川硬皮肿腿蜂携带松墨天牛致病菌的研究

[目的]以生物导弹为理念,应用寄生性昆虫携带病原物双重防治松墨天牛Monochamus alternatus是目前研究的新领域,更是松材线虫病Bursaphelenchus xylophilus防治的新途径.[方法]本文以川硬皮肿腿蜂Scleroderma sichuanensis为载体,通过测定4株松墨天牛致病菌的孢子粉和孢子悬浮剂对其毒力大小和川硬皮肿腿蜂对4株菌的2种剂型的初始携带量及存留量,分析不同菌种与不同剂型对川硬皮肿腿蜂的影响和川硬皮肿腿蜂体表孢子脱落趋势.[结果]川硬皮肿腿蜂雌成蜂携带粉剂孢子的死亡率高于携带悬浮剂的,但川硬皮肿腿蜂对粉剂孢子的携带量却远远高于悬浮剂孢子的携带量.当喷施孢子悬浮剂时,川硬皮肿腿蜂的累计死亡率随浓度增加而增加,同样携带量也随浓度增加而增加;白僵菌对川硬皮肿腿蜂的毒力较绿僵菌高,致死速率也较绿僵菌大,但川硬皮肿腿蜂对白僵菌的携带效果却比绿僵菌的效果好.并且不论剂型和菌种,川硬皮肿腿蜂体表的孢子在第1d后都脱落最为明显,而后均保持较缓慢脱落.[结论]本研究证明川硬皮肿腿蜂携带松墨天牛致病菌的方法是可行的,其中白僵菌孢子粉更适合携带.     

三种杀虫剂亚致死浓度对川硬皮肿腿蜂繁殖和搜寻行为的影响

在实验室条件下通过药膜法研究了3种杀虫剂对川硬皮肿腿蜂Sclerodermus sichuanensis Xiao成蜂的毒力和对繁殖的亚致死效应,并采用EthoVision3.1行为仪分析了杀虫剂对其搜寻行为的影响.结果表明,川硬皮肿腿蜂对啶虫脒最敏感,致死中浓度LC50和亚致死浓度LC10分别为7.71和4.46 mg/L,其次为吡虫啉(11.22和6.68 mg/L)和功夫菊酯(27.72和9.36 mg/L).经啶虫脒、吡虫啉和功夫菊酯亚致死浓度(LC10)处理的肿腿蜂,亲代、F1和F2代的寄生成功率均受到抑制;经功夫菊酯处理的肿腿蜂,亲代单蜂产卵量显著增加(P＜0.05);经啶虫脒和吡虫啉肿腿蜂,亲代的出蜂率没有显著影响(P＞0.05),但对F1代影响显著(P＜0.05).经啶虫脒和吡虫啉亚致死浓度(LC10)处理的肿腿蜂搜寻行为变弱.结果表明,功夫菊酯对川硬皮肿腿蜂较安全;啶虫脒和吡虫啉对川硬皮肿腿蜂的繁殖和搜寻行为影响较大.研究结果对评估3种药剂对川硬皮肿腿蜂的安全性,为指导合理用药,协调化学防治和生物防治提供科学依据.     

利用核糖体ITS和3个线粒体基因序列研究几种常见肿腿蜂种类

硬皮肿腿蜂Sclerodermus spp.(Hymenoptera:Bethylidae)寄生低龄天牛幼虫和吉丁类蛀干害虫。本研究利用核糖体ITS序列和3个线粒体基因序列区分8种常见的肿腿蜂。测出8种肿腿蜂的核糖体间隔区ITS1-5.8S-ITS2序列全长2 060 bp。通过对ITS序列分析,根据ITS1序列1 319-1 333 bp位置处"CTTCT"的个数,将管氏肿腿蜂、川硬皮肿腿蜂、白蜡吉丁肿腿蜂、沙蒿吉丁肿腿蜂、苹小吉丁肿腿蜂、松脊吉丁肿腿蜂、落叶松吉丁肿腿蜂,这7种肿腿蜂分成两类,其中,管氏肿腿蜂、川硬皮肿腿蜂、白蜡吉丁肿腿蜂、沙蒿吉丁肿腿蜂为一类,有3个"CTTCT"单元,新发现的苹小吉丁肿腿蜂、松脊吉丁肿腿蜂、落叶松吉丁肿腿蜂为另一类有两个"CTTCT"单元,所以,ITS序列能够将苹小吉丁肿腿蜂、松脊吉丁肿腿蜂和落叶松吉丁肿腿蜂从已知种管氏肿腿蜂、川硬皮肿腿蜂和白蜡吉丁肿腿蜂中区分出来,也为这些新发现的肿腿蜂个体成为新物种提供理论依据;同时分析了8种肿腿蜂线粒体基因cytb,12S和16S 3个基因片段,并结合线粒体基因序列数据和系统发育树。所得的结果表明落叶松吉丁肿腿蜂的所有个体聚在一起形成一个单独的姐妹群,并且在所测的3个基因中落叶松吉丁肿腿蜂都有很高的自检支持率(90%以上)。cytb和12S基因也提供了有力的证明:松脊吉丁肿腿蜂的所有个体聚集为一个单独的类群(自检支持率在90%以上)。这种多个基因综合比较分析的方法,为肿腿蜂科硬皮肿腿蜂属的个体种类鉴定及线粒体基因的进化提供一定的理论依据,但最终肿腿蜂新种的鉴定仍需对其进行形态学鉴定。     

