表面活性剂CHAPS对紫膜脂双层微环境的作用

利用顺磁性自旋标记技术,探测在表面活性剂ＣＨＡＰＳ（３－〔（３－Ｃｈｏｌａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ）ｄｉｍｅｔｈｙｌ－ａｍｍｏｎｉｏ〕ｐｒｏｐａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ）作用下,紫膜脂双层微环境的物理参数（序参数Ｓ和旋转相关不同。表层序参数Ｓ值随ＣＨＡＰＳ浓度的增加而逐渐减小;深层旋转相关时间τｃ值开始随ＣＨＡＰＳ浓度的增加而增大,在ＣＨＡＰＳ浓度为５ｍｍｏｌ／Ｌ时,τｃ值呈现最大值,随着ＣＨＡ     

顺磁探针16－NS和荧光探针DPH在DPPG交插脂双层中的行为研究

研究了１６—ＮＳ和ＤＰＨ在被山莨菪碱诱导形成交插脂结构的ＤＰＰＧ脂质体中的行为。在交插脂双层结构中,标记在脂酰链末端的１６—ＮＳ的序参数明显增大,即同标记在靠脂酰链头部的５—ＮＳ的序参数的差距缩小。这些颇磁探针在交插脂双层结构中的运动比在非交插脂双层结构中受到更大的限制。ＤＰＨ荧光强度在ＤＰＰＧ由非交插脂双层转变为交插脂双层结构时急剧下降。引起这种下降的原因可能是膜脂在从非交插脂双层结构向交插脂双层结构的转变过程中使得ＤＰＨ处于一个更为亲水的环境中。     

顺磁探针16－NS和荧光探针DPH在DPPG交插脂双层中的行为研究

研究了１６—ＮＳ和ＤＰＨ在被山莨菪碱诱导形成交插脂结构的ＤＰＰＧ脂质体中的行为。在交插脂双层结构中,标记在脂酰链末端的１６—ＮＳ的序参数明显增大,即同标记在靠脂酰链头部的５—ＮＳ的序参数的差距缩小。这些颇磁探针在交插脂双层结构中的运动比在非交插脂双层结构中受到更大的限制。ＤＰＨ荧光强度在ＤＰＰＧ由非交插脂双层转变为交插脂双层结构时急剧下降。引起这种下降的原因可能是膜脂在从非交插脂双层结构向交插脂双层结构的转变过程中使得ＤＰＨ处于一个更为亲水的环境中。     

多重耐药铜绿假单胞菌群体感应系统与主动外排基因表达的研究

目的研究临床多重耐药铜绿假单胞菌群体感应(QS)系统与主动外排泵MexAB-OprM系统基因表达水平与抗生素耐药关系。方法收集苏州市立医院和上海市江湾医院2011年2月至6月间临床标本中分离的铜绿假单胞菌,定量分析细菌生物被膜形成能力;MIC法检测细菌抗生素耐药性,用多重聚合酶链反应(PCR)扩增群体感应系统lasI、lasR及主动外排泵系统mexA基因,实时定量逆转录RT-PCR检测lasI、lasR和mexA基因的相对表达量。结果临床样本分离出84株铜绿假单胞菌,其中产生物被膜菌58株,占比69%;多重耐药菌共24株,占比28.6%;多重耐药菌株中产生物被膜有11株,占45.8%;多重耐药菌中mexA基因表达上调有18株,占75%;lasI基因表达上调有8株,占33.3%。结论多重耐药菌株的生物被膜形成率显著低于非多重耐药组,多重耐药铜绿假单胞菌的主动外排泵MexAB-OprM系统基因表达出现显著上调,生物被膜菌的lasI基因表达显著上调而lasR基因的表达无明显变化。     

乙酸乙酯抽提法在ESR检测一氧化氮自由基中的应用

改进了用有机溶剂抽提检测一氧化氮(nitric oxide,NO)自由基的方法,并利用有机溶剂抽提法检测了小鼠心肌中NO的含量.有机溶剂可以把二乙基二硫代氨基甲酸钠(diethyldithiocarbamate, DETC)捕集NO的产物(DETC)₂-Fe²⁺-NO由水相中萃取并富集到酯相中,然后利用电子顺磁共振波谱仪(ESR)在常温下检测大体积样品中的NO.比较了几种不同的有机溶剂：正丁醇、乙酸丁酯、乙酸乙酯、三乙酸甘油酯、乙酸异戊酯等的萃取能力,发现乙酸乙酯是一种理想的提取溶剂.乙酸乙酯提取法可以使NO的量与ESR信号强度在20 μmol/L内有良好的线性,使ESR的检测灵敏度提高到200 nmol/L以下;(DETC)₂-Fe²⁺-NO对光比较敏感,见光易于分解;复合物在乙酸乙酯中避光保存于4℃可稳定十几天而无显著的变化.     

Pheophorbide a在脂质体介质中的光敏反应特性

Pheophorbidea(PPa)———叶绿素a的一种分解产物 ,是一种光敏剂 .用自旋捕捉和消自旋等ESR技术及激光光解技术研究了PPa在PBS和DPPC脂质体介质中光敏反应的Ⅰ型和Ⅱ型机制 .通过比较发现 ,DPPC脂质体的加入显著增强了PPa光敏反应产生PPa ^- (Ⅰ型 )和¹O₂ (Ⅱ型 )的能力 .这种增强反应源于脂质体对PBS中的PPa聚集态的解聚作用和它对PPa三重激发态的保护作用 .这表明 ,PPa在非均相脂质体体系中的光敏反应有别于均相水体系 ,而表现出更高的光敏效率 .此结果对解释属于非均相生物体系的肿瘤的光动力治疗机理有重要意义 .     

用乳化剂——水杨酸钠液体闪烁液测定水中氚

在生物学、医学、化学以及农业等研究中,常需要测量水中氘。因此每年消耗大量的甲苯、二甲苯和二氧六环等剧毒的有机溶剂,有害于人体和环境,由此,无毒和低毒闪烁液的研制便提到日程上。我们在乳化剂Triton X-100、TritonX-114和 OP-115中加入水杨酸钠或少量的 PPO形成新的闪烁体系,它们是低毒或是无毒的,而且价格便宜。当样品中含水量低于10％时,氘的计数效率大于15％。一、试剂与仪器1.试剂乳化剂:Triton X-114、TritonX-100、OP-115。水杨酸钠,闪烁体PPO,标准氘水(比活度为1677Bq·g~(-1),1982年2月)。本底水样取自天津深水井,近似无氘。     

Characteristics of photosensitization of Pheophorbide a in liposomal media

Pheophorbide a (PPa), a decomposition product of chlorophyll a, is a photosensitizer. The photosensitization mechanisms (Type Ⅰ and Type Ⅱ) of PPa in simple buffer solutions and in buffer solutions containing double-layered DPPC liposomes have been studied using techniques of ESR, spin-trapping, spin-counteraction and laser flash photolysis. The results showed that adding DPPC liposomes to the buffer solution caused an increase of efficiency of generating ~1O_2 and PPa~- by photoactivating PPa. The increase could be ascribed to the disaggregation of hydrophobic PPa caused by the addition of liposomes and the protective effect of liposomal media on the triplet state of PPa. It is concluded that the photosensitization of PPa in liposomal systems is different from that in simple aqueous solutions, and shows higher efficacy. The results will be useful to elucidating the mechanisms of photodynamic therapy of cancer.