胰岛素及其苄基衍生物在钠-氨系统中的还原及活力恢复

(1)应用三种不同的方法制得了胰岛素苄基衍生物。胰岛素如果用钠-氨还原再与氯化苄作用,可以得到不再有完整二硫键存在的充分苄基化的产物。(2)将胰岛素、S-磺酸型A及B链混合物或者胰岛素苄基衍生物,在钠-氨内还原,然后在稀碱溶液中重氧化,都可以使胰岛素活力再生。用胰岛素或S-B磺酸型A及B链混合物时,经过此处理则活力可以恢复5—10%。用胰岛素苄基衍生物时则一般活力恢复1—2%。(3)从充分苄基化了的胰岛素衍生物能恢复活力这一事实说明可以通过人工合成的A和B链最后合成胰岛素。(4)观察了A和B键混合物巯基氧化和活力再生的过程,并进行了讨论。     

血红素与异咯嗪单核苷酸的分子络合物

血红素与FMN反应后的差光谱在500mμ—800mμ范围内有三个差吸收峰,波长分别为525mμ,610mμ及685mμ。用所谓连续变易法作图结果表明反应产物包括:血红素比FMN等于1:1,1:2及1:4等三种络合物,结合紧密程度依次降低。老化血红素与FMN反应只能产生1:1的络合物,表现出一个差吸收峰(585mμ)在过量连二亚硫酸钠存在下差光谱形状略为不同,血红素及FMN皆为全还原型时,络合物络合能力降低一个数量级。在隔绝空气的条件下逐步加入还原剂可以观察到在二者未完全还原前可能尚有其他络合物的生成。无论血红素是否经过老化它与FMN络合生成的产物差光谱皆受溶液离子强度的影响。对血红素与FMN络合的物质进行了讨论,所生成的某些络合物很可能是属于所谓电荷转移形式。这两种生物氧化中重要辅基如生成电荷转移络合物,可能与呼吸链中的电子传递有密切关系。     

细胞膜毒素D_1的氨基酸顺序

利用DABITC-PITC双偶合手工顺序测定法对胰凝乳蛋白酶酶解肽段及CNBr肽片段进行分析结果,阐明了中华眼镜蛇细胞膜毒素D_1的全部氨基酸顺序,D_1以它的特色顺序(28～31)Ser·Asn·Lys·Met区别于其他同系物。本文还对此中段可变区的功能含义进行了讨论。     

分子神经生物学的现状和展望

分子生物学与神经科学相结合便产生了分子神经生物学,其任务是在分子水平上研究神经系统的结构与功能。高等动物的神经系统是自然界中最复杂的系统,这个任务必然是长期而巨大的,目前还只是创建阶段,重点在于阐述神经细胞活动的分子基础。它的发展和成熟有赖于分子生物学,细胞生物学和电生理学的多种新技术的发展和多学科交叉。如70年代以来,神经内分泌学与激素内分泌学在分子水平上汇合;在流动镶嵌理论基础上完善可兴奋膜结构;多肽生物学和神经生物学相互渗透;受体和通道的结构与功能关系也是蛋白质研究的     

有序差异显示法研究大鼠脑特异基因

有序差异显示法(ordered differential display, ODD)是一种简便的系统研究基因表达谱差异的有效方法. 采用链霉亲和素和生物素的特异亲和性质分离目标cDNA片段, 从而排除非特异DNA片段的影响后, ODD法的重复性和可靠性得到了进一步的改进和完善; 随后利用ODD法对胚胎大鼠脑与身体的基因表达差异进行了初步研究, 得到几十条脑特异表达的EST(expressed sequence tag)片段; 再通过反向杂交、RT-PCR实验和EST结果分析, 验证了改进后的ODD方法的结果可靠, 假阳性率低, 重复性好, 同时, 还对克隆到的脑特异全长新基因rZIC的生理功能进行了初步研究. 将rZIC的反义核酸注射到小鼠侧脑室, 测定小鼠的行为变化. 通过分析实验结果发现, rZIC对维持成年小鼠的运动功能有一定的作用.     

严师良友——邹承鲁先生八秩华诞

俗话说 :“师父引进门”。回首近半个世记的科研生涯和起伏、艰辛 ,我的最大幸事在于从一开始便遇到了老师邹承鲁先生。四十五年前的夏天 ,作为一名学生到生化所酶室实习。我被琳琅满目的玻璃仪器、紧张有序的实验分析、畅所欲言的学术氛围和邹先生的严密思路和一语中的的谈吐所深深吸引。一年后 ,作为北大毕业生 ,我又被幸运地分配到心仪已久的生化所酶室。这时恰好遇上“向科学进军”高潮 ,就此深深卷入了“人工合成胰岛素”研究的全过程。真正是“三生有幸”。在这个“攀登科学高峰”的大进军里 ,正是在王应睐、邹承鲁等老一辈科学家严谨…     

ZNC(C)PR及其类似物对大鼠脑内CNDF mRNA表达的影响

利用反转录ＰＣＲ的方法,以甘油醛３磷酸脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）ｍＲＮＡ作为内源参照物,测定了记忆增强肽ＺＮＣ（Ｃ）ＰＲ及其类似物对大鼠海马和皮层中胆碱能神经分化因子（ＣＮＤＦ）ｍＲＮＡ表达的影响。ＺＮＣ（Ｃ）ＰＲ能显著地增强ＣＮＤＦｍＲＮＡ的表达,并在给药后１８ｈ达到高峰（海马３．０２倍,皮层５．３３倍,与对照组比较Ｐ＜０．０１）。ＺＮＣ（Ｃ）ＰＲ受体的激动剂ＮＬＰＲ也能诱导ＣＮＤＦｍＲＮＡ的表达,并比ＺＮＣ（Ｃ）ＰＲ活性更高。ＺＮＣ（Ｃ）ＰＲ受体的拮抗剂ＺＤＣ（Ｃ）ＰＲ能部分地阻断ＺＮＣ（Ｃ）ＰＲ的作用。精氨酸加压素（ＡＶＰ）只有微弱的活性,而催产素（ＯＸＴ）则没有活性。以上结果表明ＣＮＤＦ是ＺＮＣ（Ｃ）ＰＲ作用的靶基因之一,且这种作用是通过受体介导的。     

细胞膜毒素对线粒体上钙通道的抑制

本文探讨膜毒素对鼠肝线粒体Ca~(++)传递和Ca~(++)结合亲和力的影响。当膜毒素的浓度为7.14毫微克分子/毫克线粒体蛋白时,处理过的线粒体传递Ca~(++)能力下降至原来一半左右。本实验做Ca~(++)结合膜毒素处理线粒体的Scatchard图呈直线(K_d=48.2μM,结合Ca~(++)数目N=341毫微克分子/毫克线粒体蛋白)。就是说,膜毒素抑制线粒体高亲和力Ca~(++)结合部位,而不影响低亲和力Ca~(++)结合部位。我们认为膜毒素作用位点在于线粒体高亲和力Ca~(++)结合部位。     

中华眼镜蛇毒膜毒素对鼠肝线粒体膜的作用位点的研究

中华眼镜蛇毒膜毒素C(MT-C)对鼠肝完整线粒体的呼吸有明显抑制作用,但不影响完整线粒体的氧化磷酸化活力以及线粒体碎片上F_1-ATP酶的活力表现。根据膜毒素(MT-C)明显地抑制Ca~(++)诱导下的线粒体6态呼吸速度和质子释放,本文认为膜毒素(MT-C)在鼠肝线粒体上的真正作用位点可能位于内膜上Ca~(++)的结合位点附近,而不在呼吸酶系或磷酸化酶系本身。