美洲大蠊主要变应原蛋白的质谱鉴定与分析

为了建立美洲大蠊Periplaneta americana变应原蛋白的质谱鉴定方法,我们将美洲大蠊粗浸液通过DEAE-52离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析等分离步骤得到纯化的74 kD蛋白,对纯化前后的该74 kD蛋白分别进行SDS-PAGE及凝胶内胰酶酶切,再经液相色谱-电喷雾-串联质谱（HPLC-ESI-MS/MS）在线联机分析,所得质谱数据进入网站（http://www.matrixscience.com）进行Mascot检索比对。通过对两者质谱鉴定结果的比较来评估美洲大蠊天然主要变应原蛋白的纯化效果。结果表明,纯化蛋白经HPLC-ESI-MS/MS鉴定是美洲大蠊主要变应原蛋白;离子交换层析等纯化步骤可以去除同一分子量的杂蛋白(如卵黄原蛋白),从而获得较好的鉴定结果。我们首次成功地运用质谱建立起变应原蛋白的新鉴定方法。     

微囊藻毒素与自然水体中细菌VIVIFORM状态的相关性

细菌VIVIFORM状态是直接关系到自然水体水质评价和环境保护的生态现象 ,其形成机理相当复杂 ,但环境胁迫是主要诱因。通过人为改变湖水中的微囊藻毒素 (MC LR)水平 ,对水体中蓝藻毒素与细菌VIVIFORM状态之间的相关性进行了分析。结果表明 ,较高的毒素水平对水体中细菌种群总量没有明显的影响 ,但能刺激VIVIFORM细菌转化成可培养状态 ,从而证实了自然水体中蓝藻毒素与水细菌VIVIFORM状态之间存在直接的相关性。     

磁场对丘脑下部一氧化氮含量的影响及与丘脑下部神经内分泌核团的关系

应用硝酸还原酶反应—分光光度法测定和NADPH-d组织化学技术,对磁场处理后丘脑下部一氧化氮量的变化及其可能的原因进行了研究,发现磁场可促使丘脑下部一氧化氮量(OD值)显著升高,并具有显著滞后效应。NADPH-d阳性神经细胞及NADPH-d和血管加压素(AVP)双染阳性神经细胞集中分布在丘脑下部室旁核、室周核和视上核,但不存在 于视交叉上核,提示室旁核、室周核和视上核一氧化氮能神经细胞是丘脑下部的一氧化氮的主要来源。磁场处理后大鼠丘脑下部一氧化氮含量(OD值)较正常对照组显著升高应归因于这些神经细胞受磁场作用表达增强。一氧化氮和血管加压素的共存可能对磁场调节内分泌具有一定意义。     

Molecular mechanism of effect of rotating constant magnetic field on organisms

The effect of RCMF-magnetic therapy apparatus on signal substances was studied. The radioimmunoassay (RIA) suggested that the magnetic field increased β-endorphin markedly in plasma. ELISA indicated that the magnetic field inhibited vomiting reaction induced by chemotherapy drug, with reversible decrease of serotonin (5-HT) level in brains, small intestine tissue and serum. Furthermore, the bioeffect of magnetic fields on 5-HT level presented a typical window effect and post-effect, and the inhibitory effect of magnetic field on the emesis was parallel to the decrease level of 5-HT. This result implied that the decrease of 5-HT might be the basis of rotating constant magnetic field (RCMF) inhibiting drug-induced emesis. The nitric acid reductase-spectrophotometry and nicotinamide adenine dinucleotide-diaphorase/arginine-vasopressin (AVP) cytochemistry technique showed that the magnetic field induced nitric oxide (NO) increase in hypothalamus and the high NO(A) level lasted for 3 hours. The results suggested that NO(A) increases after the treatment of the magnetic field in hypothalamus, which may result from strong expression of NO-ergic neuron in paraventricular hypothalamic nucleus (PVN), periventricular hypothalamic nucleus (PEN) and supraoptic nucleus (SON). The coexistence of NO and AVP may play an important role in the regulation of endocrine and neuroendocrine by the magnetic field. And our data also confirmed that the magnetic field increased the content of NO so strongly that high NO level lasted for 3 hours, also made neuropeptide Y (NPY) cell in medulla stained heavily.     

滇池水华蓝藻中γ-亚麻酸的提取与含量分析

目的：在控制水华蓝藻的同时,有效利用滇池富营养化水体的水华蓝藻。方法：藻类资源。以从滇池中收集的水华蓝藻干粉为材料,对从水华蓝藻中γ-亚麻酸的含量进行了分析,对提取γ-亚麻酸的几个基本参数进行了研究。结果：直接用萃取溶剂浸泡藻粉,并用超声波破碎细胞,可以简化操作且增加γ-亚麻酸得率;石油醚是比较合适的萃取溶剂;进行皂化反应时所用皂化液为(KOH-CH3CH2OH-H2O)。最适反应温度为50～60℃,γ-亚麻酸酯在氮气保护下进行酸化可以防止游离出来的γ-亚麻酸被氧化。滇池水华蓝藻中γ-亚麻酸的含量达到0．8957％。     

