| 牛转FAD3B基因胎儿成纤维细胞中内参基因的稳定性评估 |
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| 引用本文： | 王子东,苏建国,段彪,杨春荣,高广琦,康峰,张荣芳,胡晓明,扈廷茂,李光鹏.牛转FAD3B基因胎儿成纤维细胞中内参基因的稳定性评估[J].生物技术通报,2012,0(11):118-126. |
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| 作者姓名： | 王子东 苏建国 段彪 杨春荣 高广琦 康峰 张荣芳 胡晓明 扈廷茂 李光鹏 |
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| 作者单位： | 1. 内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室,呼和浩特,010021
2. 西北农林科技大学动物科技学院,杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家重大专项高产转基因肉牛新品种培育项目 |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR扩增亚麻种子(Linum usitatissimum Linn)FAD3B基因,构建不同启动子的两种重组真核表达载体pIRES-AcGFP-CMV-FAD3B和pIRES-AcGFP-CAG-FAD3B,通过qRT-PCR检测转基因细胞中FAD3B基因的表达水平.以不同过表达水平的转基因细胞为试验对象,评价9种候选内参基因ACTB、GAPDH、18S rRNA、UXT、PPP1R11、RPS15A、SF3A1、EEF1A2和HMBS的稳定性.根据GeNorm、NornFinder和BestKeeper 3种统计学算法得到的稳定性值对基因进行排序.结果显示,内参基因稳定性的综合排序为PPP1R11＞EEF1A2＞1 8S rRNA＞RPS15A＞GAPDH＞HMBS＞UXT＞ACTB＞SF3A1,其中PPP1R11和EEF1A2是最稳定的内参基因.稳定内参的选择可以更加准确地校正基因的表达水平,从而为阐述基因的功能奠定了坚实的基础.
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| 关 键 词： | 实时荧光定量RT-PCR 转基因细胞 内参基因 GeNorm NormFinder Bestkeeper |
Evaluations of Reference Genes in Bovine Transfected FAD3B Gene Fetal Fibroblasts |
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| Wang Zidong
,
Su Jianguo
,
Duan Biao
,
Yang Chunrong
,
Gao Guangqi
,
Kang Feng
,
Zhang Rongfang
,
Hu Xiaoming
,
Hu Tingmao
,
Li Guangpeng.Evaluations of Reference Genes in Bovine Transfected FAD3B Gene Fetal Fibroblasts[J].Biotechnology Bulletin,2012,0(11):118-126. |
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| Authors: | Wang Zidong Su Jianguo Duan Biao Yang Chunrong Gao Guangqi Kang Feng Zhang Rongfang Hu Xiaoming Hu Tingmao Li Guangpeng |
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