慢性阻塞性肺疾病患者支气管肺泡灌洗液细菌宏基因组DNA的制备

【目的】优化稳定期慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)患者支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids,BALF)细菌宏基因组DNA的提取方法,以便于高效提取微量的细菌DNA进行后续的PCR反应和测序。【方法】取稳定期COPD患者的BALF 5mL,离心收集细胞。为了有效提取样品中革兰氏阳性菌的基因组,对QIAGEN的DNA提取试剂盒的操作步骤进行优化:加入裂解缓冲液ATL后首先运用研磨珠和多功能生物样品匀质器破碎菌壁,再加入蛋白酶K孵育,然后加入裂解缓冲液AL振荡混匀。无水乙醇沉淀DNA后,将全部溶液过柱,用洗液AW1和AW2各洗柱一次,最后加50μL洗脱液洗脱DNA。提取的DNA定量后,运用PCR方法检测样本中的细菌16S rDNA量,并按照测序要求构建DNA文库进一步验证。【结果】试剂盒优化法提取的BALF的DNA总量为467.5(135.0-1697.5)ng,明显高于按照传统酚-氯仿法提取的DNA总量95.0(0-612.5)ng,并且所提取的DNA可以很好的扩增细菌的16S rDNA以及构建DNA文库,改良后的扩增产物明显增多(P=0.002)。【结论】使用DNA提取试剂盒结合研磨珠和多功能生物样品匀质器破菌壁的方法能够更高效的提取BALF中微量的宏基因组DNA,为进一步的测序和菌群分析打下基础。     

MSCTA对基底动脉变异的初步研究及其临床意义

目的:研究MSCT血管成像对基底动脉变异的诊断价值,并探讨其临床意义.方法:回顾性分析MSCT血管成像诊断基底动脉变异120例.所有患者均采用GELightSpeed64层螺旋CT对其头颈部动脉进行CT血管成像扫描,将获得的原始数据传入AW4.2P后处理工作站,血管重建技术包括容积再现(VR)、最大密度投影(MIP)、多平面重建(MPR)及曲面重建(CPR),影像分析采用智能血管分析与目测法相结合.结果:基底动脉走行弯曲50例(42%),包括左侧凸30例(25%)、右侧凸例15例(占12.5%)、S型凸5例(3.5%);基底动脉起止点变异47例(39.3%),其中起点变异35例(29.3%)、终点变异12例(10%);基底动脉形态变异14例(11.7%),其中开窗型lO例(8.3%)、管径粗大2例(占1.7%)、管径细小2例(1.7%);基底动脉主要分支变异9例(7.5%).结论:MSCT血管成像是一种无创性诊断基底动脉变异的有效方法,能够解释临床上部分不明原因的基底动脉供血不足,具有重要的临床意义.     

经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液对COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者动脉血气、炎性因子及免疫功能的影响

摘要 目的：探讨经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液对慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并Ⅱ型呼吸衰竭患者动脉血气、炎性因子及免疫功能的影响。方法：选择2017年5月-2019年12月我院收治的COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者104例,随机分为研究组和对照组,每组52例。两组患者均给予了基础治疗,对照组采用经鼻高流量氧疗治疗,研究组采用经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液治疗。比较两组临床疗效、不良反应发生情况及治疗前后的动脉血气指标[动脉血PH值、动脉血氧分压（PaO2）、动脉血二氧化碳分压（PaCO₂）、血氧饱和度（SaO₂）],血清炎性因子[白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）]水平,外周血CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞水平及CD4⁺/ CD8⁺值、免疫球蛋白A（IgA)、IgM、IgG水平。结果：研究组总有效率为92.31%（48/52）,显著高于对照组78.85%（40/52）（P＜0.05）。治疗后两组患者动脉血pH值、PaO₂、SaO₂、CD4⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺、IgA、IgM、IgG显著升高,PaCO2、IL-6、TNF-α、CRP、CD8⁺显著降低（P＜0.05）,研究组患者动脉血pH值、PaO₂、SaO₂、CD4⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺值、IgA、IgM、IgG显著高于对照组,PaCO₂、IL-6、TNF-α、CRP、CD8⁺T细胞显著低于对照组（P＜0.05）。两组不良反应发生率比较无统计学差异（P>0.05）。结论：经鼻高流量氧疗联合参芪扶正注射液治疗可纠正COPD合并II型呼吸衰竭患者的动脉血气指标,改善免疫功能,缓解机体炎症反应。     

