普通烟草K^＋通道基因NKT4的克隆、序列和表达分析

通过比对拟南芥、胡萝卜、番茄和马铃薯的K+通道氨基酸序列得到了保守序列,设计1对简并引物,利用RT-PCR获得3条490bp的普通烟草K+通道基因中间片段.以其中一条中间片段设计特异性引物,应用RACE方法得到5′末端和3′末端cDNA序列.通过拼接并结合全长克隆及测序验证,获得一个未报道的普通烟草K+通道基因,并将其命名为NKT4(GenBank登录号为FJ233071).NKT4的cDNA全长为2937bp,其中5′非编码区45bp、编码区2679bp、3′非编码区213bp;编码区编码892个AA.构建了一个烟草、拟南芥及相关植物K+通道蛋白的系统进化树.基因表达分析表明,NKT4主要在烟草主根和侧根中表达,在烟草叶中也有少量表达.     

维生素E和微量元素Se对人肝癌细胞生长、分化及其癌基因表达的影响

本工作观察了体外环境中不同水平的维生素Ｅ和微量元素Ｓｅ对人肝癌细胞株（ＳＭＭＣ－７７２１）生长、分化和其癌基因（Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ）表达水平的影响。实验结果表明：高水平维生素Ｅ（２．４、９．２、２４．０ｎｍｏｌ／Ｌ）和Ｓｅ（０．１５、０．３０、０．６０ｎｍｏｌ／Ｌ）对肝癌细胞的集落形成率具有明显的抑制作用;生化分析显示高水平维生素Ｅ和微量元素Ｓｅ均可明显抑制环境中脂质过氧化的水平,Ｓｅ对癌细胞甲胎蛋白的分泌有明显的抑制作用,而维生素Ｅ作用不明显。细胞原位杂交发现维生素Ｅ浓度为２．４和９．２ｎｍｏ１／Ｌ时对细胞癌基因Ｎ－ｒａｓ的表达具有明显抑制作用;Ｓｅ浓度为０．１５和０．３０ｎｍｏｌ／Ｌ时对癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达明显抑制。实验还观察了维生素Ｅ和Ｓｅ之间的叠加效应,结果显示除对环境中脂质过氧化的抑制作用具有叠加效果外,对其他指标没有明显作用。     

维生素E和微量元素Se对人肝癌细胞生长,分化及其癌基因…

本工作观察了体外环境中不同水平的维生素Ｅ和微量元素Ｓｅ对人肝癌细胞株（ＳＭＭＣ－７７２１）生长,分经和其癌基因（Ｎ－ｒａｓ,ｃ－ｍｙｃ）表达水平的影响,实验结果表明：高水平维生素Ｅ（２．４、９．２、２４：０ｎｍｏｌ／Ｌ）和Ｓｅ（０．１５,０．３０,０．６０ｎｍｏｌ／Ｌ）对肝癌细胞的集落形成率具有明显的抑制作用;生化分析显示高水平维生素Ｅ微量元素Ｓｅ均可明显抑制环境中脂质过氧化的水平,Ｓｅ对癌细胞甲     

维生素E、微量元素锌和硒对大鼠体外原代肝细胞及储脂细胞胶原代谢的影响

对维生素E、微量元素锌和硒对大鼠肝脏细胞胶原代谢的调控进行了体外研究。结果表明:肝细胞和储脂细胞均参与肝脏的胶原代谢;环境中维生素E浓度的提高可抑制肝细胞和储脂细胞的核酸合成,对细胞蛋白合成的促进作用不明显,但对细胞胶原蛋白的合成却有选择性抑制作用;环境中微量元素锌和硒浓度的适当提高对肝细胞和储脂细胞的核酸增殖和蛋白质合成均有明显促进作用,但对细胞胶原蛋白合成具有相对抑制作用,若锌和硒的浓度过高则对细胞有损害。总之,营养环境的不同将大大影响肝脏胶原的代谢,因此对肝病病人给予合理的营养膳食可能有助于防止肝硬化的恶化。     

应用ELISA法检测纯化狂犬病疫苗制备过程中的病毒回收率

应用ＥＬＩＳＡ和病毒毒力滴度测定两种方法对狂犬病疫苗纯化过程中各步样品进行检测,并应用ＮＩＨ效力测定法对ＥＬＩＳＡ法测定的结果进行验证。结果显示,ＥＬＩＳＡ法具有灵敏度高、特异性强、重复性好、简便易行等优点,是一种较理想的病毒回收率测定方法。     

高脚杯上的法兰西

"用力弹出的瓶塞如闪电般划过,飞上屋顶。克拉里·艾黎克斯亲手倒出泡沫浓浓的阿伊葡萄酒,引起了满堂的欢声笑语,清澈的泡沫闪烁,这是法兰西亮丽的形象。"伏尔泰一语概括了法国和葡萄酒的至密关系。一个民族的嗜好     

牛转FAD3B基因胎儿成纤维细胞中内参基因的稳定性评估

采用RT-PCR扩增亚麻种子(Linum usitatissimum Linn)FAD3B基因,构建不同启动子的两种重组真核表达载体pIRES-AcGFP-CMV-FAD3B和pIRES-AcGFP-CAG-FAD3B,通过qRT-PCR检测转基因细胞中FAD3B基因的表达水平.以不同过表达水平的转基因细胞为试验对象,评价9种候选内参基因ACTB、GAPDH、18S rRNA、UXT、PPP1R11、RPS15A、SF3A1、EEF1A2和HMBS的稳定性.根据GeNorm、NornFinder和BestKeeper 3种统计学算法得到的稳定性值对基因进行排序.结果显示,内参基因稳定性的综合排序为PPP1R11＞EEF1A2＞1 8S rRNA＞RPS15A＞GAPDH＞HMBS＞UXT＞ACTB＞SF3A1,其中PPP1R11和EEF1A2是最稳定的内参基因.稳定内参的选择可以更加准确地校正基因的表达水平,从而为阐述基因的功能奠定了坚实的基础.     

用CaG株毒种制备精制狂犬病疫苗的研究

通过对狂犬病毒aG株在金黄地鼠肾细胞上传代培养,获得一种新型狂犬病毒毒株,即地鼠肾细胞适应株(CaG株)[1].由于该毒种具有生产方法简单,成本低廉,且外源因子污染机率小等优点,因此试用该毒种生产精制狂犬病疫苗.在相同条件下,分别用豚鼠脑毒种和细胞毒种各生产3批病毒原液,经相同纯化工艺制备成精制狂犬病疫苗.经初步检定用细胞毒种制备的疫苗安全性良好,疫苗免疫效价与豚鼠脑毒种疫苗无明显差异.     

精制原代地鼠肾细胞狂犬病疫苗制备工艺的研究

通过ａＧ 株病毒在金黄地鼠肾细胞中培养,而制备的一种新型灭活狂犬病精制疫苗已获成功。该纯化方法包括醋酸锌沉淀和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４ＦＦ柱层析,所生产的疫苗质量完全达到新型狂犬病疫苗的要求。该工艺方法简单,成本低廉,是一种理想的狂犬病疫苗生产方法。