大肠癌组织中联合检测USP22和BMI-1表达的临床意义

目的:探讨大肠癌组织中联合检测USP22和BMI-1表达的临床意义。方法:应用定量RT-PCR检测82例大肠癌手术切除标本及相应的癌旁组织中USP22及BMI-1 mRNA的表达水平,并分析其表达的差异,研究其表达水平与大肠癌患者临床病理特征及预后的关系。结果:USP22、BMI-1 mRNA在大肠癌及癌旁组织中均可被检出,大肠癌组织中USP22、BMI-1 mRNA的相对表达水平均显著高于癌旁组织(P0.01),且二者之间呈显著正相关(r=0.708,P0.01)。USP22、BMI-1 mRNA的高表达均与大肠癌的美国癌症分期联合委员会(AJCC)分期密切相关(P0.01)。COX回归分析显示USP22及BMI-1的共表达可作为大肠癌患者预后的独立预测因素(P0.01)。结论:USP22和BMI-1的共同激活可促进大肠癌的进展,并预示预后不良。     

胆管癌患者与健康志愿者血清样品蛋白质表达差异分析

胆管癌（cholangiocarcinoma,CCA）是一种难于早期诊断和治疗的恶性肿瘤.利用蛋白质组学技术以期筛选出人血清中具有医学价值的胆管癌癌变的标志物.利用白蛋白/IgG去除试剂盒去除血清中高丰度的白蛋白和IgG,再经丙酮沉淀得到高质量的血清样品.样品经双向电泳（2-DE）得到了分辨率较好的胆管癌血清的蛋白点图谱.利用Image Master 2D软件对比分析了胆管癌病人和正常健康对照组的2-DE图谱.其中,表达上调蛋白有8个,表达下调蛋白有6个.用质谱获得上述差异蛋白的肽质量指纹图谱,并经数据库检索共鉴定出了11种差 异蛋白质,其中8种蛋白质的表达与胆管癌密切相关.本研究为阐明胆管癌的机理提供了一条新途径.     

苜蓿遗传多样性的取样数目——RAPD和SSR群体标记法

紫花苜蓿为异花授粉植物,其DNA多态性研究的取样策略与遗传多样性分析直接相关.选取了4个苜蓿品种陇东(地方品种)、中兰1号(育成品种)、牧歌(Graze)和金皇后(Queen)(引进品种),设置了取样数目分别为10、20、40和60个单株进行DNA混合,利用RAPD(random amplification polymorphic DNA,随机扩增长度多态性DNA)和SSR(simple sequence repeat,简单重复序列)标记分别进行了遗传多样性分析,结果发现40和60个单株DNA混合样的聚类结果一致,表明10和20个单株组成的群体太小,随着苜蓿群体取样数目的增加,遗传多样性分析的准确性也随之增加,但是分析成本也相应提高.鉴于此,利用RAPD和SSR标记分析苜蓿遗传多样性时采用40个单株的DNA混合样是较适宜的群体大小.     

云南泡梨中乳酸菌的分离鉴定及其应用

【背景】泡梨是云南省常见的一种腌渍水果,在云南加工食用已经有一百多年的历史,因其味道酸甜可口、风味独特而深受人们喜爱,而目前对泡梨中微生物种群的系统分析和发酵原理的研究尚未见报道。【目的】研究乳酸菌在云南泡梨中的分布及应用,阐明乳酸菌种类对泡梨发酵中风味物质的影响。【方法】从云南省4个不同地区采集12份泡梨样品,经菌落菌体形态、生理生化特性和16SrRNA基因序列分析进行菌种分离与鉴定。利用分离的乳酸菌为菌种进行泡梨的制备,采用GC-MS技术对人工接种的复合乳酸菌发酵与自然发酵泡梨进行风味物质的分析与感官评价。【结果】分离鉴定出79株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、 3株类植物乳杆菌(Lactobacillus paraplantarum)、1株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)、1株干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、2株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)和1株短乳杆菌(Lactobacillus brevis),植物乳杆菌为泡梨发酵中的优势菌。将分离所得乳酸菌用于泡梨制备的结果表明,乳酸菌使泡梨的发酵时间缩短5d且品质更优,分析其中的风味物质发现接种乳酸菌发酵泡梨风味物质更丰富,其中酯类和醇类远多于自然发酵泡梨。【结论】云南泡梨中含有丰富的乳酸菌,选用分离出的优势乳酸菌作为复合乳酸菌用于泡梨发酵获得色泽、口感更好的泡梨,且发酵周期更短,风味物质更丰富。该研究对泡梨制备工艺和进一步标准化生产均具有重要意义。     

