水稻高脯氨酸愈伤组织变异体盐胁迫下氨基酸和蛋白质组分的变化

游离氨基酸组分分析表明,水稻培养细胞中谷氨酸和丙氨酸含量很高,占氨基酸总量的４０％。高脯氨酸愈伤组织变异体总游离氨基酸含量比原型高４５．５％,其中脯氨酸增加最多,其次是雨氨酸和谷氨酸。当ＮａＣｌ１００ｍｍｏｌ／Ｌ处理时变异体和原型的总氨基酸都增加,而变异体的增量约为原型增量的３倍。蛋白水解氨基酸组分中变异体和原型各氨基酸的相对含量无大差异。蛋白质双向电泳表明,高脯氨酸变异体的蛋白组分发生变化,明显比原型多４个蛋白点。在ＮａＣｌ１００ｍｍｏｌ／Ｌ处理下原型亦产生５３．３ｋＤ蛋白,变异体中该蛋白的含量变得更多。盐胁迫下变异体和原型的蛋白质组分变化的差异十分显著,主要表现在蛋白质等电点的变化不同。     

水稻高脯氨酸愈伤组织变异体盐胁迫下氨基酸和蛋白质组分的变化

游离氨基酸组分分析表明,水稻培养细胞中谷氨酸和丙氨酸含量很高,占氨基酸总量的４０％。高脯氨酸愈伤组织变异体总游离氨基酸含量比原型高４５．５％,其中脯氨酸增加最多,其次是丙氨酸和谷氨酸。当ＮａＣｌ１００ｍｍｏｌ／Ｌ处理时变异全和原型的总氨基酸都增加,而变异体的增量约为原型增量的３倍。蛋白水解氨基酸组分中变异体和原型各氨基酸的相对含量无大差异。蛋白质双向电泳表明,高脯氨酸变异体的蛋白组分发生变化,明显     

钙在无花果细胞盐诱导脯氨酸积累中的作用

接种于含ＮａＣｌ培养基的无花果愈伤组织细胞生长极显著受抑,Ｎａ＾＋含量增加,Ｋ／Ｎａ比值下降,游离脯氨酸积累。培养基中添加一定量ＣａＣｌ２不仅在一定程度上缓解盐分对生长的抑制作用,增加Ｋ＾＋／Ｎａ＾＋比,而且明显促进游离脯氨酸积累。如何在添加钙的同时再添加细胞调素活性抑制剂盐酸氯丙嗪或盐酸三氟拉嗪,均使钙促进的脯氨酸积累受到明显抑制,表明盐胁迫诱导的脯氨酸积累可能涉及细胞Ｃａ－ＣａＭ系统。     

钙在无花果细胞盐诱导脯氨酸积累中的作用

接种于含ＮａＣｌ 培养基的无花果愈伤组织细胞生长极显著受抑,Ｎａ＋ 含量增加,Ｋ／Ｎａ 比值下降,游离脯氨酸积累。培养基中添加一定量ＣａＣｌ２ 不仅在一定程度上缓解盐分对生长的抑制作用,增加Ｋ＋／Ｎａ ＋ 比,而且明显促进游离脯氨酸积累。如果在添加钙的同时再添加细胞钙调素活性抑制剂盐酸氯丙嗪（ＣＰＺ） 或盐酸三氟拉嗪（ＴＦＰ） ,均使钙促进的脯氨酸积累受到明显抑制,表明盐胁迫诱导的脯氨酸积累可能涉及细胞ＣａＣａＭ系统。     

盐胁迫下外源ABA对谷子耐盐愈伤组织生理生化特性的影响

外源ＡＢＡ可使谷子胚性愈伤组织生长减缓,使正常胚性愈伤组织在Ｎａ胁迫下与耐盐生俞伤的生长差异消失,脯氨酸含量在无ＮａＣｌ或１％ＮａＣｌ胁迫下分别提高１４０％和９．３％,而可溶蛋白含量均上降,并有新的ＳＤＳ电泳蛋白南带（９０ｋＤ）出现,过氧化物酶活性及ＳＯＤ活性增高。     

