加速苏木精染色液“成熟”的两种方法

海登汉氏(Heidenhain’s)苏木精染色法是一种经典的细胞核和染色体的染色法,广泛地用于动、植物制片和细胞学的压片中,而且对很多难于被其他染料着色的材料,用此法仍能取得比较良好的效果。但该法中的苏木精染色液配后不能马上使用,需放在空气中经一到二个月“成熟”后才能使用。“成熟”即苏木精氧化成苏木素(氧化苏木精)的过程:     

一种新的猪蛔虫横切片的制作方法

蛔虫是线形动物门的代表动物 ,是学习和观察线虫动物最好的实验材料。我们在借鉴前人经验的基础上 ,经多次实验与反复比较 ,探索出了用正丁醇脱水透明 ,整染制片的新方法。现将具体操作步骤介绍如下 :1　取材　到肉联厂采集新鲜猪蛔虫 ,鉴别雌雄后 ,分别入生理盐水。2　固定　将标本取中段剪成 4～ 5cm入 1 0 %福尔马林液固定 4 0 h。自来水冲洗 2 4 h后 ,用锋利刀片将已剪成 4～5cm的标本进一步切成 4～ 5mm,入蒸馏水 1～ 2 h。3　染色　采用 Mayers苏木精液 (苏木精 2 5mg,钾明矾1 .2 5g,碘酸钠 5mg,蒸馏水 75ml) ,染 3 6～ 4 8h,染液在…     

MALLORY磷钨酸苏木精染色及其应用

在显示心肌、骨骼肌的肌纤维主要结构及病变时 ,Mallory磷钨酸苏木精 (phoshangstic acidHematoxylin,PTAH)染色是常用的一种结缔组织染色法 ,此法不但能清晰地显示正常肌纤维的横纹 ,同时还能显示其它多种组织成分 ,特别在尸检工作中应用较普遍。1 .PTAH染色机制在 PTAH染液中只含苏木精一种染色剂 ,在磷钨酸参与下 ,经氧化成熟后能将不同组织及正常与异常部分染成蓝色和棕红色两种不同的颜色。Mallory在最初并未阐明 PTAH染色反应原理 ,但其方法仍符合现代组织化学的基本理论。PTA酸根基团中存在着许多空间 ,而这些空间和分子对…     

苏木精染色液的改进和使用

报道了一种新的特制苏木精染色液的配制、使用方法、染色效果及其使用价值。实验表明,该染色液全面而明显地优于通用的Harris染色液。     

克氏原螯虾(Procambarus clarkii)血细胞染色方法的研究

甲壳类血细胞的形态和分类是甲壳类免疫学研究的基础.本文选择三种甲壳类血细胞的常用染料:瑞氏染液、姬姆萨染液和瑞氏-姬姆萨混合染液,研究它们对于克氏原螯虾血细胞的染色效果.通过改变染色时间、染色温度、分色方式以及分色时间等染色条件,观察、比较不同染色条件下血细胞内的颗粒、细胞核和细胞质的着色情况,以及细胞整体轮廓清晰程度,确定适用于克氏原螯虾血细胞染色的理想染色方法,并建立相应的操作程序.     

一种半氧化苏木素染液的配制方法

一种半氧化苏木素染液的配制方法梁化印郭瑞峰（解放军第二五二医院病理科保定０７１０００）苏木素染液配制方法较多,传统方法有自然氧化和加氧化剂的人工氧化两种。其目的都是将无染色能力的苏木素氧化后,在媒染剂的作用下产生有较强染色能力的三氧化苏木红。但自然氧...     

内耳整块染色石蜡包埋制片法

内耳制片常用的是火棉胶——石蜡双重包埋H-E片染法。此法制片步骤较多,不易掌握。我采用Bouin氏固定液固定,H-E整块染色、石蜡包埋法制片,操作简便,易于成功,内耳的基本结构(前庭膜、盖膜、毛细胞都完好无损,如取材适当,可在同一切片同时显示壶腹嵴。染色液的配制: 1.苏木精染液的配制: 苏木精 25毫克硫酸铝钾 1.25克碘酸钠5毫克蒸馏水 75毫升由于以上药品称量很小,故需称的较准确。配出来的液体若呈现混浊,则是因为以上药品(主要是碘酸钠)称得不准造成的,这种混浊染色液不能用。 2.复制伊红染色液的配制: 将伊红(Y或B均可)0.5克溶于3毫升蒸馏水中,溶解后将冰醋酸—滴—滴加于其中,边滴边搅动,     

