心肌型脂肪酸结合蛋白胶体金检测试纸条的制备和初步应用

目的应用胶体金免疫层析法制备检测全血或血清样本中心肌型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）的检测试纸条,用于急性心肌梗塞（AMI）的早期辅助诊断。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记鼠抗心肌型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体,喷于玻璃纤维膜上制成胶体金结合物垫,将另一株鼠抗心肌型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体和抗鼠二抗分别包被检测线和质控线,组装成试纸条进行灵敏性、特异性、精密性、稳定性及临床样品检测。结果该试纸条的检测灵敏度为10ng／mL,15min内可判定结果;与肌钙蛋白I、C反应蛋白、肌酸激酶、人心肌肌红蛋白无交叉反应。检测240份临床标本,与临床诊断结果进行配对分析,阳性符合率95．83％、阴性符合率100％、总符合率97．92％。结论制备的H-FABP检测试纸条有良好的灵敏性、特异性,可用于早期AMI的辅助诊断。     

神经元特异性烯醇酶和癌胚抗原胶体金免疫层析联合检测

目的：应用双抗夹心胶体金免疫层析方法,实现对神经元特异性烯醇化酶（NSE）和癌胚抗原（CEA）两种肺癌肿瘤标志物的快速联合检测。方法：采用柠檬酸三钠还原法制备20nm胶体金颗粒,并分别对鼠抗NSE、CEA单克隆抗体进行标记,分别与之相配对的另一种单克隆抗体被喷在硝酸纤维素膜（NC膜）上,制成免疫层析检测试条。溶液中的抗原NSE、CEA与金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上固定的抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果：该试纸条只与NSE、CEA有特异性反应,与CA125、CYFRA21-1、TPA等肺癌标志物无交叉反应。标准样品中两种抗原的检测灵敏度分别可达到5ng/mL和3ng/mL。结论：胶体金免疫层析技术检测NSE、CEA特异性强、灵敏度高、简便快速,不需特殊仪器设备,有广泛应用价值。     

CK-MB、cTnI、Myo和NT-proBNP联合检测在诊断急性心肌梗死中的应用

为了评估肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌红蛋白(Myo)和N端脑钠肽前体(NT-proBNP)这4种体外诊断试剂在诊断急性心肌梗死中的价值,本研究检测了200例急性心肌梗死患者和100例健康受试者血清中各项指标的水平。研究结果显示,急性心肌梗死患者的血清CK-MB、cTnI、Myo和NT-proBNP水平依次为36.74 ng/mL、14.29 ng/mL、381.96μg/mL和1 375.54 pg/mL,而健康受试者的血清CK-MB、cTnI、Myo和NT-proBNP水平依次为3.21 ng/mL、0.33 ng/mL、65.2μg/mL和72.78 pg/mL。心肌梗死患者的上述4种指标均显著高于健康受试者(p0.05)。4项指标中,cTnI的敏感度、特异性和曲线下面积均为最高,依次为0.764、0.719和0.747。此外,4项指标联合诊断的敏感度、特异性和曲线下面积依次为0.836、0.812和0.828,均高于单独指标诊断。本研究说明CK-MB、cTnI、Myo和NT-proBNP水平在急性心肌梗死患者的血清中明显升高,并且4项指标联合检测有利于急性心肌梗死的早期诊断。     

神经元特异性烯醇酶和癌胚抗原胶体金免疫层析联合检测

目的:应用双抗夹心胶体金免疫层析方法,实现对神经元特异性烯醇化酶(NSE)和癌胚抗原(CEA)两种肺癌肿瘤标志物的快速联合检测。方法:采用柠檬酸三钠还原法制备20nm胶体金颗粒,并分别对鼠抗NSE、CEA单克隆抗体进行标记,分别与之相配对的另一种单克隆抗体被喷在硝酸纤维素膜(NC膜)上,制成免疫层析检测试条。溶液中的抗原NSE、CEA与金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上固定的抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果:该试纸条只与NSE、CEA有特异性反应,与CA125、CYFRA21-1、TPA等肺癌标志物无交叉反应。标准样品中两种抗原的检测灵敏度分别可达到5ng/mL和3ng/mL。结论:胶体金免疫层析技术检测NSE、CEA特异性强、灵敏度高、简便快速,不需特殊仪器设备,有广泛应用价值。     

