精子特异性蛋白Cabs1多克隆抗体的制备及多用途验证

制备抗小鼠Cabs1(Calcium-binding and spermatid-specific protein 1)多克隆抗体,以便进一步利用小鼠模型解析Cabs1蛋白在精子变形与精子功能调控中的功能。以密码子的简并性和偏好性为原则,优化小鼠Cabs1基因编码序列,构建重组表达载体ET-30a(+)/Cabs1,原核表达系统表达重组蛋白,免疫新西兰大白兔获得血清,通过亲和纯化得到Cabs1多克隆抗体。Western Blot、免疫荧光实验验证抗体的应用价值。结果显示,获得了高效价、特异性识别Cabs1的多克隆抗体。Western Blot、免疫荧光实验发现小鼠Cabs1蛋白开始表达于长型精子阶段,在成熟精子中主要定位于顶体和主段。同时进一步发现该抗体还可以识别人Cabs1蛋白。此外,Cabs1抗体也可以识别天然未变性的Cabs1蛋白,用于鉴定和研究Cabs1蛋白的互作复合物。制备的抗体解决了目前商业化的Cabs1抗体均不能识别小鼠来源的Cabs1蛋白的问题。     

Hcy、ACA、FA联合检测在预测脑梗死发生中的临床价值

目的:探讨Hcy、ACA、FA联合检测在预测脑梗死发生中的临床价值.方法:采用EILSA及化学发光免疫分析技术,对66例脑梗死患者和30例健康对照者进行血清的ACA、Hcy及FA的检测.结果:脑梗死患者Hey浓度为[(22.68±12.70)μmol/L]明显高于健康对照组[(13.38+2.61)μmol/L],差异非常显著(P<0.01).叶酸[(3.87±2.02)ng/ml]水平明显低于健康对照组[(519.37±437.57)ng/mL](P<0.05);脑梗死患者ACA和高Hey血症的检出率为53.03%和68.18%与健康对照组(16.67%)比较,差异非常显著(P<0.01);ACA、Hcy及FA单独预测脑梗死的敏感性分别为87.50%、90.00%和96.3%;特异性为44.60%、54.40%和37.09%;在预测脑梗死发生中ACA、Hcy及FA联合检测优于单项检测.结论:高Hcy血症和ACA均是脑梗死发病的独立的危险因素.ACA可能参与脑血管病变的发病过程.ACA、Hcy及FA联合检测可较好地预测脑梗死的发生,其中以ACA和Hcy联合检测为最佳,对于预测脑梗死发生具有较高的临床价值.     

hs-CRP、VEGF、CEA联合检测在鉴别良、恶性胸腹腔积液中的临床价值

目的:探讨hs-CRP(high-sensitivity CRP,超敏CRP)、VEGF(Vascular endothelial growth factor,血管内皮生长因子)、CEA(癌胚抗原)对胸腹腔积液鉴别诊断的临床价值.方法:应用乳胶增强散射比浊法、EILSA方法及电化学发光免疫分析技术,检测81例患者胸腹腔积液中hs-CRP、VEGF和CEA的浓度.结果:恶性胸腹腔积液组hs-CRP浓度为[(10.03±10.86)mg/l]与良性胸腹腔积液组[(3.24±4.56)mg/l]比较,差异非常显著(P<0.01);恶性胸腹腔积液组VEGF浓度为[(321.41±295.91)pg/ml]与良性胸腹腔积液组[(31.00±92.87)pg/ml]比较,差异非常显著(P<0.01);恶性胸腹腔积液组CEA浓度为[(227.46±738.08)ng/ml]与良性胸腹腔积液组[(1.10±1.12)ng/ml]比较,浓度明显高于良性组(P<0,05);hs-CRP、VEGF和CEA恶性胸腹腔积液中检测的敏感性分别为47%、58%和47%、特异性为57%、96%和98%;在区分良恶性胸腹腔积液时,hs-CRP、VEGF和CEA联合检测优于单项检测.结论:恶性胸腹腔积液组中hs-CRP、VEGF和CEA水平明显高于良性组.hs-CRP、VEGF及CEA联合检测可区分良、恶性胸腹腔积液的性质,其中以VEGF及CEA联合检测为最佳,对于良、恶性胸腹腔积液的鉴别诊断具有较高的临床价值.     

抗RA33抗体、RF、CRP、ANA与ENA联合检测在类风湿性关节炎患者诊断、治疗及预后中的作用

目的：探讨血清抗RA33抗体、RF、CRP联合检测在类风湿性关节炎患者诊断、治疗及预后中的作用。方法：采用ELISA法对35例类风湿性关节炎患者和30例健康对照者进行抗RA33抗体的检测,间接免疫荧光法检测ANA、免疫印迹法检测ENA,免疫比浊法进行类风湿因子（RF）及CRP的检测。结果：类风湿性关节炎患者组RF水平为：[（104．51±153．88）KIU／L]与健康对照组[（10．89±2．78）KIU／L]比较,差异非常显著（p〈0．01）;类风湿性关节炎组CRP[（11．60±23．24）mg／L]与健康对照组[（2．57±2．18）mg／L]比较,差异显著（p〈0．05）;类风湿性关节炎组抗RA33抗体水平：[（17．81±35．11）U／mL]与健康对照组[（8．10±8．40）U／mL]比较,差异非常显著（p〈0．01）。RF、抗RA33抗体、CRP及ANA诊断类风湿性关节炎的灵敏度分别为：80．00％,34．29％,42．86％,62．86％;RF、抗RA33抗体、CRP及ANA诊断类风湿性关节炎的特异性分别为：93.33％,93.33％,90．00％,96．67％;ENA的检出率均较低。结论：类风湿性关节炎患者抗RA33抗体检出的灵敏度低,但特异性强。对类风湿性关节炎患者进行抗RA33抗体、ANA、RF、CRP、ENA联合检测,对于疾病的进展、病因分析、指导治疗和改善预后均具有重要意义。     

