果表明,７株ＭｃＡｂｓ具有良好的ＨＣＶ特异性,间接ＥＬＩＳＡ法测得小鼠腹水ＭｃＡｂ效价为１：１０￣４－１：４×１０￣４;竞争抑制实验和相加指数测定证实７株ＭｃＡｂｓ识别相关的抗原表位;７株ＭｃＡｂｓ中１株为ＩｇＭ（５Ｆ４Ｂ６）,其它６株为ＩｇＧ（２ａ）。