小麦耐盐变异体的筛选Ⅱ．小麦耐盐细胞系的筛选及生理生化特性的分析

将诱导出的胚性愈伤组织采用：①逐级提高盐浓度进行胁迫筛选;②直接转入高浓度胁迫筛选;③先用羟脯氨酸（Ｈｙｐ）筛选后再转入高浓度盐中进行胁迫筛选,结果表明三种筛选方法其效果为③＞②＞①,即先用Ｈｙｐ筛选再进一步盐胁迫筛选效果最好。并对选出的耐盐细胞进行了生长量测定和生理生化特性的研究,表明耐盐细胞系脯氨酸含量不仅稳定,而且远高于对照,Ｋ￣＋／Ｎａ￣＋也大于对照,ＳＯＤ活性增加,小分子ＳＯＤ含量增加,本文并对有关问题进行了讨论。     

CO2倍增环境生长的小麦幼苗对盐胁迫的生理反应

研究了ＣＯ２倍增／盐胁迫对不同抗盐性冬小麦幼苗有机干重,Ｋ＾＋,Ｎａ＾＋,Ｃａ＾＋＋,Ｍｇ＾＋＋含量,脯氨酸水平及蛋白质变化的效应,表明两种小麦生长在１５０ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ下,其有机干重,Ｋ＾＋,Ｃａ＾＋＋,Ｍｇ＾＋＋含量下降,而Ｎａ＾＋明显长高;ＣＯ２倍增可增加小麦有机干重,使一价阳离子Ｋ＾＋,Ｎａ＾＋含量升高,二价阳离子Ｃａ＾＋＋,Ｍｇ＾＋＋呈下降趋势,同时有利于游离脯氨酸的积累,并为植物     

盐度和CO2倍增环境下碱蓬幼苗呼吸酶活性的变化

研究了生长在正常大气ＣＯ２和ＣＯ２倍增环境中的盐生植物碱蓬（Ｓｕａｅｄａｓａｌｓａ）幼苗呼吸酶活性对ＫＣｌ和ＮａＣｌ的反应．结果表明,在ＣＯ２倍增（７００μｌ·Ｌ－１）和正常大气ＣＯ２（３５０μｌ·Ｌ－１）下,３００ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ和ＮａＣｌ均能抑制琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）活性,而异柠檬酸脱氢酶（ＩＤＨ）活性为ＮａＣｌ抑制、ＫＣｌ促进;ＮａＣｌ和ＫＣｌ明显抑制细胞色素氧化酶（ＣＯ）和光呼吸中乙醇酸氧化酶（ＧＯ）、羟基丙酮酸还原酶（ＨＰＲ）活性;并指出在ＫＣｌ胁迫下,ＣＯ２使三羧酸循环（ＴＣＡＣ）的运行变慢,ＮａＣｌ胁迫下使其加快,ＴＣＡＣ运行限速步骤与ＭＤＨ无关,ＣＯ为盐对呼吸代谢影响的重要位点．另外,Ｋ＋、Ｎａ＋对蛋白表达的影响有差异,ＣＯ２可使盐胁迫下的碱蓬幼苗蛋白表达降低．     

不同盐浓度的混合盐对羊草苗的胁迫效应

用５０～３５０ｍｍｏｌ／Ｌ含有不同比例的ＮａＣｌ、Ｎａ２ＳＯ４、ＮａＨＣＯ３和Ｎａ２ＣＯ３等４种盐成分的３０种混合盐对羊草（Ａｎｅｕｒｏｌｅｐｉｄｉｕｍｃｈｉｎｅｎｓｅ（Ｔｒｉｎ．）Ｋｉｔａｇ．）苗进行盐碱混合胁迫处理。结果表明：相对生长率、Ｋ和Ｎａ含量、脯氨酸积累量及叶片电解质外渗率等胁变反应均随盐浓度增大以及碱性盐比例增高而加剧。而且碱性盐所造成的高ｐＨ的致胁变效应与盐浓度关系极大,浓度低时作用较小,随浓度增大其作用加剧。在含有碱性盐的混合盐胁迫中,包含有盐胁迫和碱胁迫两种作用。以总盐浓度代表盐胁强,缓冲量代表碱胁强。在碱胁强较弱时胁变主要受盐浓度影响,随碱胁强增大缓冲量变为影响胁变的主导因素     

小麦耐盐细胞系及后代耐盐稳定性的生化分析

以离体培养筛选出的耐盐小麦变异系及其后代为材料,对其耐盐稳定性进行有关生理生化特性分析。结果表明：（１）随着耐盐愈伤组织耐盐能力的提高,过氧化物同工酶酶带谱加,与对照相比,三个区域出现了明显差异;（２）从耐盐愈伤组织酯酶同工酶酶谱发现,耐盐愈伤组织具有Ｃ２,Ｃ５,Ｃ９,Ｃ１１新增加酶带;（３）耐盐系后代幼苗能维持较高的Ｋ＾＋／Ｎａ＾＋比值,在盐浓度为０．９％时,其Ｋ＾＋／Ｎａ＾＋为０．７８８,而对     

