精子特异性蛋白Cabs1多克隆抗体的制备及多用途验证

制备抗小鼠Cabs1(Calcium-binding and spermatid-specific protein 1)多克隆抗体,以便进一步利用小鼠模型解析Cabs1蛋白在精子变形与精子功能调控中的功能。以密码子的简并性和偏好性为原则,优化小鼠Cabs1基因编码序列,构建重组表达载体ET-30a(+)/Cabs1,原核表达系统表达重组蛋白,免疫新西兰大白兔获得血清,通过亲和纯化得到Cabs1多克隆抗体。Western Blot、免疫荧光实验验证抗体的应用价值。结果显示,获得了高效价、特异性识别Cabs1的多克隆抗体。Western Blot、免疫荧光实验发现小鼠Cabs1蛋白开始表达于长型精子阶段,在成熟精子中主要定位于顶体和主段。同时进一步发现该抗体还可以识别人Cabs1蛋白。此外,Cabs1抗体也可以识别天然未变性的Cabs1蛋白,用于鉴定和研究Cabs1蛋白的互作复合物。制备的抗体解决了目前商业化的Cabs1抗体均不能识别小鼠来源的Cabs1蛋白的问题。     

围术期微生态制剂对电切肠息肉患者肠黏膜再生修复的作用

目的探讨围术期给予微生态制剂酪酸梭菌活菌片对电切肠息肉患者肠黏膜再生修复的影响。方法选择我院2017年1月至2019年6月期间收治的104例择期电切手术的肠息肉患者为研究对象,随机分为对照组和研究组,各52例。两组患者均给予围术期常规治疗,研究组在此基础上于术前2 d至术后4周给予酪酸梭菌活菌片。采用乳果糖/甘露醇(LAC/MAN)吸收试验评价患者肠黏膜功能,复查电子结肠镜评价肠黏膜修复率和肠黏膜评分。结果研究组患者术后肠黏膜修复情况优于对照组,肠黏膜评分低于对照组,组间差异具有统计学意义(P0.05)。术前两组患者LAC、MAN和LAC/MAN比较差异无统计学意义(P0.05),术后研究组患者LAC和LAC/MAN显著低于对照组(P0.05)。术前两组患者D-乳酸、DAO、ET和PCT水平比较,差异无统计学意义(P0.05),术后研究组患者D-乳酸、DAO、ET和PCT水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论围术期给予电切肠息肉患者微生态制剂酪酸梭菌活菌片可降低肠黏膜通透性,促进肠黏膜的再生和修复。     

类器官的构建与应用进展

类器官是在体外经由干细胞驱动的, 形成具有来源器官显微解剖特征的多细胞三维结构且能自我更新的微组织。类器官能分化产生器官特异性的多种细胞类型,能重现对应器官的部分功能和空间架构,它的诞生为生命医学研究和临床应用注入了新动能,在癌症基础与临床研究、再生医学等领域表现出广阔的应用前景。对近些年国内外类器官研究进展进行综述,介绍其构建过程与培养体系,并详细阐述其作为体外研究模型的优缺点,为基于类器官的科学研究与应用提供了参考。     

经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液对COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者动脉血气、炎性因子及免疫功能的影响

摘要 目的：探讨经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液对慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并Ⅱ型呼吸衰竭患者动脉血气、炎性因子及免疫功能的影响。方法：选择2017年5月-2019年12月我院收治的COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者104例,随机分为研究组和对照组,每组52例。两组患者均给予了基础治疗,对照组采用经鼻高流量氧疗治疗,研究组采用经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液治疗。比较两组临床疗效、不良反应发生情况及治疗前后的动脉血气指标[动脉血PH值、动脉血氧分压（PaO2）、动脉血二氧化碳分压（PaCO₂）、血氧饱和度（SaO₂）],血清炎性因子[白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）]水平,外周血CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞水平及CD4⁺/ CD8⁺值、免疫球蛋白A（IgA)、IgM、IgG水平。结果：研究组总有效率为92.31%（48/52）,显著高于对照组78.85%（40/52）（P＜0.05）。治疗后两组患者动脉血pH值、PaO₂、SaO₂、CD4⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺、IgA、IgM、IgG显著升高,PaCO2、IL-6、TNF-α、CRP、CD8⁺显著降低（P＜0.05）,研究组患者动脉血pH值、PaO₂、SaO₂、CD4⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺值、IgA、IgM、IgG显著高于对照组,PaCO₂、IL-6、TNF-α、CRP、CD8⁺T细胞显著低于对照组（P＜0.05）。两组不良反应发生率比较无统计学差异（P>0.05）。结论：经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液治疗可纠正COPD合并II型呼吸衰竭患者的动脉血气指标,改善免疫功能,缓解机体炎症反应。     