室间质控中AB-PAS染色的异常着色原因分析

目的 分析室间质控工作中AB-PAS染色异常着色产生的原因。方法 选取有局部肠上皮化生的完整胃壁组织的连续切片,分别进行PAS和AB单一染色,以及以下3种不同顺序的AB、PAS和Mayer苏木精（Mayer）联合染色：ABPAS-Mayer、PAS-AB-Mayer或PAS-Mayer-AB联合染色。结果 单一PAS染色时,胃黏膜上皮内的中性黏液和化生肠上皮杯状细胞内的混合性黏液均显示玫瑰红色;单一AB染色时,仅化生肠上皮杯状细胞内的混合性黏液显示湖蓝色;AB-PASMayer联合染色时,胃小凹上皮呈玫瑰红色,化生肠上皮呈紫蓝色,差异明显且细胞核着色清晰;PAS-AB-Mayer联合染色时,胃小凹上皮和化生肠上皮内杯状细胞均呈蓝紫色,无法区别,但细胞核着色正常;PAS-Mayer-AB联合染色时,胃小凹上皮和化生肠上皮内杯状细胞均呈蓝紫色,无法区别,而且细胞核着色不佳。结论 行AB和PAS联合染色时必须严格按照先行AB染色后行PAS染色,最后行苏木素Mayer染色的染色步骤,不能将染色顺序随意打乱,否则会出现中性、酸性和混合性黏液物质混染,或者细胞核不着色等异常染色结果,进而干扰病理诊...     

大熊猫人工授精的研究

繁殖大熊猫的目的是圈养种群的自我维持和保持遗传多样性。由于圈养种群中有自然交配能力的雄兽很少 ,人工授精则成为有效的遗传管理的重要手段。本研究的目的是确定单纯人工授精的效率。 1 998年至 2 0 0 0年期间 ,在中国保护大熊猫研究中心 ,对 7只大熊猫进行了人工授精 (每只连续 2d) ,精液通过人工采精方法从 6只不同的雄兽中获得 ,使用鲜精、冷藏精液和冻精多种方法进行人工授精。 6只雄兽的精液平均值是 :采精量 3.3±0 .5ml;精子密度 1 ,42 9.8± 2 35 .4× 1 0 6/ml;活力 81 .7± 2 .1 % ;运动状态 ( 0～ 5 ,5 =最好 )3 1± 0 .1 ;精子正常率 79 3± 9.2 %。对 7只大熊猫进行的 1 4次人工授精中 ,使用的精液体积为 2 4± 0 3ml;活力是 73.5± 2 .9% ;运动状态为 2 .5± 0 .1 ;每次人工授精总活动精子数是 684.2± 1 1 8.2× 1 0 6。 7只大熊猫有 4只受孕 ( 5 7.1 % ) ,共产 5仔。平均孕娠期 1 31 .5±9.7d ,每胎平均 1 .3± 0 .3仔。同时 ,运用自然交配与人工授精相结合的方法 ,进行了 1 8只次实验 ,成功 1 2只次 ,产仔 2 0只 ,繁殖成功率为 66.7%。本研究结果表明 ,人工授精能有效地使不能自然交配的雄性大熊猫参与繁殖 ,提高繁殖率 ,增加圈养大熊猫的遗传多样性。     

胸腹水内异形间皮细胞的鉴别方法研究

在胸腹水脱落细胞学检查中,细胞核直径测量、核浆比值测定以及核仁计数,这三种方法所得实验数据,有助于异形间皮细胞的鉴别。取新鲜胸腹水抗凝标本10ml,以每分钟2000转离心5分钟,将沉淀物制片4张。MGG复合染色(瑞氏染粉1克,姬姆萨染粉0.5克,加入500ml甲醇溶液,置37℃温箱内,每日振摇2～3次,一周后即可使用)待涂片自然干燥后,加上述染液染1分钟,再以等量pH6.8的磷酸盐缓冲液混合复染5～8分钟,核仁计数染3～5分钟,水洗。选择好的染色涂片于光学显微镜配接目测微计进行数据分析。核直径测量法:在涂片上选择适合部位测定细胞核直径,核最大直径与最小直径的平均值为该细胞核直径,每例随机测量50～100个细胞,求出     

介绍一种快速混合的苏木精染液

苏木精(Hematoxylin)系从豆科植物苏木(Caesa lpinia sappan)中用乙醚浸制提炼而成,是一种常用的优良核染料。在苏木精的结构式中(见图1、2),因无双键的醌式结构,无发色团,所以它本身不是染料而必须经氧化成为氧化苏木精时才能染色。这个过程称为“成熟”。使苏木精“成熟”的方法有二:一是在苏木精溶液中加入氧化剂如氧化汞,高锰酸钾,碘酸钠,重铬酸钾等,使苏木精脱氢成为醌,才呈发色团,这个过程较快;二是配制成苏木精原液并暴露于空气中3-6周,使其氧化,这个过程较慢。另外,由于苏木精对组织的亲合力很小,即使成熟后变为氧化苏     

骨骼肌染色改良法

目前对骨骼肌染色常用的是赫特氏(Heidenha in's)铁苏木素染色法,染成的切片不易褪色,对显示骨骼肌的横纹效果显著,但着色有时不均匀,且步骤较复杂。最近我们在探索安氏(Ehrlich's)苏木素应用原理时,发现苏木素与其它化学药品配合使用时,对骨骼肌横纹显示效果较好。     