定量检测猕猴血清中重组人源化抗狂犬病毒单克隆抗体间接ELISA法的建立

目的：建立定量检测血清中重组人源化抗狂犬病毒单克隆抗体（HuMabs）NM57的间接ELISA法,为药代动力学研究提供一种简单快速的方法。方法：采用狂犬病毒糖蛋白包被酶标板、HRP标记的IgG-Fc段为标记抗体,建立定量检测HuMabsNM57的间接ELISA法,并对其特异性、灵敏度、精密度及准确度进行检测。结果：间接ELISA法检测HuMabsNM57的灵敏度为5ng／mL,组内及组间精密度分别为2．6％-6．0％、8．5％-11．3％。结论：建立了灵敏度高、特异性强的检测HuMabs NM57的间接ELISA法,精密度及准确度均符合药代动力学要求,可用于猕猴及人血清中HuMabsNM57的检测。     

重组人血清白蛋白抗体检测方法的建立及确证

目的：建立一种高灵敏度、高特异性、操作简单快捷、通量高的重组人血清白蛋白（rHSA）抗体检测方法。方法：采用桥连ELISA法,即将rHSA包被于96孔板,加入待测血样及阳性对照,用辣根过氧化物酶标记的rHSA检测,显色读取D_450nm/D_570nm值：用此方法确定临界值、方法灵敏度、精密度、血药浓度对检测方法的影响,再以免疫清除法进行确证。结果：通过桥连ELISA法确定临界值为0．0492,方法灵敏度为352ng／mL,方法板间、板内精密度均小于20％,且血药中的rHSA浓度为20μg／mL时不影响抗体的检测;经免疫清除法可将假阳性样本排除,从而提高了方法的特异性．结论：建立的方法可以准确、快速地检测出rHSA的特异性抗体。     

胶体金免疫层析法检测猪链球菌2型的研究

目的:制备胶体金免疫层析试纸检测猪链球菌2型.方法:用柠檬酸盐还原法制备胶体金颗粒,标记猪链球菌2型多克隆抗体,通过免疫层析作用对猪链球菌2型进行检测,并对试纸条的敏感性、特异性、稳定性进行评价.结果:每毫升胶体金最佳抗体标记量为22μg/mL,最佳包被抗体浓度为2 mg/mL,最佳BSA封闭浓度为1.5%,建立的胶体金免疫层析试纸条栓出猪链球菌2型的下限为106 CFU/mL,从检测到结果判断时间为5～15 min,与其他常见致病菌及链球菌属中15个群无交叉反应.结论:获得了检测猪链球菌2型的胶体金免疫层析试纸,该法操作简便,灵敏度高,特异性强,可用于猪链球菌的快速初筛和检测.     

土拉弗朗西斯菌胶体金免疫层析快速检测方法的建立

目的建立胶体金免疫层析技术快速定量检测土拉弗朗西斯菌。方法利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立土拉弗朗西斯菌的快速检测方法,评价其特异性和敏感性,并拟合检测曲线进行定量检测。在面粉、饼干、果冻、梨汁等食品样品中添加土拉弗朗西斯菌的FopA蛋白模拟污染样品,评价该方法对固体、半固体、液体等食品样品的检测能力。结果该法可在10min内完成定性和定量检测,灵敏度为750ng／ml,线性范围750～24000ng/ml、回收率为56．7％-89．2％。结论所建立的检测土拉弗朗西斯菌的胶体金免疫层析方法,能快速、灵敏、特异、准确地检测样品中的土拉弗朗西斯菌,适用于现场快速检测。     

