药物诱导后的人大肠癌细胞的[Ca^2＋]i的变化

采用荧光分光光度计法检测维甲酸（ＲＡ）、１,２５（ＯＨ）２ＶＤ３及佛波酯（ＰＭＡ）诱导ＣＣＬ２２９细胞分化后［Ｃａ２＋］ｉ变化,并观察内质网（ＥＲ）特异的Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ抑制剂Ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ（ＴＧ）、ＩＰ３受体抑制剂Ｈｅｐａｒｉｎ对ＲＡ诱导［Ｃａ２＋］ｉ变化的影响,从而探讨ＲＡ诱导［Ｃａ２＋］ｉ变化与ＥＲ的关系。结果显示：ＲＡ和１,２５（ＯＨ）２ＶＤ３在数秒内引起［Ｃａ２＋］ｉ显著升高。在ＥＧＴＡ和Ｖｅｒａｐａｍｉｌ预处理细胞条件下,ＴＧ不能抑制ＲＡ引起Ｃａ２＋从细胞内钙池中外流,ＲＡ作用后ＴＧ仍能升高［Ｃａ２＋］ｉ。另外,Ｈｅｐａｒｉｎ也不能完全抑制ＲＡ升高［Ｃａ２＋］ｉ。提示ＲＡ诱导大肠癌细胞升高［Ｃａ２＋］ｉ可能通过ＥＲ上ＩＰ３敏感性和非敏感性钙池,亦可能细胞内存在除ＥＲ外对ＲＡ敏感的钙池。     

巯基修饰对中华仓鼠二氢叶酸还原酶的激活

脊椎动物二氢叶酸还原酶（ＤＨＦＲ,Ｅ．Ｃ．１．５．１．３）可被多种因素激活,如中性无机盐［１］、蛋白质变性剂［１～４］、巯基修饰剂［１,４～７］等．来源于鸡肝［５］、猪肝［６］、鼠肝［７］及鼠Ｌ１２１０细胞［４］二氢叶酸还原酶的巯基修饰激活已有报道．...     

分批发酵动力学模型参数的估算

本文基于通用的发酵动力学数学模型,导出了用于描述分批发酵特征的解析解。藉助于由FORTRAN－77编写的POWELL优化算法,以赖氨酸分批发酵为倒^［5］,一举估算出该解析解中所有的发酵动力学参数;μ_max、K_s、α、β、Y_G、Y_p,及m。结果表明t(1)用模型所得到的计算值与实测值具有较好的一致性,(2)赖氨酸合成速度取决于微生物的生长速度及浓度。     

双光子及共聚焦激光扫描显微术研究天花粉蛋白对人绒癌细胞的作用机制

天花粉蛋白(trichosanthin, TCS)是从中草药栝楼根中提取的一种核糖体失活蛋白,具有抗肿瘤和抗HIV功能.应用双光子及共聚焦激光扫描显微术结合特异性荧光探针Hoechst 33342、2′,7′-二氯荧光黄双乙酸酯 (DCFH-DA)、Indo-1和Fluo 3-AM,首次同时观察了TCS诱导人绒癌细胞（JAR细胞）凋亡过程中活性氧自由基（ROS）和细胞内钙离子浓度（［Ca²⁺］_i）的变化,实验结果表明TCS引起的［Ca²⁺］_i升高和ROS形成参与了TCS诱导的JAR细胞凋亡,并且ROS形成和［Ca²⁺］_i升高有关.共聚焦激光扫描显微术的研究结果表明,［Ca²⁺］_i升高不是导致ROS形成的主要原因,TCS诱导产生的ROS可能是通过TCS与JAR细胞膜表面受体作用介导的.     

