艾滋病病毒蛋白酶高效表达载体及体外活性检测系统的构建

艾滋病是本世纪８０年代初发现的一种烈性传染病,５年病死率为１００％,致病因子为人免疫缺陷病毒,该病毒的蛋白酶在病毒复制在成熟中具有决定性的意义。由于目前国内外尚未获得艾滋病病毒蛋白酶的高效表达的重组子及活性检测系统,限制了它的研究与应用。本文利用ＰＣＲ技术修饰了艾滋病病毒蛋白酶的基因,使其具有便于克隆及表达用的限制酶切位点及转录终止码,并在其Ｃ末端设置了一个可用于检验该酶活性的特殊序列。ＤＮＡ序列     

中国汉族人群间—α—胰蛋白酶抑制因子（ⅠTⅠ）的遗传多态性

我们建立了测定间－α－胰蛋白酶抑制因子遗传表型的聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦免疫固定技术,应用这种方法对居住在成都地区的汉族群体进行了群体研究和家系调查,结果表明中国汉族人群间－－胰蛋白酶抑制因子具有遗传多态性,它有希望成为法医血液遗传化学新的遗传标记。     

用聚焦层析法纯化人巯基蛋白酶抑制肽C-hCRI_c

以肾衰病人尿为材料,通过碱变性、酸变性和热变性除去部分杂质和尿蛋白。然后用羧甲基-木瓜蛋白酶-琼脂糖4B亲和层析,最后用多缓冲剂聚焦层析,把人的巯基蛋白酶抑制肽C(human cysteine proteinase inhibitor C,简称 hCPI_C)和其他的hCPI_C分开,制备得高纯度、高活性的hCPI_C。在SDS-PAGE中为均一条带,每mg蛋白可抑制50单位木瓜蛋白酶活性的50-63％。     

大肠杆菌K-12dnaA突变型的R6K整合抑制菌株的多起点染色体复制

大肠杆菌K-12的温度敏感复制发动缺陷突变(dnaA46)菌株LC381不能在42℃中进行染色体复制。在42℃中选取R6K质粒整合抑制菌株,用标记频率测定法测得这一菌株在30℃中染色体复制从正常的复制起点起始,在42℃中则从另外三个起点起始,其中两个曾见报道,把重组突变recA56引入这一菌株,发现由接近正常复制起点起始的染色体复制不受recA突变的影响,由接近正常复制终点起始的染色体复制则受到阻碍,说明由这一位置起始的染色体复制依赖于recA基因。这一实验结果和我们的其他报道相符。