血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1与脓毒症患儿心肌损伤指标的相关性及与预后的关系

摘要 目的：探讨血清降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）、糖原磷酸化酶脑型（GPBB）、高迁移率族蛋白B1（HMGB1）水平与脓毒症患儿心肌损伤指标以及预后的关系。方法：选择2019年3月至2022年3月中国人民解放军联勤保障部队第九二六医院收治的271例脓毒症心肌损伤患儿（心肌损伤组）和同期收治的227例脓毒症感染性疾病但未发生心肌损伤患儿（对照组）。检测两组血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1水平以及心肌损伤指标水平。应用Pearson相关系数分析血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1与心肌损伤指标之间的相关性。根据心肌损伤组患儿28d的预后情况分为死亡组和存活组，脓毒症心肌损伤患儿死亡的危险因素通过多因素Logistic回归分析。结果：心肌损伤组血清PCT、肌红蛋白（Mb）、CRP、GPBB、心肌肌钙蛋白I（cTnI）、HMGB1、肌酸激酶同工酶（CK-MB）水平均高于对照组（P＜0.05）。血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1水平均与血清Mb、CK-MB、cTnI水平呈正相关（P＜0.05）。死亡组脓毒症休克比例、APACHE Ⅱ评分、SOFA评分、尿素氮、血肌酐、血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1水平高于存活组（P＜0.05）。前白蛋白低于存活组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，高APACHE Ⅱ评分、存在脓毒症休克、高PCT、高CRP、高GPBB、高HMGB1、高cTnI是脓毒症患儿预后的危险因素（P＜0.05）。结论：脓毒症心肌损伤患儿血清PCT、CRP、GPBB、HMGB1水平增高，且与预后不良以及心肌损伤指标有关。     

急性心肌梗死患者血浆BNP、NT-proBNP、MYO及cTnI水平的表达及临床意义

目的:探讨急性心肌梗死患者血浆B型利钠肽(BNP)、N-末端B型利钠肽原(NT-proBNP)、肌红蛋白(MYO)及心肌肌钙蛋白I(cTnI)的表达及临床意义。方法:选择2015年8月至2016年8月我院收治的162例急性心肌梗死患者记为观察组,另选择162例同期于我院健康体检志愿者为对照组进行对比研究。应用免疫分离法检测两组血浆BNP、NT-proBNP、MYO及cTnI水平。对比两组血浆BNP、NT-proBNP、MYO及cTnI的表达水平,以及BNP、NT-proBNP、MYO、cTnI单独检测和联合检测在急性心肌梗死诊断中的灵敏度及特异性,并分析各指标之间的相关性。结果:观察组血浆BNP、NT-proBNP、MYO及cTnI水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。四项联合检测的灵敏度分别高于血浆BNP、NT-proBNP、MYO及cTnI单独检测,特异性分别高于血浆NT-proBNP、MYO单独检测,差异有统计学意义(P0.05),四项联合检测的特异性分别高于血浆BNP、cTnI单独检测,但差异无统计学意义(P0.05)。通过Spearman相关性分析显示,观察组血浆BNP、NT-proBNP、MYO及cTnI各指标水平之间呈正相关(P0.05)。结论:血浆BNP、NT-proBNP、MYO及cTnI在急性心肌梗死中具有明显高表达,且四项联合检测的灵敏度及特异性较高,各指标之间存在正相关关系,可为急性心肌梗死早期诊断提供科学的依据,值得临床推广。     

糖原磷酸化酶BB在心脏直视手术后心肌损伤中的判定价值

目的:探讨糖原磷酸化酶BB对心脏直视手术后心肌损伤的判定价值.方法:108例行心脏瓣膜置换手术患者,分别于围术期多个时点取桡动脉血,测定血清糖原磷酸化酶BB、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸磷酸激酶同工酶(CKMB)的水平,并检测心肌细胞凋亡程度.结果:血清糖原磷酸化酶BB于体外循环主动脉开放后最早达峰值,其峰值与cT...     

