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1.
学习过程中MF-CA3与PP-CA3突触传递效应的变化 总被引:2,自引:0,他引:2
应用慢性电极埋植技术以电生理学结合行为学的方法,探查在学习过程中大鼠海马CA3区两种不同输入突触(MF-CA3突触和PP-CA3突触)的可塑性变化及其相互关系。结果如下:(1)在分辨反应的建立过程中,在CA3区由MF诱发(MF-CA3)的群体锋电位(populationspike,PS)和由PP诱发(PP-CA3)的群体锋电位,两者的峰值同步增大,同步达最高水平,且PS峰值达最高水平先于行为反应达学会标准;(2)在自然消退过程中,两者的PS峰值也是同步恢复至训练前水平的。结果表明,在CA3区这两种输入突触的习得性LTP的产生和消退都是同步的,提示了它们之间可能具有协同作用。 相似文献
2.
粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素—3融合蛋白的表达研究 总被引:1,自引:1,他引:0
利用PCR扩增得到粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)完整基因片段,将其分别克隆pGEM-T构建成GM-CSF/IL-3融合蛋白基因,DNA序列与设计预期一致。将得到的融合蛋白基因克隆对72RNA聚合酶表达载体pT7zz,得到表达质粒pFu,经转化至表达宿主E.coli BL21(DE3),在IPTG诱导下获得融合蛋白目的产物的直接表达。经SDS-PAGE电泳鉴 相似文献
3.
利用人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF()cDNA3'端非翻译区(3'UTR)中存在的DraI酶切位点,通过部分酶切与完全酶切,删除3'-UTR不同长度构建了四种hG-CSF cDNA瞬时重组表达质粒,转染COS-7细胞手,生物活性测定结果提示,hG-CSFcDNA3'-UTR对其表达起负调控作用,其关键性序列位于紧接终止密码子TGA下游的65bp范围内,3'-UTR对hG-CSF cDNA表达的 相似文献
4.
缺氧诱导因子1和红细胞生成素3‘—增强子调节内皮细胞?… 总被引:22,自引:0,他引:22
目的和方法:将红细胞生成素(EPO)3'-增强子野生片断及点突变片断借脂质体主人脐静脉内皮细胞株ECV-304,用半定量RT-PCR测定正常秘缺氧诱导因子-1(HIF-1)诱导剂氧化钴(CoCl2)作用下培养6h的细胞环氧合酶2(COX-2)和血栓素合酶(TXS)的mRNA。结果:HIF-1诱导剂CoCl2可放COX-2和TXS基因转明显增强2,向细胞导入野生EPO3'增强子片断可阻断CoCl2诱 相似文献
5.
从细胞水平和基因水平研究了新型生长抑肽(EPP)的生物学作用,研究表明:EPP对NC3H10及TC3H10细胞的DNA合成均有抑制作用,当EPP与cAMP的位点选择性类似物8-Br-cAMP共同作用时,其对NC3H10细胞的DNA合成的抑制作用消失,而对TC3H10仍具有抑制作用;核酸杂交分析表明,EPP可以抑制c-fos、neu、ki-ras三类癌基因在转化细胞中的表达。证明了EPP对转化细胞的生长具有一定的抑制效应,且与8-Br-cAMP联合使用时其效果更佳。 相似文献
6.
P物质(SP)能神经元及其轴突末梢和受体广泛分布于很多心血管中枢。外侧下丘脑含SP能神经元,外侧下丘脑投射的升压区内又存在SP能纤维及SP受体;因此本工作检验SP在外侧下丘脑升压反应中的作用。实验显示:(1)L-谷氨酸(Glu)兴奋外侧下丘脑的穹窿周围区(LH/PF)或将SP分别注入各LH投射区:蓝斑(LC)、臂旁核(NPB)或中脑导水管周围灰质(PAG)均引起升压反应;(2)[D-Pro2,D-Phe7,D-Trp9]-SP(SP拮抗剂)预先注入LC或PAG可使Glu兴奋LH/PF引起的升压反应减小,而注入NPB对该反应无明显影响;(3)双侧延髓头端腹外侧区(RVL)分别用酚妥拉明、心得安或阿托品预处理也可明显削弱该反应。结合我们以往的实验结果:RVL内的α-、β-、M-受体介导LC升压反应,α-和β-受体介导PAG-升压反应;本工作显示LH/PF可通过其SP能投射纤维作用于LC-RVL和PAG-RVL升压系统而实现其升压反应。 相似文献
7.