《游蛇科锦蛇属（Elaphe Fitzinger）专著》［德］

《游蛇科锦蛇属（ＥｌａｐｈｅＦｉｔｚｉｎｇｅｒ）专著》［德］ＡＭＯＮＯＧＲＡＰＨＯＦＴＨＥＣＯＬＵＢＲＩＤＳＮＡＫＥＳＯＦＴＨＥＧＥＮＵＳＥＬＡＰＨＥＦＴＴＺＩＮＧＥＲＫｌａｕｓ．Ｄｉｅｔｅｒ＆ｈｏｂ著。德国印制,捷克ＫｏｅｌｔＺ勤ｉｅｎｎｄＣＤ刀ｂ...     

高产稳产聚羟基烷酸的重组大肠杆菌的构建

重组大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉＨＭＳ１７４（ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ） 含有携带聚羟基烷酸（ＰＨＡ） 合成基因（ ｐｈａＣＡＢ）＊＊ 的质粒ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ,是很有潜力的ＰＨＡ 生产菌,但存在着质粒不稳定和不能合成３羟基丁酸（３ＨＢ） 与３羟基戊酸（３ＨＶ） 共聚物［Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ）］ 的缺陷。将ＲＫ２ 质粒上的ｐａｒ ＤＥ 基因引入ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ 构成质粒ｐＪＭＣ２ ,该质粒可以在宿主Ｅ．ＣｏｌｉＨＭＳ１７４ 中稳定遗传。将培养基中的磷酸盐浓度降至１８ ｍ ｍｏｌ／Ｌ,发现Ｅ．Ｃｏｌｉ ＨＭＳ１７４（ｐＪＭＣ２） 能够以丙酸为前体合成Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ） ,其中３ＨＶ 在共聚物中的含量为５ ％ ～８ ％ 。在５Ｌ自动发酵罐中分批补料培养Ｅ．Ｃｏｌｉ ＨＭＳ１７４（ｐＪＭＣ２） ,培养基初始磷酸盐浓度为１５ ｍ ｍｏｌ／Ｌ,３０ ｈ 后每升培养液中干菌体可达４２－５ ｇ,Ｐ（３ＨＢｃｏ３ＨＶ） 占干重的７０ ％ ,其中３ＨＶ 在共聚物中的含量为４－９ ％ 。     

RT-PCR检测庚型肝炎病毒的研究

ＲＴ－ＰＣＲ检测庚型肝炎病毒的研究王孝华王健梅［１］林玉兵［２］陈禹保［２］孙钦喜［３］［１］湖南师大生物系［２］北京科海医疗生物工程公司［３］山东潍坊人民医院（湖南省临床检验中心,长沙４１０００６庚型肝炎病毒是Ｓｉｍｍｏｎｓ等于１９９５年证实的一种非Ａ－Ｅ型肝炎病毒［１］。随后在我国也证实有庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）存在［２］。有资料表明,ＨＧＶ在美国供血员中的流行情况较ＨＣＶ严重,并且与供血...     

有机锗对巨噬细胞激活与磷脂代谢转换的影响

有机锗(CGS、DGS、Ge-132)于活体内能激活小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ),后者于体外对肿瘤细胞Hca-16H₃和J6-2表达Mφ介导的肿瘤细胞毒(MTC),CGS与DGS的激活效应高于Ge-132,CGS为最强.它们激活的Mφ磷脂PC代谢转换较常驻Mφ(R-Mφ)明显增高,表现在［³H］胆碱掺入PC增加,CGS的增加效应最强.Ge-132激活的Mφ(Ge-12-Mφ)与R-Mφ比较,增加［³²P］Pi掺入PC,降低［³²P］Pi或［³H］肌醇掺入PI,但［³²P］Pi或［³H］肌醇掺入PIP、PIP₂未有显著差异.PC代谢转换的增加很可能是有机锗激活Mφ表达MTC的信息传递所需要的.     

两岁朱鹮（Nippon nipon）繁殖生态的研究

两岁朱鹮（Ｎｉｐｐｏｎ ｎｉｐｏｎ）繁殖生态的研究ＨＴＥＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＲＥＰＲＯＤＵＣＴＩＯＮＯＦＴＷＯＡＧＥＳＣＲＥＡＳＴＥＤＩＢＩＳ有关朱繁殖生态的研究,李福来、史东仇曾有报道￣［１,２］,１９９１年３月,我们在洋县花园乡瓦坪村,发现一对繁?..     