急性心肌梗死患者冠脉搭桥术前中性粒细胞-淋巴细胞比率与围术期心肌损伤相关分析

目的：探讨急性心肌梗死患者冠脉搭桥（CABG）术前中性粒细胞．淋巴细胞比率（NLR）与围术期心肌损伤的关系,为,临床CABG围术期心肌保护提供参考依据。方法：选取2012年1月至2012年6月于首都医科大学附属北京安贞医院因急性心肌梗死接受冠脉搭桥手术（CABG）患者210例,收集术前血常规及术后肌钙蛋白I（cTnI）？Life酸激酶同工酶（CK-MB）,计算NLR;采用四分位法根据NLR水平将患者分为四组,比较各组cTnI及CK—MB峰值,多元逐步回归分析NLR与cTnI及CK-MB峰值的相关性。结果：随着NLR水平升高,高血压病史和射血分数〈50％患者比例逐渐增多;白细胞计数、术后CK-MB及cTnI峰值、术后血肌酐值均逐渐增加;多元逐步回归分析显示,NLR、WBC分别与cTnI峰值呈正相关（r=0．526,r=0．186,P〈0．05）。结论：术前NLR、WBC与cTnI峰值呈正相关,NLR可能是反应急性心肌梗死患者冠脉搭桥围术期心肌损伤的良好标志物。     

利用表面等离子体共振仪检测黄瓜花叶病毒

目的：研究一种便捷、高效地检测黄瓜花叶病毒（CMV）的方法。方法：利用表面等离子体共振（SPR）技术检测CMV。首先用11-MUA修饰SPR金片,再用EDC／NHS活化,之后通过NHS酯基与CMV抗体结合,用BSA封闭未结合的NHS酯基。将SPR金片装入SPR仪,通入待检样品,通过折射率变化实时监测实验过程。结果：该方法检测CMV的灵敏度能够达到10ng／mL,具有良好的特异性,与同属的花生矮化病毒、番茄不孕病毒无交叉反应。结论：建立的SPR方法操作简单、灵敏度高、特异性好,是一种新的高效检测CMV的方法。     

主动脉内球囊反搏在急性心肌梗死急诊PCI术后无血流现象中的应用

目的：探讨主动脉内球囊反搏（IABP）在急性心肌梗死（AMI）急诊冠脉介入术（PCI）后无复流现象（NR）中的治疗作用。方法：分析自2006年1月至2009年12月因急性心肌梗死（AMI）行PCI术后无血流患者22例资料,采用随机分组方法将其中12例运用IABP治疗,其余10例为对照组,观察术后10天内心肌损伤标志物、脑钠肽（BNP）恢复情况,心肌损伤标志物包括肌红蛋白（MYO）,肌酸激酶同工酶（CK-MB）,肌钙蛋白（ICTNI）;治疗10天后应用彩色超声心动图测量患者左房内径、左室内径、左室射血分数（LVEF）;并随访3个月、6个月左房内径、左室内径、左室射血分数（LVEF）变化情况。结果：IABP治疗组患者心肌损伤标志物指标时间-浓度曲线显示指标下降明显快于对照组,与对照组相比差别有统计学意义（P〈0.05）;IABP组BNP峰值较对照组提前,IABP治疗组BNP指标时间-浓度曲线显示指标下降明显快于对照组,与对照组相比差别无统计学意义（P〉0.05）;超声心动图测量两组患者10天、3个月及6个月时左房内径、左室内径差别及LVEF差别有统计学意义（P〈0.05）。结论：IABP能够加速降低AMI急诊PCI术后发生无复流现象患者升高心肌损伤标志物的水平;使BNP峰值提前并改善10天、3个月及6个月时左房内径、左室内径及EF值对心功能具有一定的改善作用。     

Rapid detection of glycyrrhizin by immunochromatographic assay

An immunochromatographic assay was developed for detecting glycyrrhizin (1). The qualitative assay is based on a competitive immunoassay using anti-1 monoclonal antibody (MAb) and a detector reagent that contains colloidal gold particles coated with anti-1 MAb. The immunochromatographic strip test, which has a detection limit of 250 ng/mL, is useful as a rapid screening method for detecting glycyrrhizin in plants, biological fluids and food samples.     

