乙肝免疫标志物与乙肝病毒核酸含量与肝功能的关系研究

目的:研究乙肝免疫标记物(HBV-M)与乙肝病毒脱氧核苷酸(HBV-DNA)载量与肝功能的关系。方法:检测104例乙肝患者HBs Ag、HBe Ag、HBc Ab、HBs Ab、HBe Ab5种HBV-M;用PCR法检测HBV-DNA含量;同时检测天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、胆碱酯酶(CHE)等肝功能指标,对三者关系采用Spearman相关性分析。结果:HBs Ag、HBc Ab、HBe Ag阳性组HBV-DNA阳性率及载量均大于其余组(P0.05);HBe Ag含量、ALT浓度与HBV-DNA载量均呈正相关(r=0.48,P0.05)、(r=0.36,P0.05);AST、CHE与HBV-DNA含量无明显相关性,但在无病毒载量与有病毒载量组之间AST比较有统计学意义(P0.05)。结论:HBV-M、HBV-DNA与肝功能之间有一定的相关性,但HBe Ag阴转不代表病毒复制停止,HBV-DNA也不能完全反应肝损害程度,临床应加大重视。     

乙肝患者HBsAg定量与乙肝病毒DNA定量及谷丙转氨酶水平的相关性研究

目的:探讨乙型肝炎患者血清中乙肝表面抗原(HBs Ag)定量与乙肝病毒(HBV)DNA定量及谷丙转氨酶(ALT)水平的相关性。方法:收集124例乙肝患者血清,采用化学发光法检测HBs Ag水平,采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA水平,采用全自动生化分析仪检测ALT水平,分析三者之间的相关性。结果:HBs Ag水平与HBV-DNA含量存在正相关性,HBV-DNA含量与ALT水平存在正相关性,而HBs Ag水平与ALT水平无明显相关性。结论:联合检测3项指标可对乙肝患者HBV感染、复制、传染性以及机体的免疫性做出准确判断。     

复方鳖甲软肝片联合阿德福韦酯对乙肝肝硬化患者肝功能和乙肝血清标 志物水平的影响

目的:探讨复方鳖甲软肝片联合阿德福韦酯对乙肝肝硬化患者肝功能和乙肝血清标志物水平的影响。方法:选择我院进行治疗的乙肝肝硬化患者60例,随机分为实验组与对照组,每组30例。对照组患者给予阿德福韦酯治疗,实验组患者在对照组基础上给予复方鳖甲软肝片治疗。比较治疗前后两组患者血浆白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清总胆红素(TBIL)及凝血酶源时间(PT)水平、不良反应、HBe Ag转阴率、HBV-DNA转阴率及HBe Ag血清转化率。结果:与治疗前相比,两组患者治疗后的血清ALB水平均升高,血清ALT、TBIL及PT水平均降低(P0.05);与对照组相比,实验组患者的血清ALB水平、HBe Ag转阴率、HBV-DNA转阴率及HBe Ag血清转化率较高,血清ALT、TBIL、PT水平、不良反应发生率较低(P0.05)。结论:复方鳖甲软肝片联合阿德福韦酯较单用阿德福韦酯可更有效改善乙肝肝硬化患者的肝功能,并抑制病毒的复制,且安全性较高。     

乙肝病毒血清学标志物与血清HBV-DNA检测结果分析

目的探讨乙肝病毒血清学标志物常见检出模式与血清HBV-DNA的关系。方法用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法定量检测血清HBV-DNA,与乙肝病毒血清学标志物常见检出模式进行比较分析。结果在HBe Ag阳性、HBe Ab阴性模式中,HBV-DNA阳性率为96.63%,其中HBV-DNA拷贝数5.0×107/ml占67.34%。在HBe Ag阴性、HBe Ab阳性模式中,HBV-DNA阳性率为45.23%,其中HBV-DNA拷贝数5.0×107/ml占8.45%。在HBe Ag及HBe Ab均阴性模式中,HBV-DNA阳性率为62.79%,其中HBV-DNA拷贝数5.0×107/ml占15.12%。结论乙肝病毒血清学标志物检测尚不能完全反映病毒复制情况,不管何种检出模式,建议最好结合血清HBV-DNA检测作临床分析和判断。     

抗结核药物易导致乙肝伴肺结核患者肝功能损伤

为了分析抗结核药物对乙肝伴肺结核患者肝功能的影响,本研究选取了2015年2月至2017年2月在我院治疗的乙肝病毒标记物阳性伴肺结核患者87例(观察组),同时选取乙肝病毒标记物阴性伴肺结核患者90例作为对照组,均给予2HREZ/4HR抗结核等治疗。通过观察两组治疗后肝损害发生以及肝功指标变化,本研究发现观察组治疗后丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)和总胆红素(TBil)分别为(240.06±30.44)U/L、(180.04±32.24)U/L和(51.14±6.50)mol/L,明显高于对照组(p0.05);观察组肝功能损害发生率为66.67%,明显高于对照组(p0.05);观察组中,仅HBs Ag阳性者肝功能损害发生率为26.32%,明显低于HBs Ag+HBc Ab、HBs Ag+Hbc Ab+HBe Ab和HBs Ag+Hbc Ab+Hbe Ag患者(p0.05);HBs Ag+Hbc Ab阳性者肝功能损害发生率为61.90%,明显低于HBs Ag+Hbc Ab+Hbe Ag患者(p0.05)。本研究表明,抗结核药物易导致乙肝伴肺结核患者肝功能损伤,且不同乙肝感染类型患者肝损害发生有所差异,在抗结核治疗中应注意对患者肝功能的保护。本研究为乙肝伴肺结核患者的临床药物治疗提供了一定的帮助。     