不同时机行血管介入栓塞术治疗颅内动脉瘤的疗效及对患者预后、神经功能和血清炎性因子的影响

摘要 目的：探讨不同时机行血管介入栓塞术治疗颅内动脉瘤的疗效及对患者预后、神经功能和血清炎性因子的影响。方法：选择2019年3月到2020年12月期间我院收治的80例颅内动脉瘤患者,按手术时间的不同将其分为早期组、延期组,其中早期组36例,发病至手术时间≤72 h;延期组44例,发病至手术时间＞72 h,对比两组疗效、预后、神经功能、血清炎性因子及并发症发生率。结果：早期组的完全栓塞率高于延期组,基本栓塞率低于延期组（P<0.05）。两组术后3个月美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）、改良Rankin量表评分均较术前下降,且早期组低于延期组（P<0.05）。早期组的预后良好率高于延期组（P<0.05）。两组术后3 d血清白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平下降,且早期组低于延期组（P<0.05）,白介素-10（IL-10）水平升高,且早期组高于延期组（P<0.05）。早期组的并发症发生率低于延期组（P<0.05）。结论：早期行血管介入栓塞术治疗颅内动脉瘤患者,可提高完全栓塞率,减轻神经功能损伤及炎性应激,降低并发症的发生风险,促进预后和生活质量改善。     

植物细胞工程在小麦抗赤霉病育种中的应用

小麦赤霉病是全球性小麦病害,严重影响小麦产量和品质,赤霉菌产生的毒素进一步威胁人畜安全,培育抗病品种是控制小麦赤霉病危害的根本途径。植物细胞工程技术可创造新的遗传变异、加快育种进程,已经广泛应用于小麦抗赤霉病育种。概述了体细胞无性系变异诱导、花药培养、小麦与玉米杂交培育加倍单倍体以及幼胚培养一年多代快速成苗等植物细胞工程技术研究进展,着重介绍了其在抗小麦赤霉病育种中的应用。最后对未来发展趋势做了展望,植物细胞工程结合分子育种技术将在小麦抗赤霉病品种培育中发挥更重要的作用。     

含蛋白转导域的SARA/SBD融合蛋白的原核表达、纯化及生物学活性鉴定

目的:SARA/SBD是纤维化形成过程中的负性调节因子。原核表达、纯化含反式激活蛋白(TAT)蛋白转导域(PTD)的TAT PTD-SARA/SBD融合蛋白,并鉴定其生物学活性。方法:将TAT PTD-SARA/SBD基因克隆入带His标签的原核表达载体pET-44a(+)中,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,表达产物经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后,SDS-PAGE和Western印迹鉴定目的蛋白;用人腹膜间皮细胞系(HPMC),通过免疫细胞化学方法检测其穿膜能力,及与TGF-β1信号通路中Smad2因子的共定位情况。结果:用基因工程方法表达和纯化了TAT PTD-SARA/SBD融合蛋白,目的蛋白约占菌体总蛋白的20%左右,且以可溶形式表达,经Ni2+-NTA纯化后,所获蛋白纯度高于95%(HPLC归一法);功能学实验结果显示该蛋白能穿过胞膜,主要定位于胞核,且与Smad2因子具有核内共定位。结论:表达了TAT PTD-SARA/SBD融合蛋白,该蛋白具有生物学活性。     

PGC-1α对骨骼肌肌纤维类型及运动能力的调控作用

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(peroxisome proliferator activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)可调节能量代谢、诱导线粒体生物合成;在骨骼肌中促进肌纤维类型由IIb型或IId/x型向IIa型或I型转化;PGC-1α-b和PGC-1α-c亚型与运动耐力变化关系密切。全身性和骨骼肌特异性调节PGC-1α表达对骨骼肌肌纤维类型的转化和运动耐力的改变具有一定差异。外源性调控PGC-1α表达对提高运动耐力具有广阔发展前景。     

我国过鱼设施建设需求、成果及存在的问题

本文首先阐述了水利水电工程对河流连通性的影响以及修建过鱼设施的对策,然后从河流破碎化程度和鱼类洄游习性的角度分析了国内建设过鱼设施的需求,介绍了国内建设过鱼设施的成果,最后提出了6点过鱼设施相关问题和建议:(1)利用多指标量化评价的方法,科学地确定过鱼对象;(2)以复杂流场为背景条件,贴合实际地推进鱼类上溯行为研究;(3)对过鱼设施加大资金投入,扩大设施规模,加大过鱼设施过水流量(至少应为河流流量的1%);(4)为鱼类下行、低水头水工建筑物引起的跌水河段建设过鱼设施;(5)扩大过鱼效果评估的覆盖面,提高监测时长和频率,提出有广泛适用性的监测评估方法;(6)栖息地修复、增殖放流、生态调度、分层取水等多手段联动,确保鱼类通过过鱼设施后仍然能够生存。     

酪酸梭菌与胃肠道及肝脏疾病的研究进展

酪酸梭菌作为一种革兰阳性厌氧杆菌,从其发现、研究、开发到今天的广泛应用已经有140年的历史。相关作用机理研究发现,其具有调节肠道菌群平衡、保护肠道黏膜、增强宿主免疫力、抗肿瘤、调控基因表达和抑制炎症反应等多方面的作用。酪酸梭菌作为一种微生态制剂,已广泛应用于医药、保健和水产等多种行业,尤其在预防与治疗菌群失调引起的相关腹泻、炎症性肠病、肠易激综合征、结直肠癌及肝性脑病、肝硬化等肝脏疾病方面已有深入研究,一直是微生态领域研究的热点。因此,本文就酪酸梭菌与胃肠道及肝脏疾病的相关研究进展进行简要综述。