低氧对肺动脉内皮细胞PDGF—B链释放及平滑肌细胞生长的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
应用蛋白dotblot技术检测了低氧内皮细胞条件培养液(HECCM)和常氧内皮细胞条件培养液(NECCM)内PDGF相对含量,并利用[3H]-TdR掺入法和流式细胞术观察了HECCM和NECCM及加入特异PDGF抗体对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)生长的影响。结果表明,HECCM中的PDGF含量明显高于NECCM;HECCM能明显增强PASMC内DNA合成,促进PASMC从Go/G1期进入S期;当预先加入PDGF-B链抗体时,则会明显地抑制HECCM对PASMC的DNA合成,阻止PASMC从Go/G1期进入S期。结果提示,低氧时PASMC增殖与肺动脉内皮细胞分泌释放PDGF增加有关 相似文献
8.
利用人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF)cDNA3′端非翻译区(3′-UTR)中存在的DraⅠ酶切位点,通过部分酶切与完全酶切,删除3′-UTR不同长度,构建了四种hG-CSFcDNA瞬时重组表达质粒。转染COS-7细胞后,生物活性测定结果提示,hG-CSFcDNA3′-UTR对其表达起负调控作用,其关键性序列位于紧接终止密码子TGA下游的65bp范围内,3′-UTR对hG-CSFcDNA表达的影响与转录水平的差别有一定关系。 相似文献
9.
本工作采用分离培养家兔肺内小动脉平滑肌细胞(PASMCs),观察了外源性血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF)、BN52021(PAF受体拮抗剂)、吲哚美辛、维拉帕米对PASMCs产生血栓素A_2(TxA_2)、前列环素(PGI_2)及对细胞膜Ca~(2+)-ATPase活力的影响。结果表明:(1)基础状态下PASMCs存在花生四烯酸(AA)代谢。(2)外源性PAF通过受体后途径激活环加氧酶促进AA代谢致TXA_2及PGI-2增加,TXA_2/PGI_2比值无明显变化。(3)外源性PAF能直接抑制Ca~(2+)-ATPase活力。(4)维拉帕米可逆转PAF抑制PASMCs膜Ca~(2+)-ATPase活力的效应。 相似文献
10.
人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)是一种重要的造血生长因子.利用基因重组技术构建两个hGM-CSF的E.coli表达菌株,一个为在不改变氨基酸顺序的前提下,对mRNA翻译起始区核苷酸顺序进行优化突变(hGM-CSF(M)),另一个为未突变的对照(hGM-CSF(N)).经酶切电泳、DNA测序、SDS-PAGE和Westernblot等分析鉴定,证明两者均能表达特异性的14.6kDhGM-CSF,但hGM-CSF(M)的表达水平较hGM-CSF(N)提高了1.26倍,占菌体总蛋白的16.9%.mRNA翻译起始区二级结构预测分析表明,优化突变后生成自由能ΔG从原来的-10.2提高至-9.4Kcal,AUG从部分配对状态变为非配对状态. 相似文献
11.
NA和5-HT对小脑脑片浦肯野细胞自发及诱发电活动的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
在大鼠小脑脑片上观察了NA和5-HT对浦肯野细胞(PC)的自发放电活动及由白质刺激所引起的诱发放电活动的影响。结果表明:(1)NA使PC产生抑制、兴奋和双相反应,以抑制反应为主(79.8%);5-HT引起PC兴奋和抑制反应,以兴奋反应略多(57.8%)。(2)先后灌流NA和5-HT对同一个PC自发放电的影响主要为抑制(NA)-兴奋(5-HT)(53.8%)。(3)NA对PC的诱发复杂锋电位(CS)和简单锋电位(SS)反应,主要产生增强效应(57.1%和62.8%);5-HT对PC诱发CS和SS反应则主要产生压抑作用(60.0%和68.2%)。(4)先后灌流NA和5-HT对同一个PC的诱发CS和SS反应,主要表现为NA对这两种诱发反应的增强和5-HT的压抑效应(60.0%和52.9%)。这些结果提示,NA能和5-HT能传入纤维可以通过释放NA和5-HT调节PC的兴奋性水平并改变PC对爬行纤维和苦状纤维突触传入的反应敏感性,影响小脑皮层神经元网络的感觉运动整合过程。 相似文献
12.
为寻找新型有效的AⅡ拮抗剂,本实验应用细胞计数、 ̄3H-TdR掺入、逆转录─聚合酶链反应及放射免疫实验方法,研究了中药单体764-3对卒中易感型自发性高血压大鼠(SHRsp)及其对照(WKY大鼠)主动脉平滑肌细胞(AsMC)增殖的影响及其作用机制。结果表明:764-3可显著抑制ASMC增殖,并有剂量依赖性。20mg/L的764-3可极显著地抑制ASMC上AⅡ受体(AT_1)的mKNA表达(SHRsp下降76.3%,WKY大鼠下降61.6%),并可降低SHRspASMC内AⅡ含量(下降20%)。推测764-3对ASMC增殖的抑制作用可能部分地是由于降低了AT_1受体的基固表达引起。比较其对两种大鼠ASMC的抑制效率,发现它对SHRsp的ASMC的作用更强。 相似文献
13.