注射装载孕酮的红细胞膜泡诱发蟾蜍卵成熟的研究

中华大蟾蜍长足的卵母细胞,经注入装载水相孕酮的红细胞膜泡,能被诱发成熟;直接注入水相孕酮的卵母细胞,无能恢复成熟分裂。将蛋白酶处理的红细胞制备成装载水相孕酮的膜泡,注入卵内,照样能诱发其成熟分裂;然而,分别用根皮素结合或磷脂酶A_2水解红细胞膜磷脂,制备的膜泡,虽亦包裹着水相孕酮,但注射的卵母细胞都未能被诱发成熟。这些结果表明,在通过红细胞膜转运孕酮诱发卵母细胞成熟过程中,红细胞膜上的某些膜蛋白可能不是必要的成份,而膜磷脂类却是关键成份,它不仅可能保证孕酮不被迅速代谢,且保证孕酮从卵母细胞内部诱发成熟分裂。     

金鱼精子质膜和核膜的区域特异性

本文结合采用扫描和透射电子显微镜(包括冷冻断裂-蚀刻、超薄切片以及细胞化学染色法),研究了金鱼精子的超微结构特征,结果表明金鱼精子的质膜和核膜都具有区域特异性:1)精子质膜内大部分区域含有许多蛋白颗粒,但在特定区域内,蛋白颗粒呈有序排列,构成晶格状结构。2)精子头颈部和尾部均有液泡密集之处,凡是覆盖着液泡区的质膜内,几乎都不含有蛋白颗粒。3)液泡区能被细胞化学方法染成致密色,表明内含糖蛋白。4)核膜孔只集中存在于靠近颈部的核膜上,而其他部分则没有。本文对上述诸点进行了讨论。     

Chlorophyll isolation,structure and function: major landmarks of the early history of research in the Russian Empire and the Soviet Union

This paper covers major events of the early history of chlorophyll research in the Russian Empire and the Soviet Union from 1771 until 1952, when the modern period of studies on photosynthesis began in full swing. Short biographical sketches of key scientists, reviews of their major research contributions and some selected photographs are included. This revised version was published online in August 2006 with corrections to the Cover Date.     

多种神经活性物质在幼年猫和鸡视网膜神经细胞中的共存(简报)

视网膜起源于前脑泡,结构简单层次分明,因此常被视为脑的简化模型。但近期工作证明,视网膜包含的神经活性物质(神经递质、调质和神经肽)种类之多、分布之复杂并不亚于脑。尤其是无长突细胞不仅包含多种递质和肽类,而且还有递质与肽类或肽类与肽类在一个细胞中的共存。对视网膜神经递质、调质和神经肽的研究将是探索脑奥秘的有效途径。     

低分子量神经丝蛋白(NF-L)的体外组装

利用超速离心和离子交换层析技术,从牛脊髓中分离纯化了神经丝蛋白三组分:NF-L,NF-M和NF-H。应用电镜负染色和金属投影方法研究神经丝的形态结构与NF-L的体外组装,结果表明:神经丝由10nm的核心纤维与外周的丝状突起组成;在近似生理条件下,NF-L可在60min内组装成10nm纤维,纤维由4根亚丝缠绕而成;在碱性缓冲液中,NaCl能促进NF-L装配成短纤维,这种10nm的短纤维无法连接成长纤维。     

血管内皮生长因子蛋白在大鼠睾丸和附睾的表达和定位研究

为探讨血管内皮生长因子(VEGF)在雄性生殖系精子发生发育和成熟过程中的调控作用,应用免疫组化、Periodic acid-Schiff(PAS)染色及蛋白质免疫印迹技术,检测VEGF蛋白在成年大鼠睾丸和附睾的表达和定位情况。Western-blots显示,在大鼠睾丸和附睾内均有VEGF蛋白(约45kD)的表达;免疫组化显示,睾丸内VEGF见于圆形和长形精子细胞、Sertoli细胞和Leydig细胞,免疫阳性产物位于细胞质内。精子细胞的VEGF表达伴随精子细胞顶体发育的全过程,精子残余体呈强阳性。附睾内VEGF表达于附睾管上皮,且有区域和细胞特异性。附睾起始段的所有上皮主细胞内都有VEGF阳性颗粒;头、体、尾各段的VEGF阳性细胞多数与含PAS阳性颗粒的细胞重合,证明为亮细胞;近端附睾的管腔内可见精子头部呈VEGF阳性染色。睾丸、附睾间质血管内皮为VEGF阴性。上述结果表明,VEGF蛋白可由生殖细胞和附睾管上皮细胞直接产生,它可能以自分泌和/或旁分泌的形式共同作用于睾丸和附睾的生殖细胞和血管内皮,直接或间接影响精子的发生、发育和成熟过程,特别是精子顶体的形成过程,并可能与精子在附睾内的成熟有关。     