饲料蛋白质含量对黄粉虫生长繁殖及川硬皮肿腿蜂寄生能力的影响

【目的】筛选出适宜川硬皮肿腿蜂Scleroderma sichuanensis Xiao寄生的黄粉虫Tenebrio molitor饲料配方。【方法】用10种不同蛋白质含量的饲料饲喂黄粉虫,并观察各虫态生长繁殖情况,再用川硬皮肿腿蜂接种各配方黄粉虫蛹后置于培养箱中培养,5 d后计数雌蜂产卵量,并通过显著性分析、相关性分析及一元回归分析进行数据处理。【结果】各配方黄粉虫生长繁殖情况正常,指标间存在一定的显著性和相关性且与一元回归分析所得相关性一致。川硬皮肿腿蜂对黄粉虫蛹寄生率没有显著性,为86.25%~96.97%,表现出较高寄生率。寄生产卵量较高且蛋白质含量为14.09%和13.73%配方组显著高于其他配方组。【结论】黄粉虫饲料中蛋白质含量在14%(13.73%~14.09%)时川硬皮肿腿蜂寄生能力最强。     

川硬皮肿腿蜂的复壮技术研究

为了得到大量用作实验室繁殖的川硬皮肿腿蜂种蜂,并提高双条杉天牛的生物防治效果,在室内进行双条杉天牛人工养殖的基础上,开展了川硬皮肿腿蜂复壮技术的研究,并进行室内放蜂试验检验复壮前后川硬皮肿腿蜂的搜索寄生能力差异。结果发现,在双条杉天牛的实验室饲养过程中,发现该天牛各虫态出现的时间均比野外环境下早10天左右。通过对川蜂进行连续三代复壮并进行室内放蜂防治试验,结果表明野外收集的川硬皮肿腿蜂对双条杉天牛的平均搜索率为39.33%,寄生率为37.33%,复壮后的川蜂平均搜索率为38.11%,寄生率为34.4%,两者在对双条杉天牛的搜索寄生能力上没有显著的差异。而黄粉虫繁殖的川蜂平均搜索率为30%,寄生率为24.4%,搜索寄生能力存在明显的退化现象。     

贮藏条件对川硬皮肿腿蜂存活率的影响

在相对湿度为50%~70%的条件下,设置5个温度梯度,将川硬皮肿腿蜂SclerodermasichuanensisXiao雌成蜂分别进行直接贮藏和定期补充15%蜂蜜水后贮藏,并对该蜂在不同条件下的贮藏存活率进行了比较。结果表明,贮藏温度和补充营养对川硬皮肿腿蜂雌成蜂的存活率有显著影响,其中6~15℃下贮藏相同时间的蜂存活率较高,比较适合该蜂的贮藏,而在12℃贮藏相同时间的供试蜂存活率最高,最适该蜂的贮藏。除此之外,在贮藏期间适时添加补充营养也能大大延长川硬皮肿腿蜂雌成蜂的贮藏寿命,但补充营养对该蜂存活率的影响大小与贮藏温度有关。     

