地衣芽孢杆菌2709碱性蛋白酶基因的克隆与序列分析

以地衣芽孢杆菌２７０９染色体ＤＮＡ为模板,应用聚合酶链反应方法扩增了碱性蛋白酶基因,ＰＣＲ反应产物在１％琼脂糖凝胶上表现为１条１．１ｋｂ的条带。该片段经电泳纯化后被克隆于大肠杆菌质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ上,获得ａｐｒＬ＾＋克隆株。ＤＮＡ序列分析表明,它与枯草杆菌蛋白酶Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ具有很高的同源性,同样由编码信号肽、前导肽及成熟蛋白的３个部分构成。     

枯草杆菌碱性蛋白酶蛋白质工程进展

枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin,EC 3·4·21·14)一般是指枯草杆菌及其它芽孢杆菌产生的胞外碱性蛋白酶Subtilisin具有巨大的商业价值,被广泛应用于蚕丝工业、制革工业及洗涤剂工业。     

生物学家如何面对艾滋病的传播

公共卫生组织于1986年6月预测表明,到1991年,全球后天免疫缺损综合症(即艾滋病)的患者将达25万人.据1986年Coolfont报告,美国现已感染艾滋病毒(HIV)的人有一至二百万之多.美国政府对此却反应迟缓.一年后,里根总统才公开承认了艾滋病的传播,但他仅强调进行血液检测.用以发现能与艾滋病毒抗原发生反应的抗体.却没有提出一项综合性的防治计划.此后,他指定成立了一个委员会,以     

枯草杆菌碱性蛋白酶E的纯化和性质

目前国内外研究较多的是地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)碱性蛋白酶Carlsberg和解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)碱性蛋白酶BPN’的纯化。鉴于蛋白酶E和蛋白酶BPN’在结构上有15％的非同源性,故我们用修饰纯化蛋白酶BPN’的方法来纯化蛋白酶E(subtilisin E)。     

用考玛斯亮兰G—250迅速,灵敏地测定蛋白质浓度

蛋白质浓度测定法是生物化学实验室最常用的方法,目前用得比较多的有双缩脲法、Folin酚法。对混有核酸的蛋白质则用260nm和280nm的紫外光吸收测定法。如果利用肽键在远紫外区(205 nm附近)的光吸收,受氨基酸组成分的影响较小,则可更精确地测定蛋白质浓度。比较这些方法的优劣时我们发现:双缩脲法灵敏度低;Folin酚法需要较多的试剂,过程比较复杂,不准确;280nm和260nm的光吸收测定法精度不高,对不含核酸的蛋白质的测定有局限性;远紫外光吸收测定精度高,但芳香族和蛋白质二级结构如α-螺旋、β     

提高α—淀粉酶摇瓶发酵单位的几点改进

我们在对BF7658α—淀粉酶菌种进行诱变筛选时发现:摇瓶发酵时通气状况的好坏对酶的发酵单位影响很大。而常规的三角形摇瓶和摇床给筛选工作带来许多限制,不利于取得稳定的发酵数据。经过多次摸索,我们对上述设备作了一些改进,不仅保证了发酵结果的稳定性而且发现能大大地提高α—淀粉酶的发酵单位。