血清肺表面活性蛋白A动态变化与非小细胞肺癌患者放射性肺炎发生的相关研究

目的：探讨接受放疗的非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清中肺表面活性蛋白A（PS-A）水平的动态变化与放射性肺炎（RP）发生的关系。方法：对68例接受三维适形放疗的Ⅲ期肺癌患者采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测于放疗前、放疗剂量达40～50 Gy时及放疗后4周血清中PS-A水平。结果：25例患者发生RP。RP者中放疗前PS-A为（38.6±20.8）ng/mL,放疗中升高达（51.4±19.3）ng/mL（P〈0.05）,放疗后PS-A高于放疗前[（78.2±21.5）ng/mL;P〈0.05]。在无RP者中放疗前PS-A与放疗中、后均相似（P〉0.05）。RP者与无RP者中放疗前PS-A相似（P〉0.05）,放疗中及放疗后前者PS-A明显高于后者（P〈0.05）。结论：PS-A水平变化与RP发生密切相关,动态监测其变化可早期预测RP发生,可作为急性放射性肺损伤易感性指标。     

金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌

目的:建立金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌(土拉菌)的方法,评价其灵敏度、特异性、重复性及其应用。方法:以小鼠抗土拉菌脂多糖单克隆抗体作为捕获抗体包被硝酸纤维素膜、兔抗土拉菌多克隆抗体作为检测抗体标记胶体金,通过金标银染技术放大检测信号,建立金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌体系;评价该方法的灵敏度、特异性和重复性;以经荧光定量PCR定量的土拉弗朗西斯菌为检测对象,比较金标银染免疫渗滤法和免疫层析法。结果:金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌的最小检出量为1.0×103 CFU/mL,灵敏度高于免疫层析法;检测大肠杆菌、炭疽芽孢杆菌、布鲁菌和鼠疫耶尔森菌的结果均为阴性;密封保存的检测卡80 d内重复性良好,100 d后反应强度略有降低。结论:金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌敏感性高、特异性强、重复性好,且方便快捷,不需要仪器设备,可作为快速检测土拉弗朗西斯菌的首选方法。     

赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮-二联胶体金免疫层析试纸条的制备及应用

【背景】真菌毒素为真菌的有毒次级代谢产物,混合污染时毒性显著增强,可对人类和动物健康造成严重伤害。制备二联胶体金免疫层析试纸条,实现对常见真菌毒素混合污染的快速监测,具有重要意义。【目的】制备赭曲霉毒素A (Ochratoxin A,OTA)和玉米赤霉烯酮(Zeralenone,ZEN)金标单克隆抗体,基于免疫层析原理,采用竞争反应模式,建立二联胶体金免疫层析检测法用于污染样品中OTA和ZEN的同时快速检测。【方法】采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,并标记获得两种真菌毒素金标单克隆抗体,通过优化相关条件,建立稳定的二联胶体金免疫层析检测方法,用于同时检测谷物和饲料样品中的OTA和ZEN。【结果】制备的OTA和ZEN二联胶体金试纸条对OTA和ZEN的检测限分别为0.625 ng/mL和1.25 ng/mL,且与谷物和饲料中其它真菌毒素(黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、桔青霉毒素、展青霉毒素和呕吐毒素)均无交叉反应,人工添加试验结果准确。对天然样本检测结果表明该方法与LC-MS/MS一致性良好。【结论】本研究制备的二联胶体金试纸条可用于实际样品中OTA和ZEN的同时快速筛查。