寄生经历对川硬皮肿腿蜂寄主搜索行为的影响

研究寄生经历对川硬皮肿腿蜂SclerodmasichuanensisXiao寄主搜索行为的影响的结果表明,在指形管内,有寄生经历的川硬皮肿腿蜂产卵准备时间比无寄生经历蜂短,寄主搜索控制时间更少,寄主搜索控制成功率更高。1～3次经历蜂随着经历次数的增加,产卵准备时间逐渐缩短。无经历、1次、2次、3次经历蜂的产卵准备期分别为:6.3,5.3,4.9,4.6d。但3次经历后,准备时间的变化即不显著。无经历蜂与1次经历蜂、5次经历蜂的搜索控制寄主时间分别为:820,240,30min,对寄主的搜索控制成功率分别为72.97%,100%,100%。寄生经历蜂接蜂3d时卵子发育速率更快,寄生经历蜂与无寄生经历蜂在替代寄主上的产卵量差异不显著。     

用替代寄主繁殖的川硬皮肿腿蜂的学习行为

采用Y型嗅觉仪进行双向选择实验,研究了用替代寄主黄粉虫蛹繁殖的川硬皮肿腿蜂寄主搜索过程中的学习行为。结果表明,川硬皮肿腿蜂羽化期和成虫初期经历松枝皮、松针、松节油、杉枝皮等的挥发物后,雌蜂对这些挥发物的选择性明显提高,但对杉叶挥发物无明显的学习行为。羽化期和成虫初期是否投放新鲜寄主,对雌蜂的气味选择性没有明显的影响。成蜂取食黄粉虫蛹和蜂蜜时均可联系性学习松枝和杉枝气味。取食并经历杉枝和松枝挥发物4天和8天的寄生蜂之间对相应气味的选择性无显著差异。     

川硬皮肿腿蜂在松褐天牛幼虫上的合作繁育行为

【目的】硬皮肿腿蜂Sclerodermus spp.在寄生蜂中独有雌蜂合作繁育的准社会行为。本研究旨在明确该合作繁育行为在非自然寄主天牛上有何表现。【方法】随机选取松褐天牛Monochamus alternatus幼虫(体重范围0.16～0.44 g),个体称体重后分别接1, 2和4头已交配但尚未产卵的川硬皮肿腿蜂S.sichuanensis雌蜂即母蜂,观测母蜂产卵前期和子代发育表现等参数,分析寄主体重(连续自变量)和接蜂数(分类自变量)对这些参数的影响。【结果】对所有观测参数的分析未发现寄主体重与接蜂数这两因素之间存在互作影响,说明这两个因素独立影响观测特征。川硬皮肿腿蜂母蜂产卵前期随寄主体重增大而逐渐延长,但在母蜂数较多的情况下产卵前期缩短:接4头蜂处理下产卵前期比接1和2头处理下的产卵前期分别缩短18.3%和20.6%。按照母蜂平均产子代蜂数量(蜂均产蜂量)计算,接1头蜂处理下的蜂均产蜂量分别是接2和4头蜂处理下的蜂均产蜂量的1.5和3.3倍;蜂均产蜂量不受寄主体重的影响。子代蜂性比(雄蜂占比)在接蜂数较多处理下略有增大,但仍然极端偏雌;性比不受寄主体重的影响。子代卵至成虫存活率在接4头母蜂处理下最低,比接1和2头母蜂处理下分别降低37.4%和30.5%;子代卵至成虫存活率不受寄主体重的影响。子代蜂体型(后足胫节长度)随寄主体重增大而增大,但不受接蜂数的影响。【结论】本研究结果说明,在合作利用体型较大的非自然寄主时,母蜂数量比寄主体型大小对川硬皮肿腿蜂的合作繁育行为产生更大的影响。     

繁育川硬皮肿腿蜂替代寄主的筛选

在室内用直接接蜂和药物麻醉寄主后接蜂的方法,对杉棕天牛Callidium villosulumFairmaire、粗鞘双条杉天牛Semanotus sinoauster Gressitt、苹眼天牛Bacchisa dioica (Fairmaire)、星天牛Anoplophora chinensis (Forster)、玉米螟Ostrinia furnacalis (Guenée)、大螟Sesamia inferens (Walker)、桃蛀螟Dichocrocispunctiferalis Guenée、鞭角华扁叶蜂Chinolyda flagellicornis（Smith）、家蝇Musca domestica vicina Macquart和黄粉甲Tenebrio molitor L. 等10种昆虫作为川硬皮肿腿蜂Scleroderma sichuanensis Xiao繁蜂替代寄主的适合性进行了系统的测试,比较了川硬皮肿腿蜂在不同供试寄主上的寄生率、出蜂率、发育历期、后代的雌性比率、寄生繁殖能力和冷藏对成蜂存活的影响。结果表明,不同寄主及寄主的不同处理间只有寄生率和出蜂率两项指标可能有显著差异,能反映繁蜂寄主的适合性。据此,从10种供试寄主中筛选出黄粉甲和玉米螟两种优良的繁蜂替代寄主,为该蜂的大规模繁殖及应用奠定了基础。     