在生理学研究中要正确运用统计学

目的：为从事生理学研究的科研工作者正确运用统计学提供一些有效的技术方法。方法：通过全面系统地阐述"统计学在生理学研究过程中充当了重要的角色"和"使生理学研究课题得出的结论经得起时间和实践检验的关键技术"两个命题,突显出统计学对于科研工作的重要性、解释了统计学难学难用的原因,并提供了正确运用统计学的关键技术。结果：呈现出统计学的三大核心内容,即"如何使课题设计无可挑剔"、"如何严守课题实施的操作规程"和"如何使结论陈述有理有据",使正确运用统计学具有很强的可操作性。结论：在生理学研究中,只要锲而不舍地追求科学严谨的科研作风和精湛的科研技能,就一定能使所获得的科研结论经得起时间和实践的检验。     

老年支气管哮喘患者血清 MC-CP、S1P水平与 T细胞免疫分子及气道基底膜厚度的关系

摘要 目的：探讨老年支气管哮喘患者血清肥大细胞羧肽酶（MC-CP）、1-磷酸鞘氨醇（S1P）水平,并分析与 T细胞免疫分子及气道基底膜厚度的关系。方法：选择 2016年 8月至 2018年 12月我院收治的老年支气管哮喘患者 86例,根据哮喘控制情况分为急性发作期组 48例和缓解期组 38例,选择同期医院体检的健康老年人 40例作为对照组,检测并比较各组血清 MC-CP、S1P水平、肺功能、T细胞免疫分子、支气管黏膜网状基底膜厚度（BMT）,并分析血清 MC-CP、S1P水平与肺功能指标、T细胞免疫分子及BMT的相关性。结果：急性发作组、缓解组患者血清 MC-CP、S1P水平及 BMT、CD8⁺均高于对照组,且急性发作组患者血清MC-CP、S1P、CD8+水平高于缓解期组（P＜0.05）。急性发作期组和缓解期组 FEV1%pred、CD4⁺、CD4⁺/ CD8⁺,血清免疫球蛋白 A（IgA）、免疫球蛋白 M（IgM）、免疫球蛋白 G（IgG）水平低于对照组,且急性发作期组上述指标低于缓解期组（P＜0.05）。老年支气管哮喘患者血清 MC-CP、S1P与 CD8⁺、BMT呈正相关（P＜0.05）,与 FEV1%pred、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺、IgA、IgM、IgG呈负相关（P＜0.05）。结论：老年支气管哮喘患者的血清 MC-CP、S1P水平显著升高,其水平与与肺功能、免疫功能和气道重塑相关,且血清MC-CP与 S1P水平密切相关。     

在生理学研究中如何正确把握试验设计三要素

目的：为从事生理学研究的科研工作者制订科学完善的试验设计方案提供一些有效的技术方法。方法：通过正面阐述三要素和正确把握每个要素的关键点;再通过分析已发表的学术论文中未妥善把握三要素的案例,为生理学研究工作者在制订课题设计方案时能正确把握三要素提供具有可操作性的方法。结果：呈现出试验设计三要素的具体内容,即"受试对象"、"影响因素"和"试验效应",并且,为如何正确把握每个要素提供具体措施。结论：试验设计的三要素是从事试验研究的"物质基础",正确把握它们是制订出科学完善试验设计方案的重要环节之一。     

纳米材料层状双氢氧化物（LDH）对茄二十八星瓢虫dsECR致死效应的影响

纳米材料被视为重要的RNA干扰增效物质。层状双氢氧化物（LDH）是具有生物相容性的可降解纳米材料，可以显著提高dsRNA防控黄瓜花叶病毒的效果。为明确LDH能否提高昆虫RNA干扰的效果，以期促进RNA生物农药在农业害虫防治中的应用和推广，本研究选择茄二十八星瓢虫Henosepilachna vigintioctopunctata的EcR基因进行RNA干扰介导的致死效应研究。将LDH与dsEcR组装形成复合物LDH-dsEcR，利用琼脂糖凝胶电泳确定LDH-dsEcR的最佳装载比例。通过静置法检测LDH-dsEcR的稳定性，借助透射电子显微镜验证其组装状态。采用浸叶法测定LDH-dsEcR的增效性，使用体视镜观察其对试虫形态的影响。结果表明：LDH与dsEcR可形成稳定的复合物，其最佳装载比为16∶1。LDH对茄二十八星瓢虫无毒性，但经LDH与dsEcR处理，部分试虫虫体呈黑褐色，或无法蜕皮化蛹，或维持在预蛹状态。遗憾的是LDH-dsEcR复合物的增效作用不明显，推测昆虫肠道的酸碱度可能是影响LDH-dsRNA增效的因素之一。本研究首次为利用LDH研究昆虫RNA生物农药提供了可观的理论基础。