不同病理类型的原发性甲状旁腺功能亢进临床特征及生化指标的相关性分析

摘要 目的：分析不同病理类型的良性原发性甲状旁腺功能亢进（primary hyperparathyroidism,PHPT）患者临床特征和术前术后生化指标变化的不同,探讨其相关性,为该病的诊断与治疗提供思路。方法：收集行手术治疗的良性PHPT患者56 例,回顾性分析其临床资料及术前术后生化指标的变化,并按术后病理结果对其进行分组,比较其临床特征及生化指标的差异。结果：按病理类型将患者分为4组：甲状旁腺腺瘤（PA组）21 例（37.5%）,甲状旁腺腺瘤样增生（PAH组）28 例（50.0%）,甲状旁腺非典型腺瘤样增生（PAAH组）5例（8.93%）,甲状旁腺腺瘤合并甲状旁腺腺瘤样增生（PA+PAH组）2例（3.57%）。PHPT患者中女性明显高发,男女比例为1：5.22,且在PAH组所占比重明显高于PA组（P>0.05）。各组临床表现无明显差异。术前PTH在PAAH组明显高于PAH组,而术前血钙、血磷、25-羟基维生素D3在各组间比较无显著性差异。多处病灶有66.67%发生在PAH组,组间比较有显著性差异（x²=20.160a, P=0.000）。术后病理标本最大直径在PA组明显大于PAH组（P<0.05）,而在其余各组间比较无统计学差异（P>0.05）。PTH在术中标本切除后数值迅速下降,在术后第一天略有上升;血钙在术后呈持续下降趋势。PTH及血钙的下降幅度在各组间比较无显著性差异（P>0.05）。结论：良性原发性甲状旁腺功能亢进症中老年女性高发,尤其在PAH组明显高发。各种病理类型临床表现无差异。多处病灶主要集中在PAH组,PA组术后病理标本最大直径最大,PAAH组术前PTH水平最高,应对PAAH组患者加强术后PTH随访。     

西北地区汉族人核苷酸剪切修复蛋白的表达与头颈鳞癌发病风险的相关性研究

目的:初步探讨西北地区汉族人核苷酸剪切修复蛋白表达水平与头颈鳞癌发病风险的相关性,从翻译水平为头颈鳞癌提供新的筛检标志物。方法:收集118例头颈鳞癌患者和88例健康对照,均为西北地区汉族人。通过反向蛋白芯片实验检测研究对象外周血淋巴细胞中的5个核心核苷酸剪切修复蛋白的相对表达水平,采用卡方检验分析两组间一般特征的差异,并计算蛋白相对表达水平间的差异,logistic回归计算OR值及95%CI,最后通过绘制接受者操作特性曲线评价模型的诊断价值。结果:病例组XPB (Xeroderma pigmentosum, complementation group B)的表达水平显著低于对照组(P=0.013)。Logistic回归分析结果显示XPB高表达者相比,其低表达者头颈鳞癌患病风险的OR为1.74(95%CI,0.99-3.06)。此外,XPB的蛋白表达水平降低与SCCHN风险增加之间存在剂量反应关系(P_(trend)=0.042)。最后,我们通过接受者操作特性曲线计算曲线下面积,评估XPB表达水平的效应对于头颈鳞癌易感性筛检能力。包含XPB表达水平的效应模型中曲线下面积显著改善(P=0. 048)。结论:在西北地区汉族人中XPB的相对表达水平的降低与头颈鳞癌患病风险的增加相关。XPB表达水平的降低可能在既往吸烟者的头颈鳞癌患病风险中发挥更重要的作用。     

