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酶具有明显的专一活力。有的已被提純或結晶,有的一級結构已經闡明,因而在免疫化学中利用酶作为抗原,不仅有利于对抗原,抗体間作用机制深入了解,同时也为酶活性与抗原免疫活性間的关系以及酶,抗酶,底物三元体系相互作用的研究提供了新的課題。 相似文献
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用不同的化学试剂修饰了柞蚕抗菌肽D分子中的色氨酸、精氨酸和赖氨酸等氨基酸残基。NBS修饰抗菌肽D,以及氨肽酶M对抗菌肽D作用的结果表明色氨酸残基对抗菌肽D抑制E.coli D31的作用影响不大。CHD和MLH对精氨酸和赖氨酸残基的修饰,导致抗菌肽D失去抑制E.coli的作用,但可逆地消除CHD和MLH的修饰作用后,抗菌肽D恢复了对E.coli D31的抑菌作用。这些结果初步认为,抗菌肽D抑菌作用与分子中的荷电性有关,改变了分子的电荷,也就同时失去了其抑菌功能。 此外,对精氨酸残基修饰的结果还表明,抗菌肽D的免疫原性与精氨酸残基有关。但是,抗菌肽D的免疫决定簇与其生物活性中心并不完全平行。 相似文献
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用差异显示技术寻找家蚕诱导前后特异表达的基因 总被引:8,自引:0,他引:8
分别抽取诱导和未诱导家蚕(Bombyx mori)蛹脂肪体总RNA进行DDRT-PCR反应。产物于非变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳展开,得到的差异条带扩增后大多可以在2%琼脂糖凝胶上得到一条以上的带。Northern blot证明为阳性的一条带克隆后得到6个阳性转化子,SSCP证明它们含有相同的插入片段。对其中之一进行测序,结果显示片段长241bp,没有发现同源性较高的基因。对此基因的进一步研究有望揭示它在昆虫免疫反应中可能扮演的角色。 相似文献
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抗菌肽Diptericin cDNA的克隆及在E.coli中的融合表达 总被引:11,自引:0,他引:11
从果蝇成虫中抽提总 RNA,RT- PCR扩增编码伏蝇素 diptericin的 c DNA,克隆并测定了全序列 .将该 c DNA亚克隆到融合表达载体 p MAL- CR1上 ,转化大肠杆菌 BL2 1菌株 ,进行了高效的可溶性融合表达 .通过离子交换层析纯化融合蛋白 ,经 Xa因子酶切后得到的重组 diptericin具有抗菌活性 . 相似文献
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重组GM—CSF/IL—3融合蛋白的纯化 总被引:4,自引:0,他引:4
重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素3(GM-CSF/IL-3)融合蛋白是一种很有发展潜力与应用前景的重组药物,它在大肠杆菌中是以饱含体形式表达的,针对这一重组蛋白饱含体的洗涤、变性、复性以及最终的纯化过程,进行了深入地研究,重点分析和比较了不同条件及因素对于重组蛋白包含体变性及复性过程听影响。实验结果表明,8mol/L尿素及10mmol/L的DTT可以使包含体充分溶解。在复性过程中,采用 相似文献
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昆虫免疫应答及抗菌肽应用前景 总被引:16,自引:0,他引:16
<正> 前言 昆虫在动物界中所占的数量最多,分布最广,并且有高度的适应能力和防御机能。在生物进化中它们之所以能适应各种环境而得以生存和发展,是有其独特的内在因素。 昆虫免疫防御系统的研究可以追溯到亚里斯多德(Aristotle)时代,但这方面研究却十分迟缓。从本世纪卄年代开始到六十年代末,人们才重视对昆虫免疫防御的研究,卄年代初的Paillot和Metalnikor,五十年代后的Steinhaus,Brrigs,Stephens,Gingrich,Kawara-bata等均作过有益的评述,但均未能阐明昆虫防御机制的本质。从1962年Ritossa首先观 相似文献
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柞蚕蛹血淋巴中凝集素的分离鉴定 总被引:2,自引:1,他引:1
在柞蚕蛹血淋巴中可以测得血凝活力,但在大肠杆菌诱导后血淋巴中血凝滴度有很大的升高.本文报道了分离正常柞蚕蛹血淋巴中凝集素的提取步骤.所得的凝集素在SDS垂直板电泳中表现单一条带,免疫扩散呈现单一的沉淀带,分子量为40,000道尔顿.制剂能凝集兔、鸭、豚鼠、羊、马及人的A、B、O和AB型的红细胞.其凝集活力可被半乳糖,乳糖,及N-乙酰半乳糖胺所抑制. 诱导后的柞蚕蛹血淋巴的凝集素成分比较复杂,经亲和层析后的制剂在免疫琼脂双扩散盘中呈现二条沉淀带,在垂直电泳中至少有二条带. 相似文献
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柞蚕杀菌肽B.D对脂质体的作用 总被引:6,自引:0,他引:6
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抗菌肽的固相合成、分离纯化与构效关系的研究 总被引:8,自引:1,他引:7
应用手工固相DCC/HOBt法合成Cecropin B、shival、ABP 3、WHD4种抗菌肽。各抗菌肢的C端均为酰胺化。最终用}珏,LC分离纯化。这4种肽对大肠杆菌K12D31野生型大肠杆菌、产气杆菌及4种植物病原菌青枯菌、临床致病型大肠杆菌、伤寒杆菌、硝酸盐杆菌均有明显的杀伤或抑制作用.对白血病细胞K 560、肺癌细胞A 549也有杀伤作用。其中尤以wHD杀伤作用最为明显,并用对其它3种肽不能作用的枯草杆菌、绿脓杆菌也略有抑制。而shiva l对细菌的作用较其它3种肽弱,另外还用cD谱对4种抗菌肽的溶液构象做了初步研究。 相似文献