花背蟾蜍蝌蚪发生类坏死的皮肤在恢复过程中的超微结构

本实验以花背蟾蜍后肢芽期的蝌蚪为材料,用0.001 mol/L氨水(氨水组)和0.01mol/L醋酸(醋酸组)处理皮肤使之发生类坏死。以细胞核、细胞表面、细胞质及细胞间隙等的超微结构变化为指标,研究了各组皮肤发生类坏死后恢复过程中的可逆变化。结果观察到:两组均能引起核染色质浓缩,粘液分泌,液泡增多,线粒体及内质网膨大变形,细胞间隙变窄;醋酸还引起张力原纤维的凝集及紊乱等。恢复过程中,细胞核内染色质的分布趋于均匀,粘液的分泌渐正常,液泡减少,线粒体及内质网的形态逐步恢复,但细胞间隙一直很??窄;醋酸组中张力原纤维恢复成束且排列较整齐。作者认为氨水及醋酸引起蝌蚪皮肤发生类坏死后,在一定时间内是可以恢复的,而且此可逆变化也反映在超微结构的变化上。     

磁场对丘脑下部一氧化氮含量的影响及与丘脑下部神经内分泌核团的关系

应用硝酸还原酶反应—分光光度法测定和NADPH-d组织化学技术,对磁场处理后丘脑下部一氧化氮量的变化及其可能的原因进行了研究,发现磁场可促使丘脑下部一氧化氮量(OD值)显著升高,并具有显著滞后效应。NADPH-d阳性神经细胞及NADPH-d和血管加压素(AVP)双染阳性神经细胞集中分布在丘脑下部室旁核、室周核和视上核,但不存在 于视交叉上核,提示室旁核、室周核和视上核一氧化氮能神经细胞是丘脑下部的一氧化氮的主要来源。磁场处理后大鼠丘脑下部一氧化氮含量(OD值)较正常对照组显著升高应归因于这些神经细胞受磁场作用表达增强。一氧化氮和血管加压素的共存可能对磁场调节内分泌具有一定意义。     

荧光脂质体导入黄瓜悬浮细胞原生质体的研究

用“脱水再加水法”制成包裹荧光黄的脂质体,通过PEG诱导融合或保温共培养法,成功地将脂质体导入了黄瓜悬浮细胞原生质体。PEG处理组摄入脂质体的细胞可达80—90%,其中50—60%的细胞荧光较强,均匀一致。脂质体/原生质体保温共培养半小时,荧光细胞达95%以上,荧光较弱,在细胞中呈点状分布,3—4天后脂质体逐渐破裂,点状荧光变为均匀一致的荧光。导入荧光黄脂质体的原生质体经持续分裂形成愈伤组织和胚状体,进一步分化出芽和根。     

重组人pLXSN-CD80逆转录病毒载体的构建及在CHO和PA317细胞中的表达

CD80是表达于抗原提呈细胞表面的分化抗原,它提供T细胞活化的协同刺激信号,并在抗肿瘤免疫应答中起着重要作用。我们在克隆了CD80全长。cDNA的基础上,将其与逆转录病毒pLXSN表达载体连接,构建成表达质粒,并用磷酸钙沉淀法将其转染PA317和CHO细胞,经G_(418)筛选获得抗G_(418)的PA317和CHO细胞克隆。以RIA,FACs和Westernblot检测CD80分子在PA317和CHO细胞上的表达、分布和分子量,结果显示,pLXSN-CD80转染的CHO细胞可表达较高丰度的CD80分子,其表观分子量为40kD。pLXSN-CD80转染的PA317和CHO细胞经5个月连续传代培养,无论存在G_(418)的选择压力与否,仍然持续表达CD80分子,表明我们构建的pLXSN-CD80表达载体具有应用于试验性治疗的潜能。