分化的骨骼肌细胞的不同固定和化学染色方法比较

该文比较了几种不同固定和化学染色方法对分化的骨骼肌细胞的效果及优缺点,并探讨了用化学染色法进行骨骼肌细胞形态学分析的可行性。骨骼肌前体细胞系C2C12经肌分化诱导3天后分别使用4%多聚甲醛(paraformaldehyde,PFA)、甲醇(methanol)、卡诺氏(Carnoy)固定液固定5 min、10 min和15 min,以确定最适固定方法;然后分别用改良苯酚品红(modified phenol fuchsin)、吉姆萨(Giemsa)、苏木精–伊红(hematoxylin-eosin,HE)三种不同的染液进行染色。结果表明,4% PFA固定5 min或10 min较其他方法更好地保持了肌管的形态;对于分化的骨骼肌细胞包括形成肌管的细胞和未形成肌管的细胞,HE染色优于其他几种染色方法,但以上几种方法均不如免疫荧光染色方法。     

对"生物组织中脂肪鉴定"实验的改进

新版全日制普通高中教科书 (试验修订本 )《生物》第 1册中有关“生物组织中脂肪的鉴定”实验 ,采用徒手切片法制作花生种子子叶临时装片 ,用苏丹 染液染色 ,再用 5 0 %酒精液洗去浮色。然后放低高倍镜下观察着色圆形颗粒。但是据一些中学教师反映 ,在实验过程中存在着花生子叶不容易切薄、酒精容易使脂肪滴溶解、实验效果差的问题。而且广大基层中学显微镜缺少或仅有的几台显微镜显像性能较差。进行该实验有困难。为此 ,我们对“脂肪的鉴定”实验进行了改进 ,介绍如下 :1　已知脂肪——植物油的预测取一表面皿或培养皿 ,加入少量清水 ,滴…     

中华稻蝗血细胞染色方法的比较

通过Giemsa、Wright和Giemsa-Wright混合染色3种方法,对中华稻蝗Oxya chinensis(Thunberg)的血细胞进行了染色和血细胞的形态学观察,其结果是Giemsa染液染色时间较长,对细胞核染色效果较好,细胞质界限清晰,但对细胞质中的颗粒染色较差;Wright染液染色时间较短,对细胞核和细...     

龙胆紫希夫氏液显示DNA染色新方法

应用龙胆紫配制成Schiff(希夫氏)试剂,在微波辐射下进行Feulgen染色,结果使正常及良、恶性肿瘤组织细胞核内DNA着紫红色,并能应用真彩色图像仪进行DNA的定量分析.其方法操作简便,便于临床病理诊断应用.现介绍如下.标本的采集:活检手术切取的肿瘤组织100余例,经甲醛固定,石蜡包埋.切片,厚5μm.染液的配制:①8.3%盐酸水溶液(HCl8.3ml、蒸馏水 91.7ml);②龙胆紫(上海试剂站)希夫氏试剂的配制同PAS方法,以龙胆紫代替碱性品红;③亚硫酸氢盐溶液(10%偏重亚硫酸钠溶液5ml、1mol/L-HCl5ml、蒸馏水90ml).染色步骤;①切片脱蜡至水—蒸馏水;②8.3%盐酸水溶液水解切片1min(微波仪5档),蒸馏水洗;③     

血涂片制作的几点体会

制作方法：血涂片Wright’s染色法。①采血、制血膜、水平放置血膜片晾干。②血膜片固定于甲醇2-3min,取出晾干。③用蜡笔在血膜片两端划一染色区,避免染色时染液外溢。④往血膜片滴加瑞氏染液（瑞氏染料0．1g＋甲醇60ml）,数十秒钟后,再加一倍于染液的蒸馏水,染色5-8min。     

川硬皮肿腿蜂染色体制备方法探讨

对川硬皮肿腿蜂Scleroderma sichuanensis Xiao(Hymenoptera:bethylidae Sclerderma)染色体制备方法进行了探讨,结果表明;以川硬皮肿腿蜂雌成虫卵巢为材料,经0.01%秋水仙素水溶液处理10min,蒸馏水低渗5min,用甲醇、冰醋酸(3∶1)固定液固定15min,Giemsa染液染色30min,可以获得形态良好、分散适中、着色清晰的染色体.     

结晶紫溶液鞭毛染色法 郭恒彬

细菌的鞭毛是细菌的一种特殊结构,鞭毛染色常用硷性复红乙醇饱和液或结晶紫乙醇饱和液染色。对后者反复试验未能使鞭毛着色,分析染料的溶解度及配制时各染液混合后出现大量结晶紫沉淀物,考虑染液配制过程中损耗大量媒染剂使鞭毛     

微波辐射取代氧化剂配制苏木素法

传统配制苏木素染液均以火加热,用有剧毒的氧化汞作为氧化剂。常常使液体外溢,氧化程度难以控制,有效使用时间缩短。我们经过多次实验,采用微波辐射代替氧化汞促进氧化苏木素取得了满意的结果,现介绍如下: 染液的配制:甲液:苏木素0.5g,无水酒精5ml;乙液:铵明矾10g,蒸馏水100ml。取乙液经医用微波仪(浙江临安电子器材产品,TWY781型)2档辐射2min,甲液微波5档辐射2min,然后将甲液、乙液混合,4档辐射10～15min,迅速放入冷水中冷却,最后加入2％冰醋酸即可使用。