[^3H]Cortisol及[^3H]Dexamethasone在大鼠肝细胞膜上的特异结合位点

本研究应用［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ和［３Ｈ］ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ（ＤＥＸ）两种配基,观察到大鼠肝细胞膜上存在一类糖皮质激素（ＧＣ）特异结合位点。这些位点与ＧＣ的结合具有饱和性、高亲和力及低容量。其平衡解离常数（Ｋｄ）分别为１２．８４±６．５８ｎｍｏｌ／Ｌ和４０．２７±２３．４４ｎｍｏｌ／Ｌ;最大结合容量（Ｂｍａｘ）分别为２．５７±１．８４ｐｍｏｌ／ｍｇ蛋白质与０．６４±０．１８ｐｍｏｌ／ｍｇ蛋白质（ｃｏｒｔｉｓｏｌ,ｎ＝４;ＤＥＸ,ｎ＝３;±ＳＥ）。动力学实验数据所得的Ｋｄ值与Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析所得的Ｋｄ值结果基本一致。［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ和［３Ｈ］ＤＥＸ饱和结合实验数据用Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图分析,均显示为直线。Ｈｉｌｌ系数则分别为０．９８８０和０．９９９０．竞争抑制实验结果表明,ｃｏｒｔｉｓｏｌ对［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ的结合位点有高度特异性竞争,比其它几种类固醇（强的松、黄体酮、ＲＵ４８６、ＤＥＸ）的竞争力至少强４０倍以上．用放射自显影技术进行研究,也提供了［３Ｈ］ｃｏｒｔｉｓｏｌ特异结合银粒位于大鼠肝细胞膜上的依据。     

糖皮质激素对肝细胞内游离钙的作用

应用钙离子荧光指示剂ｆｕｒａ－２,对糖皮质激素（Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ,ＧＣ）是否影响肝细胞内游离钙（Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｆｒｅｅ　ｃａｌｃｉｕｍ,［Ｃａ２＋］ｉ作了初步探讨。结果发现,ＧＣ在短期内能升高肝细胞［Ｃａ２＋］ｉ,水平,并具有明显的量效关系。以１．０μｍｏｌ／Ｌ的Ｃｏｒｔｉｓｏｌ和１０．０μｍｏｌ／Ｌ的Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ效果最好。加入１．０μｍｏｌ／Ｌ的Ｃｏｒｔｉｓｏｌ０．２５ｍｉｎ即可引起肝细胞［Ｃａ２＋］ｉ的明显升高,到１０分钟时效应达高峰。此时与静息状态的肝细胞［Ｃａ２＋］ｉ水平相比,胞浆内游离钙升高了近３倍;与相应对照组比较,胞浆内游离钙升高具有明显的统计学意义,Ｐ＜０．０１。ＲＵ４８６为一种人工合成的糖皮质激素受体（Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＧＲ）的拮抗剂,它可以取消ＧＣ升高肝细胞［Ｃａ２＋］ｉ的效应,提示ＧＣ升高肝细胞内［Ｃａ２＋］ｉ可能与ＧＲ介导有一定关系。鉴于ＧＣ升高［Ｃａ２＋］ｉ时间较短,推测与肝细胞膜ＧＲ的非基因快速调节作用影响钙离子通道有关。     

有序差异显示:一种基因表达谱系统比较法

系统研究具有同一基因组的各种细胞群之间基因的差异表达谱十分重要。目前,研究基因差异表达的技术大致有ｍＲＮＡ差异显示［１］、ＲＤＡ［３］、ＳＳＨ［４、５］和ｃＤＮＡ阵列［６］等。近几年,还发展了一些研究基因差异表达谱系统的技术,如ＲＬＣＳ（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｌａｎｄ－ｍａｒｋｃＤＮＡｓｃａｎｎｉｎｇ）［８］、ＧＥＦ（ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓ－ｓｉｏｎｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ）［２］和ＲＮＡ指纹法［９］等。然而,这些技术或较为复杂,或灵敏度偏低。本文拟介绍一种有效的基因表达谱系统比较法——有序差…     