中枢应用β-内啡肽对大鼠血浆唾液酸水平的影响以及与免疫功能的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
实验选择体重200-250g健康Wistar大鼠64只,采用麻醉大鼠中枢微量注射,分光光测定法及免疫组织化学法,研究侧脑室,弓状核(ARC)区注射β-内啡肽(β-EP)对大鼠血浆唾液酸(SA)水平的影响及与免疫功能的关系,结果表明:(1)侧脑室注射β-EP可明显降低血浆SA水平;(2)血浆SA水平在ARC区注射β-EP后明显降低,此效应可被M胆碱受体阻断剂阿托品或切断双侧颈迷走神经所阻断;(3)A 相似文献
14.
缺氧时肺动脉内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞增殖的相互影响 总被引:9,自引:1,他引:8
血管内皮细胞和血管平滑细胞在结构和功能上关系密切,两者的相互在与血管舒缩笔血和壁结构。本文观察了培养的小牛肺动脉内皮细胞(PAECs)和肺动平滑肌细胞(PASMCS)缺氧时在细胞增殖方面的相互影响。PASMCS常氧条件培养基(CM)可使PAECS的^3H-TdR掺入降低约58%,缺氧CM对PAECS的^3H-TdR掺入无明显的抑制作用;PAECS的常氧CM使PASMS的^3H-TdR掺入升高约60 相似文献
15.
人肝癌细胞的IGF—BP1分子特性及内源性蛋白酶对其降解的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用SDS-PAGE电泳、高效液相色谱(HPLC)、质谱等方法,研究了人肝癌细胞(HepG2)分泌的胰岛素样生长因子结合蛋白-1(^35S-IGF-BP1)的分子结构、特性,及其被内源性蛋白酶降解的特点,^35S-IGF-BP1的经抗体免疫沉淀、生化分离,纯化为均一体,其分子是由多个亚构成的蛋白质,分子量约为27kD;细胞UMR、HepG2、H35BRL3A分泌的蛋白酶能将^35S-IGF-BP1催 相似文献
16.
利用番茄(Lycopersicum esculentum Mill.)县浮培养细胞为材料,以^32P标记的寡核苷酸(40bp)为探针检测了细胞外钙调素对番茄细胞rbcS-3A及rbcS-3C基因表达的影响。当向暗中培养的番茄悬浮细胞(第7天)中加入外源纯化钙调素(10^-7mol/L)并处理24h后,rbcB-3A基因的表达明显增加,而相同深度的S-100蛋白和BSA则没有作用。加入外源钙调素(1 相似文献
17.
优化mRNA翻译起始区提高人粒—巨噬细胞集落刺激因子在E.coli… 总被引:2,自引:0,他引:2
人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)是一种重要的造血生长因子。利用基因重组技术构建两个hGM-CSF的E.coli表达菌株,一个为在不改变氨基酸顺序的前提下,对mRNA翻译起始区核苷酸顺序进行优化突变(hGM-CSF(M)),另一个为未突变的对照(hGM-CSF(N))。经酶切电泳、DNA测序、SDS-PAGE和Western blot等未突变的对照(hGM-CSF(N))。经酶切电泳、D 相似文献
18.
重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人单核细胞趋化激活因子(MCAF)融合蛋白经SephadexG-75和CM-SepharoseFF两步柱层析,获得了电泳纯的GM-CSF/MCAF融合蛋白。为进一步研究其结构与功能,我们以纯化的该融合蛋白为抗原免疫家兔制备抗血清。DotELISA和Westernblot试验表明,该抗血清效价高、特异性好,可分别与GM-CSF/MCAF、GM-CSF和MCAF发生反应。 相似文献
19.
重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人单核细胞趋化激活因子(MCAF)融合蛋白经SephadexG-75和CM-SepharoseFF两步柱层析,获得了电泳纯的GM-CSF/MCAF融合蛋白。为进一步研究其结构与功能,我们以纯化的该融合蛋白为抗原免疫家兔制备抗血清。DotELISA和Westernblot试验表明,该抗血清效价高、特异性好,可分别与GM-CSF/MCAF、GM-CSF和MCAF发生反应。 相似文献
20.
利用PEG分级,DEAE离子交换层析,Bhue Sepharose拟亲和层析,MonoQ离子交换层析等手段,分离纯化直二氏藻甘油三磷酸(G-3-P)脱氢酶(EC1.1.1.8)得到比活为12.6u/mg的电泳纯的酶,并对此酶的生化特性进行了研究。4-20%非变性聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得全酶分子量约为270kD,SDS-PAGE表明该酶只有一种分子量约为65kD的亚基,据此推测该酶应为同四聚体。酶 相似文献