沙门菌CWDMs脂代谢检测

采用毛地黄皂苷敏感试验和菌细胞胆固醇、甘油三脂及胆碱酯酶定性与定量分析法,检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌经L 型变异后形成的细胞壁缺陷突变株(CW DM )的脂类代谢活性,了解这些CW DM 变异的性质和探讨细菌细胞壁缺陷突变与细菌演变的关系。结果表明,沙门菌CW DM s 具有显著的胆固醇和甘油三脂代谢活性、对毛地黄皂苷高度敏感并且还具有与白色念珠菌相似的胆固醇和甘油三脂的含量,但未能检出胆碱酯酶活性。CW DM s返祖菌丧失了脂类代谢酶类和胞浆膜不含胆固醇,恢复了与其亲代细菌型相似的代谢特征。提示在沙门菌天然即存在有与脂类及胆固醇代谢相关的基因,细胞壁的缺陷导致这些脂类及胆固醇代谢基因活化,以致 CW DM s 能够表达固醇和甘油三脂代谢活性和胞浆膜含有胆固醇     

沙门菌CWDMs乳酸脱氢酶同功酶的观察

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的ＣＷＤＭｓ及其宁代细菌型和伤寒杆菌粗糙型的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同功酶,以了解沙门菌ＣＷＤＭｓ生物氧化的特点和机制,探讨ＣＷＤＭｓ变异的性质。结果表明,伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的细菌型及伤寒杆粗糙型在聚丙烯酰胺凝胶电泳后显示出相同的４种具有不同泳动速率的ＬＤＨ同功酶,但ＣＷＤＭｓ仅显示２种ＬＤＨ。ＣＷＤＭｓ的２种ＬＤＨ同功酶与其亲代细菌型及伤寒杆     

光照对蕨类植物配子体假根向重力性的影响

对８种蕨类植物配子体假根向重力性反应的研究结果表明,除卷柏Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａ ｔａｍａｒｉｓｃｉｎａ Ｓｐｒｉｎｇ配子体假根无向重力性反应并且其生长方向与光照方向无关外,其它７种的配子体假根均有向重力性反应,并且假根的向重力性反应在配子体发育初期,因光照的方向不同而异,表现为负向光性。随着配子体发育至片状体阶段,光对其向重力性反应的影响逐渐减弱,而重力的影响增强。在蕨类植物配子体发育初期,光对     

中国鳐类脑颅的研究

作者解剖观察了33种,隶于4目、7亚目、15科、19属的中国鳐类脑颅的形态。研究结果认为:锯鳐目和鳐目是原始类群,它们均具吻软骨,其中圆犂头鳐科和团扇鳐科是特化类群。电鳐目亦具吻软骨,它们是特化和退化类群。在较高等的鲼目则无吻软骨。依据鳐类不同的分类阶元,其脑颅亦各具有不同的式型。     

沙门菌CWDMs氨基酸代谢的检测

采用氨基氨利用生长试验和谷丙转氨酶（ＧＰＴ）、谷草转酶（ＧＯＴ）、乳酸脱氨酶（ＬＤＨ）、肌酸激酶（ＣＫ）、α－闳丁酸脱氢酶（α－ＨＢＤ）、γ－谷志肽酶（γ－ＧＴ）,酸性磷酸酶（ＡＣＰ）定性与定量分析法,检测伤ＣＷＤＭｓ变异的特点及其机制,探讨ＣＷＤＭｓ变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌ＣＷＤＭｓ变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系。结果表明,沙门菌ＣＷＤＭｓ在仅含蛋氨酸或脯氨     

两种蚤的幼虫形态

关于蚤类幼虫形态的研究,进展比较缓慢,我国王敦清1956年首次描述7种蚤的幼虫形态以后,由柳支英,虞以新(1957),孙昌秀(1965),叶瑞玉(1982,1986),费荣中(1986)等学者先后共描述过约29种蚤的幼虫形态。到目前为止,我国已知蚤类幼虫形态约36种,隶属6科19属。本文描述未见报道的无棘鬃额蚤Frontopsylla aspiniformis Liu etWu(1960)和青海双蚤Amphipsylla qinghaiensis Ren et Ji(1979)两种蚤山幼虫形态。