CO2激光辐照对酿酒酵母菌的诱变作用*

应用红外ＣＯ_２激光对甘蔗糖蜜工业性生产用酿酒酵母菌Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＡＳ２．１１８９进行辐照处理,经酵母菌糖蜜酒精发酵试验,发现红外ＣＯ_２激光对酿酒酵母菌具有诱变作用,并初步筛选到产乙醇含量有较大变化的辐照变异菌株;同时,通过对这些辐照变异菌株的乙醇脱氢酶同工酶的比较分析,进一步证实了红外ＣＯ_２、激光对酿酒酵母菌的诱变作用．从而为工业上利用红外ＣＯ_２激光对酿酒酵母菌进行诱变     

翅鳞伞深层发酵胞外多糖优化研究

采用PlackettBurman设计(PlackettBurman Design, PB)对影响翅鳞伞［ Pholiota squarrosa (Pers. Ex Fr.) Quel.］ AS 5245菌株发酵产糖的内在和外在相关因素进行了筛选,所选取的20个相关因素为葡萄糖、果糖、麦芽糖、酵母膏、胰蛋白胨、KH₂PO₄、K₂HPO₄、(NH₄)₂SO₄、NaNO₃、FeSO₄、MgSO₄、MnCl₂、ZnCl₂、FeCl₃、CuSO₄·5H₂O、维生素B1、起始pH、发酵温度、时间和装液量。在此基础上,再采用响应曲面法(Response Surface Methodology,RSM)对影响发酵产糖的内在关键影响因素酵母膏、果糖、MgSO₄、麦芽糖、ZnCl₂和发酵基质起始pH值的最佳水平范围作了进一步的研究与探讨,通过对二次多项回归方程求解得知,在上述自变量分别为6.0g/L、11.5g/L、0.5g/L、9.6g/L、38.6mg/L和5.3时,胞外多糖最大预测值为876.32μg/mL发酵醪,此预测可信度不仅被统计分析所验证,也实践所证实。     

Vero细胞毒素大肠菌（VTEC）的分离及表型和分子生物学特性的研究

２６株Ｖｅｒｏ细胞毒素（ＶＴ）阳性大肠菌,经分子生物学鉴定表明,其中１４株与ＥＨＥＣ探针杂交阳性,按Ｌｅｖｉｎｅ等的标准判定属产Ｖｅｒｏ细胞毒素大肠菌（ＶＴＥＣ）,其血清型为Ｏ_１５７：Ｈ_７３株（血便２株,脓血便１株）,Ｏ_２５７ＮＭ３株（血便１株,腹泻牛便２株）,Ｏ_２９样便１株）;其余１２株虽ＶＴ毒素阳性,但ＥＨＥＣ探针阴性,按标准判定尚难确认,有待进一步研究。     

吸附法固定化己酸菌

本文以多种无机材料和合成树脂为载体对己酸菌进行了固定化研究。发现吸附树脂、粒状焦渣、M₈载体等吸附材料对已酸菌有较好的固定化效率和较高的产酸率,以硅铝酸盐为主体的M₈载体物表现出独特的优越性,它可以使已酸菌的产酸期缩短78％;产酸率提高50～90％。还发现钕、铒、钬、镱、镝等稀有金属离子都不同程度地增加了已酸产量;而钴、镍等金属离子却使发酵体系的产酸量大大下降。     