参环毛蚓神经组织的NSE、NF200、ED1、GFAP和NO细胞化学特性

为研究环节动物的神经组织学特性,我们选择生活在我国的环节动物门典型代表参环毛蚓（Pheretima aspergillum)为研究对象,使用若干种兔抗鼠抗体,进行了免疫细胞化学与细胞化学染色,在光学显微镜下观察反应阳性细胞的形态与分布。研究发现,在参环毛蚓脑,咽下神经节,腹神经节所有神经细胞呈NSE阴性;在参环毛蚓脑,部分神经细胞呈NF200阳性,在咽下神经节,腹神经节未观察到NF200阳性神经细胞;在参环毛蚓脑观察到较多ED1阳性细胞;在参环毛蚓脑,咽下神经节,腹神经节均未观察到GFAP阳性细胞;在参环毛蚓脑未观察到NADPH－d阳性神经细胞,而在咽下神经节和腹神经节部分神经细胞及纤维NADPH－d阳性。结果表明,参环毛蚓神经细胞的神经细胞特异的烯醇化酶特性,神经微丝蛋白特性与呈型胶质细胞的GFAP特性不同于哺乳动物;其神经组织存在有数量较多的吞噬功能的类似于哺乳动物小胶质细胞的细胞; 参环毛蚓的脑不含有NO能神经细胞,而咽下神经节和腹神经节含有NO能神经细胞。     

十三种神经递质和神经肽在参环毛蚓神经系统的分布:免疫细胞化学研究

选择生活在我国的环节动物门典型代表参环毛蚓（Pheretima aspergillum)的研究对象,使用13种抗体,运用免疫细胞化学染色技术,在光学显微镜下观察神经递质和神经肽阳性细胞的形态与分布。研究发现在参环毛蚓脑,ACTH阳性神经细胞、AVP阳性神经细胞、calcitonin阳性神经细胞、CCK阳性神经细胞、glutamate阳性神经细胞和NPY阳性神经细胞染色浓重,分布密集,位于脑的后侧半,尤其特别的是在calcitonin阳性大神经细胞内含有粗大密集的分泌颗粒。β－EP阳性神经细胞染色较谈,OT阳性神经细胞染色也较深,但分布稀疏, calbindi-D、CGRP、GABA、SOM、VIP呈阴性反应;在咽下神经节与腹神经节,仅有少量AVP阳性神经细胞、glutamate阳性神经细胞和NPY阳性神经细胞散在分布;在肠神经系统,β－EP阳性神经细胞、CGRP阳性神经细胞、SOM阳性神经细胞、VIP阳性神经细胞染色较深,分布散在;另外,在肠上皮,CGRP阳性上皮细胞、calcitonin上皮细胞和VIP阳性上皮细胞呈强阳性反应,分布于阴性上皮细胞之间。表明表明参环毛蚓神经系统存在着在其它环节动物所观察到的神经递质和神经肽：ACTH、VIP、β-endorphin、CCK、NPY、CGRP,亦存在着文献从未报道过的神经递质和神经肽：calcitonin、AVP、OT、glutamate、SOM,其中calcitonin、CGRP、VIP双重分布于神经细胞和非神经组织的肠上皮细胞,本文首次提供了形态学的证据。     

Molecular mechanism of effect of rotating constant magnetic field on organisms

The effect of RCMF-magnetic therapy apparatus on signal substances was studied. The radioimmunoassay (RIA) suggested that the magnetic field increased p-endorphin markedly in plasma. ELISA indicated that the magnetic field inhibited vomiting reaction induced by chemotherapy drug, with reversible decrease of serotonin (5-HT) level in brains, small intestine tissue and serum. Furthermore, the bioeffect of magnetic fields on 5-HT level presented a typical window effect and post-effect, and the inhibitory effect of magnetic field on the emesis was parallel to the decrease level of 5-HT. This result implied that the decrease of 5-HT might be the basis of rotating constant magnetic field (RCMF) inhibiting drug-induced emesis. The nitric acid reductase-spec-trophotometry and nicotinamide adenine dinucleotide-diaphorase/arginine-vasopressin (AVP) cytochemistry technique showed that the magnetic field induced nitric oxide (NO) increase in hypo-thalamus and the high NO(A) level lasted for 3 hours. The results sugg     

从分子水平探索旋转恒定磁场对机体作用之机理

用RCMF旋磁治疗装置研究磁场对信息物质的影响,放射免疫测定发现磁场促使血浆内啡肽显著升高;荧光分光光度法和ELISA法测定发现磁场可以显著抑制5-HT及顺铂等中枢性致呕药物引起的呕吐反应,并同步伴有脑组织、小肠组织5-HT水平的可逆性下降.磁场处理对小鼠5-HT水平的影响表现出明显的窗口效应和滞后效应,磁场对药物致呕的抑制效应与其对5-HT的下调水平有平行相关关系.提示磁场对体内5-HT水平的降低,可能是其抑制细胞毒性化疗药物致呕的内在基础.应用硝酸还原酶反应-分光光度法和NADPH-d组织化学技术,发现磁场可促使丘脑下部一氧化氮(NO)含量显著升高,并具有显著滞后效应. NADPH-d阳性神经细胞及NADPH-d和血管加压素(AVP)双染阳性神经细胞集中分布在丘脑下部室旁核、室周核和视上核,但不存在于视交叉上核,提示室旁核、室周核和视上核一氧化氮肽能神经细胞是丘脑下部的一氧化氮的主要来源.磁场处理后大鼠丘脑下部一氧化氮含量较正常对照组显著升高应归因于这些神经细胞受磁场作用表达增强.一氧化氮和血管加压素的共存可能对磁场调节内分泌具有一定意义.发现磁场可促使肾上腺一氧化氮量显著升高,并维持一定时间,神经肽Y免疫细胞化学染色强度增强,进而对其相关机制和意义进行了讨论.