IgA肾病合并高尿酸血症的临床分析

目的：探讨血清尿酸对IgA肾病临床,病理及预后的影响,为临床治疗和预后评估提供依据。方法：分析我院2011年1月-2012年1月149例经肾穿活检确诊为原发性IgA肾病患者的临床和病理资料。采用t检验和X2检验进行统计学处理。结果：（1）伴高尿酸血症IgA肾病的发病率为30.2%,男性偏多,男女发病率无统计学差异（P〉0.05）。（2）女性高尿酸血症组BUN、Cys-C、Scr水平显著高于尿酸正常组（P〈0.05）,男性两组间无显著差异（P〉0.05）,而血清UA水平无论男女高尿酸血症组均显著高于尿酸正常组（P〈0.05）;尿酸正常组血清BUN、UA、Cys-C、Scr水平男性显著高于女性（P〈0.05）,高尿酸血症组血清UA水平男性显著高于女性（P〈0.05）;血清IgA、C3、IgA/C3比值无论男女,高尿酸血症组与尿酸正常组均无显著差异（P〉0.05）。（3）高尿酸血症组病理改变以Ⅳ-Ⅴ多见（57.8%）,而正常尿酸组则以Ⅰ-Ⅱ为主（46.2%）,血尿酸正常组与高尿酸血症组Lee＇s分级构成比差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：伴有高尿酸血症的IgA肾病患者男性血尿酸水平高于女性,但血尿酸水平升高对女性肾功能影响更大;高尿酸血症对血清IgA,C3水平的变化影响不大;伴高尿酸血症IgA肾病病理改变程度较尿酸正常组更加严重。     

血清Hcy、FA、VitB12水平及H.pylori感染与脑梗死的相关性研究

目的：探讨脑梗死（cerebral infarction,CI）患者血清同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）、叶酸（folate,FA）、维生素B12（Vitamin B12,VitBl2）水平及幽门螺杆菌（H_pylori）感染与脑梗死的关系,为预防和治疗脑梗死提供参考依据。方法：选择本科收治的132例脑梗死患者和同期81例健康对照者为研究对象,检测和比较其血清同型半胱氨酸（Hey）、叶酸（FA）、VitB12水平及HP-IgG抗体。结果：（1）脑梗死患者H．pylori的感染率为50．76％,显著高于健康对照组（35．80％）（X2=0．54,P〈0．05）;（2）脑梗死患者血清Hey[（20．02±8．84）μmol／L]和FA水平[（14．47±6．38）ng／mL）]与健康对照组[（12．36±4．97）μmol／L,（16．82±11．43）ng／mL）]比较,均具有显著差异（P〈0．01,P〈0．01）;而VitB12水平与健康对照组比较无统计学意义（P〉0．05）;（3）脑梗死患者中,HP-IgG阳性的患者Hey水平[（24．20±8．81）μmol／L]明显高于HP-IgG阴性的患者[（15．71±6．53）μmol／L]（P〈0．01）,血清FA水平[（14．59±7．54）ng／mL）]明显低于于HP-IgG阴性的患者[（14．43±4．98）ng／mL]（P〈0．05）,而两组之间VitBl2水平比较无明显差异（P〉0．05）;HP—IgG阳性的脑梗死患者Hey水平[（24．20±8．81）bLmol／L]与HP—IgG阳性的健康对照组[（13．25±5．24）μmol／L]相比,差异显著（P〈0．05）,FA,VitB12水平低于健康对照组,但并无显著差异（P〉0．05）.结论：脑梗死患者H．pylori的感染率高于健康人群;H．pylori感染可能影响脑梗死患者Hey的代谢,导致Hey水平升高,促进了脑梗死的发生和发展。     

ICU 应用IABP 治疗心脏外科术后患者的护理临床效应

目的:探讨应用主动脉内球囊反搏术(IABP)治疗心脏外科术后患者的护理方法与临床效果。方法:回顾性分析总结我院2008年6月～2009年12月收治的25例心脏外科术后应用主动脉内球囊反搏术患者的临床资料。结果:本组患者25例患者均无并发症发生,其中23例症状改善,2例病情恶化。护士应熟练掌握IABP机的工作原理及报警项目;应重视基础护理,密切监测生命体征及各项检查结果;早期观察和预防并发症发生。结论:在临床护理中,应组织护士学习IABP相关知识,使护士熟要掌握相关的临床护理技术,从而确保IABP良好的的治疗效果。     

哺乳动物精浆胞外囊泡及各组分的功能

精浆胞外囊泡是一种存在于精浆的膜性囊泡,按分泌器官分为附睾小体和前列腺小体。囊泡可与精子细胞膜发生融合,通过传递内容物或介导信号通路进而调节精子功能。它含有多种活性物质,其中蛋白质组分可影响精子活力以及顶体反应,并有清除损伤精子和促进细胞粘附的作用;脂质组分具有调节靶细胞质膜稳定性的作用;核酸组分主要参与免疫反应、跨代遗传及男性不育;离子则是多种酶的辅助因子,在调节酶活性和精浆微环境中发挥重要作用。不同组分对精子功能的影响不尽相同,本文将对此方面的研究进展进行详尽的综述,以期为该领域相关研究人员提供一定的参考。