反相高效液相色谱法制备HMC毒素纯品

本文采用反相高效液相色谱纯化制备了从玉米小斑病病菌Ｃ小种（ＨｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｒｉｕｍｍａｙｄｉｓＲａｃｅＣ）分离出来的毒素ＴｏｘｉｎＩ,经ＮＭＲ的结构分析证实此制备物纯度较高,达到结构分析要求。用氯仿提取含有ＨＭＣ的毒素培养滤液,经过多次ＴＬＣ展层层析（ＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ＝９：１）,刮取具有侵染活性的部分（Ｒ_ｆ＝０．４）溶解在小体积甲醇中备用。色谱柱为Ｗａｔｅｒｓ（制备型２５０ｍｍ×１０ｍｍ）填料为ＹＷＧ－Ｃ１８反相柱,粒度１０ｕｍ,流动相选用甲醇：水５５：４５     

神经节苷脂GM_3对人白血病J6－2细胞磷脂酰胆碱代谢的影响

神经节苷脂ＧＭ３诱导人单核样白血病Ｊ６－２细胞沿单核／巨噬细胞途径分化．在ＧＭ３诱导分化同时,Ｊ６－２细胞磷脂代谢发生了显著变化．采用（（３２）Ｐ）Ｐｉ、［ＧＨ３－３Ｈ］胆碱和［ＣＨ３－３Ｈ］ＳＡＭ参入实验对ＧＭ３影响Ｊ６－２细胞ＰＣ代谢的机制进行了初步的探讨．ＧＭ３促进［（３２）Ｐ］Ｐｉ参入Ｊ６－２细胞ＰＣ;抑制［ＣＨ３－３Ｈ］胆碱参入ＰＣ及ＰＣ合成的前体磷酸胆碱及ＣＤＰ－胆碱;ＧＭ３促进［ＣＨ３－３Ｈ］ＳＡＭ参入ＰＣ,但抑制［ＣＨ３－３Ｈ］ＳＡＭ参入ＰＣ合成的前体胆碱、磷酸胆碱和ＣＤＰ－胆碱．上述结果提示,ＧＭ３抑制Ｊ６－２细胞ＰＣ合成的ＣＤＰ－胆碱途径,促进ＰＣ合成的ＰＥ甲基化途径．     

人白细胞抗原-G1对NK92效靶识别过程的影响

人白细胞抗原G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)属非经典的主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)Ⅰ类分子,为自然杀伤细胞（natural killer,NK）抑制性受体的识别配体,可以向NK细胞传递抑制性信号,从而抑制NK细胞的细胞毒作用.为了研究HLA-G对NK与靶细胞识别作用的影响机制,采用激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞术对全长HLA-G1的表达和功能进行了探讨,并对效靶识别过程中靶细胞［Ca²⁺］_i（胞内自由钙离子浓度）进行了实时检测.结果发现,全长的HLA-G1表达于K562、JAR和CHO细胞的胞浆和胞膜上,它能够部分地抑制NK92的细胞毒作用. NK92与CHO和GFP-CHO细胞作用后,靶细胞［Ca²⁺］_i出现了明显的升高,HLA-G1的表达则抑制了靶细胞［Ca²⁺］_i的升高.结果提示：靶细胞［Ca²⁺］_i的升高是有效的细胞杀伤作用的必要条件,HLA-G的免疫抑制功能可能与靶细胞胞内钙离子浓度升高的抑制作用有密切关系.     

香菇菌发酵液的免疫调节作用

本文报道了香菇菌发酵液对原发性肝癌患者及不同免疫功能状态下的小鼠的免疫调节作用。结果表明,香菇菌发酵液可增加由环磷酰胺（ＣＰ）诱导的免疫功能低下的治疗组小鼠的脾细胞数,增强小鼠抗体形成细胞的功能,增加溶血素抗体产生,但其作用对预防组小鼠不明显。香菇菌发酵液能促进ＣｏｎＡ诱导的脾淋巴细胞转化（ＬＴ）,增加免疫玫瑰花环形成细胞（ＩＲＦＣ）率,提高红细胞Ｃ_３ｂ受体花环（ＲＢＣ－Ｃ_３ｂＲＲ）结合率。１８例原发性肝癌患者的体外ＬＴ及ＲＢＣ－Ｃ_３ｂＲＲ