醋酸酐对太平洋白对虾(Penaeus vannamei)β-N-乙酰- D-氨基葡萄糖苷酶的抑制动力学

β-N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶与南美白对虾的食物消化吸收、蜕壳生长有着密切关系. 海水里存在的有机污染物将影响酶生理功能, 从而进一步影响虾的正常蜕壳,严重将导致对虾的死亡. 醋酸酐是常用的有机溶剂, 故本文应用动力学方法研究醋酸酐对南美白对虾β-N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶催化pNP-NAG水解时酶活力的变化规律. 表明在醋酸酐浓度低于20.0 mmol/L, 酶的抑制作用是可逆的, 测得醋酸酐对酶抑制的IC50为9.0 mmol/L. 用双倒数作图法测定醋酸酐与游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)的结合平衡常数, 结果显示醋酸酐是酶的非竞争性抑制剂. 用底物反应动力学方法观测在不同底物浓度下酶在0.0、3.0、6.0、9.0、12.0 mmol/L的醋酸酐溶液中的失活过程,分别测定了酶的微观失活速度常数k+0及复活速度常数k-0, 结果表明醋酸酐对酶的影响是快速结合再缓慢失活的过程. 比较微观失活速度常数k+0及复活速度常数k-0, 结果暗示在高浓度的醋酸酐溶液中, 酶将完全失活.     

利用风洞评价助剂对杀虫剂航空喷雾雾滴飘移的影响

【目的】研究不同剂型农药以及不同类型喷雾助剂对航空喷雾防治柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama的雾滴飘移的影响,探究如何减少雾滴飘移,以期为无人机低空低容量喷雾技术在防治柑橘木虱中的应用提供指导。【方法】选取登记用于防治柑橘木虱的两种杀虫剂和3种助剂,通过采用风洞试验室内模拟田间,风速设定为2 m/s和4 m/s,采用示踪剂法测定距喷头不同距离的药剂飘移沉积情况。【结果】当风速为2 m/s,添加倍达通和Y-20079两种助剂添加量为1%时,药剂在垂直与水平方向沉积均相对减少;添加806助剂后,添加量为0.5%时垂直与水平方向沉积均减少;当风速为4 m/s时,助剂Y-20079添加量为1%,可减少药剂在垂直与水平方向沉积;100 g/L吡丙醚乳油(稀释200倍)和20%噻虫胺悬浮剂(稀释40倍)相比,风速为2 m/s和4 m/s时,垂直和水平方向药剂沉积量均明显减少。【结论】采取低空低容量喷雾技术时,农药的乳油制剂相比于悬浮剂更容易飘失;通过添加倍达通、806和Y-20079等助剂,可减少雾滴的飘移。     

基于RAPD的群体标记法分析苜蓿种质遗传多样性

苜蓿种质资源的分子遗传多样性分析对于种质资源保存和育种利用具有重要指导意义。本研究选用群体标记法对来自甘肃省的16个苜蓿品种的DNA进行RAPD扩增,旨在研究其遗传多样性,并在此基础上筛选品种特异性引物用于进一步的品种鉴定。依据16个苜蓿品种间的Roger’s遗传距离进行UPGMA聚类分析结果显示,品种间亲缘关系与其选育背景紧密相关,供试的16个品种被划为4个类群,其中,匍匐型品种Jindera与其他直立型品种差异显著,自成1个类群,引进品种和甘肃省内具有国外种质来源的育成品种被划为同1类群,而甘肃地方品种聚为2个类群。10个RAPD引物中有4个引物OPE4、OPE5、OPE6和OPE7分别检测到5个品种甘农3号、甘杂27、Jindera、陇东和Algonuin的特异性条带,可进一步用于开发设计特异性引物进行品种鉴定工作。以上结果进一步证实,利用RAPD标记研究苜蓿系谱发育关系和选择杂交亲本应采用群体标记法。     

不同部位喉黏膜间充质细胞的分离培养

目的：探讨不同部位喉黏膜间充质细胞的分离、培养方法,为喉部组织工程提供更多的可供选择的种子细胞。方法：收集临床上喉部手术病人切下的不同部位的喉黏膜,主要是会厌的背侧黏膜和声带的黏膜,各3例,共计6例。对会厌背侧的黏膜采用消化培养的方法,对声带部位的黏膜采用组织块培养法。最后通过免疫荧光染色对两种方法所获得的细胞进行鉴定,确定其来源于喉黏膜的间充质。结果：通过两种方法均可以成功获得相应部位的细胞,免疫荧光染色vimentin均呈阳性表达且CK均呈阴性表达,证明了获得的细胞确实是来源于间充质。结论：本实验成功的培养出了喉部不同部位的间充质细胞,为喉部的组织工程提供了更多的可供选择的种子细胞。