家猫及其他猫科动物的生殖工程研究

在脊椎动物中,猫科动物是一类比较特殊的动物类群,共有37种动物,除家猫外,其余均为珍稀或临近灭绝的濒危动物,因而了解家猫的生殖习性和生殖规律,尤其是了解家猫胚胎工程领域,如猫卵母细胞的体外成熟（in vitro maturation IVM),体外受精（in vitro fertilization,IVF),显微受精等,对于利用现代生殖技术研究和探讨非家猫猫科动物的繁殖和保护具有极为重要的借鉴意义。     

小鼠Nlrp基因家族生物信息学分析

NLRP基因家族广泛分布于哺乳动物基因组中,在先天免疫反应和生殖发育过程中起着重要作用。本研究以小鼠Nlrp基因家族20个成员为研究对象,通过生物信息学方法对该基因家族成员在基因结构、保守结构域、蛋白质理化性质、亲水和疏水性、潜在磷酸化位点和基因表达等方面进行系统分析,并绘制系统进化树。研究表明,小鼠Nlrp家族基因序列结构差异较大,内含子数量变化较大,基因结构中有一个明显保守的CDS区域;基因家族序列保守性较好,有4个保守区域,序列长度分别为50、34、37、29,亚家族间保守性更高,其中Nlrp10没有亮氨酸重复结构域;基因同源性高,系统发生分析显示免疫相关基因与生殖发育相关基因在进化中已经分开,NLRP2和NLRP7可能起源同一祖先。所有蛋白质均有多个磷酸化位点,脂肪族系数介于82.54～100.33之间,GRAVY值均小于0,蛋白质表现为亲水性,无跨膜结构;亚细胞定位方面NLRP1A位于细胞核、NLRP1B位于质膜、NLRP5位于高尔基体,其它均位于细胞质;各蛋白质PI值均不相同,可用等电聚焦电泳区分各家族成员。所有Nlrp家族成员在配子发生和胚胎发育过程中均有不同程度的表达。本研究结论不仅丰富了NLRP基因家族信息,同时为进一步过渡到体外实验水平和实验研究方案的制定提供理论依据。     

小鼠电融合四倍体胚胎早期发育的研究(英文)

ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅＥａｒｌｙＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＭｏｕｓｅＴｅｔｒａｐｌｏｉｄＥｍｂｒｙｏｓＰｒｏｄｕｃｅｄｂｙＥｌｅｃｔｒｏｆｕｓｉｏｎ１ＬＩＧｕａｎｇｐｅｎｇ,ＣＡＩＳｈｉｘｕｎ,ＸＵＬｉｂｉｎ,ＳＵＮＸｉｎｇｓｈｅｎ,ＬＩＵ...     

我国涡虫纲分类学的研究

我国涡虫纲分类学的研究李光鹏（黑龙江省科学院自然资源研究所哈尔滨１５００４０）关键词涡虫，涡虫纲，分类学扁形动物门涡虫纲动物生活在海洋、淡水和潮湿的土壤中。多数营自由生活，少数为共生或寄生生活。是一类种类繁多，形态、大小、色泽和栖息环境多样性的动物［...     

低温保存的小鼠卵母细胞的体外授精研究

采用75分钟和150分钟两种精卵作用时间,对经6℃低温处理2小时和6小时的小鼠卵母细胞进行体外受精。精卵作用75分钟后,经6℃处理的卵子无一受精,而对照组的受精率为30.7％。作用150分钟后,低温处理2小时、6小时和对照组的受精率分别为62.0％,36.55％和76.0％。并对试验所出现的现象作了讨论。     

淡水三肠目涡虫的染色体研究进展

三肠目(Tricladida)淡水亚目(Paludi-cola)属于扁形动物门涡虫纲,共分四个科:三角头涡虫科(Dugesiidae)、扁平涡虫科(Planariidae)、树枝肠涡虫科(Dendrocoe-lidae)和洞穴涡虫科(Kenkiidae)。全世界已经发现35个属387种。除洞穴科涡虫尚未     

藏羚羊成纤维细胞系的建立及其核型分析

藏羚羊(Pantholops hodgsonii)是我国特有的国家Ⅰ级重点保护野生动物,生存在高海拔低氧环境下,具有高原生物的细胞遗传特性。实验采用组织块贴壁培养法进行原代培养,后经差异贴壁法联合消化排除法纯化,成功构建了藏羚羊成纤维细胞系,并对培养不同代次细胞的形态、生长动力学、染色体核型等进行了研究。结果表明,培养得到的藏羚羊细胞为典型的成纤维细胞,第7、10、15代细胞群体倍增时间分别为26、48、50 h。细胞的生长均为"S"型。染色体中二倍体染色体(2n=60)占主体,所占比例为65%～91%,包括性染色体X、Y在内均为端着丝粒类型,染色体组的总相对长度为193.45,平均相对长度为3.22,未发现随体、次缢痕等特殊标志性特征。     

牛转FAD3B基因胎儿成纤维细胞中内参基因的稳定性评估

采用RT-PCR扩增亚麻种子(Linum usitatissimum Linn)FAD3B基因,构建不同启动子的两种重组真核表达载体pIRES-AcGFP-CMV-FAD3B和pIRES-AcGFP-CAG-FAD3B,通过qRT-PCR检测转基因细胞中FAD3B基因的表达水平.以不同过表达水平的转基因细胞为试验对象,评价9种候选内参基因ACTB、GAPDH、18S rRNA、UXT、PPP1R11、RPS15A、SF3A1、EEF1A2和HMBS的稳定性.根据GeNorm、NornFinder和BestKeeper 3种统计学算法得到的稳定性值对基因进行排序.结果显示,内参基因稳定性的综合排序为PPP1R11＞EEF1A2＞1 8S rRNA＞RPS15A＞GAPDH＞HMBS＞UXT＞ACTB＞SF3A1,其中PPP1R11和EEF1A2是最稳定的内参基因.稳定内参的选择可以更加准确地校正基因的表达水平,从而为阐述基因的功能奠定了坚实的基础.     

藏羚与几种牛科动物成纤维细胞的特性比较

为研究高原低氧环境对哺乳动物细胞生长特性的影响,本文以高原低氧动物藏羚和同科的阿尔巴斯白绒山羊、蒙古绵羊及鲁西黄牛的耳源组织细胞为材料,利用DMEM /F12 培养液进行培养,建立了4 种动物的体外培养成纤维细胞系,并对其进行形态学观察、生长曲线绘制、凋亡检测、核型分析等生物学特性检测。结果表明:4 种动物的细胞经差异贴壁法联合消化排除法,可获得纯化的成纤维细胞,细胞形态一致且活力稳定,4 种动物细胞的形态与生长曲线无明显差异;藏羚、绒山羊、绵羊、牛同代次细胞生长倍增时间分别为26 h、22 h、23 h 和22 h;经流式细胞仪检测,细胞凋亡率分别为5.5% 、2. 7% 、8. 6% 和1.5% ;藏羚、绒山羊、绵羊与牛的染色体数目分别为60、60、54 和60。藏羚与绒山羊、牛染色体数目相同,且除性染色体外,其余均为端部着丝粒类型,而绵羊存在6 条中着丝粒类型染色体。该结果表明,在体外培养条件下,藏羚的体细胞生长特性与同科的其他物种的细胞生长特性存在明显差异。这为从细胞水平上研究藏羚对环境低氧适应的分子机理提供了基础。