乙肝患者血清的HBV-DNA含量与ALT水平的关系研究

目的:探讨和研究乙型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV)DNA复制水平与丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的关系,为临床中乙肝患者的诊治提供参考。方法:对240例慢性乙型肝炎患者采用荧光标记定量PCR方法测定血清HBV-DNA含量,采用全自动生化分析仪测定血清ALT水平,比较和分析HBV-DNA含量与ALT水平之间的关系。结果:慢性乙肝轻、中、重度患者的HBV-DNA含量三组之间差异有统计学意义(p0.01),肝脏的损害程度与HBV-DNA含量之间具有一定的关联,等级相关系数为0.162(P=0.012);ALT水平也与HBV-DNA载量之间存在关联,等级相关系数为0.371(P0.0001)。结论:肝损伤程度与HBV-DNA含量有显著相关性;同时血清ALT水平与HBV-DNA含量呈正相关。检测血清中的HBV-DNA含量和ALT水平为指导乙肝患者HBV感染、复制、传染性的判断、治疗方案的选择和疗效评定提供有一定的依据。     

恩替卡韦治疗对HBeAg阳性乙肝患者血清和肝组织中HBV cccDNA的影响

目的探讨口服恩替卡韦治疗HBe Ag阳性乙肝患者1年对血清和肝组织中HBV cccDNA含量的影响。方法选取90例HBe Ag阳性乙肝患者,所有患者连续48周口服恩替卡韦0.5 mg/d,治疗前后分别静脉取血分离血清。采用化学发光法检测HBV血清标志物、采用荧光实时定量PCR法检测HBV-DNA及HBV cccDNA含量,并对各指标进行统计学分析。选取治疗48周后血清HBV cccDNA阴性且符合肝穿的患者进行肝穿检查,检测肝组织中HBV cccDNA含量。结果 (1)治疗后,血清HBV-DNA、HBV cccDNA及谷丙转氨酶(ALT)水平均显著下降(P0.01)。(2)发生e抗原转换组的HBV DNA和HBV cccDNA水平下降均比未发生转换组更显著(P0.01)。(3)90例患者在治疗1年后有68例患者血清中HBV cccDNA转阴,而在这其中选取8例患者进行肝穿,只有1例患者的肝组织中HBV cccDNA转阴。结论尽管恩替卡韦可明显降低乙肝患者血清和肝组织的HBV cccDNA水平,然而恩替卡韦治疗1年尚不能彻底清除肝细胞中的HBV。     

乙肝患者肝组织乙型肝炎病毒cccDNA和血清MIF表达的相关性研究

目的:探讨乙肝患者肝组织乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)和血清巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)的表达相关性。方法:选择2016年2月到2016年7月在我院诊治的乙肝患者144例作为乙肝组,同期选择体格检查健康者144例作为对照组,采集所有入选者的血清样本,检测血清MIF、谷丙转氨酶(Glutamic pyruvic transaminase,ALT)、谷草转氨酶(Glutamic pyruvic aminotransferase,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)的表达,并对乙肝组患者肝组织HBV cccDNA采用荧光定量PCR技术检测表达分析,直线相关分析乙肝组的血清HBV cccDNA表达量与血清ALT、TBi L、AST、MIF含量相关性。结果:乙肝组的血清MIF、ALT、TBi L、AST含量均明显高于对照组(P0.05)。乙肝组的肝组织HBV cccDNA阳性率为54.17%(78/144)。直线相关分析显示乙肝组的肝组织HBV cccDNA表达量与血清ALT、TBi L、AST、MIF含量均呈现明显正相关性(P0.05)。结论:乙肝患者体内血清MIF水平明显升高,伴肝组织HBV cccDNA的表达也升高,两者存在明显的正相关性。因此检测血清MIF水平有助于评估乙肝患者HBV的感染情况。     

肝硬化患者外周血IL-8,IL-8 mRNA表达及其与血清ALT、AST水平相关性

目的 探讨肝硬化患者血清IL-8含量及外周血单个核细胞(PBMCs)中IL-8 mRNA表达,及其与ALT、AST相关性.方法 以ELISA法检测血清IL-8含量,定量PCR检测65例肝硬化患者(代偿期36例,失代偿期29例)外周血IL-8 mRNA水平,设GAPDH为参照,以logcDNA/logGAPDH比值代表其最终mRNA水平.结果 肝硬化患者外周血IL-8及其mRNA表达量分别为(448.41±59.46)pg/mL、(1.4850±0.1801)logcDNA/logGAPDH,较正常组显著增高,差异有统计学意义(P＜0.01).其中,ALT异常组IL-8及其mRNA表达量分别为(465.73±48.88)pg/mL、(1.5207±0.1684)logcDNA/logGAPDH,与ALT正常组相比,差异有统计学意义(P＜0.01).AST异常组IL-8及其mRNA表达量分别为(467.39±48.48)pg/mL、(1.5419±0.1650)logcDNA/logGAPDH,与AST正常组相比,差异有统计学意义(P＜0.01).肝硬化外周血IL-8及其mRNA与ALT(r =0.764,r =0.612,P＜0.01)及AST(r =0.711,r=0.579,P＜0.01)显著相关.结论 肝硬化外周血IL-8及其mRNA表达升高,并与血清ALT、AST水平密切相关,提示IL-8可能参与了肝硬化的致炎分子病理过程,似可作为反映肝脏炎症变化的新型辅助指标.     

恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α-2b治疗HBeAg阳性乙肝的临床研究

目的:探讨恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α-2b治疗乙型肝炎E抗原(HBeAg)阳性乙肝的临床疗效、安全性及对相关标志物的影响。方法:选取2015年10月至2017年10月我院收治的97例HBeAg阳性乙肝患者,采用随机数字表法将其分为对照组48例和观察组49例。对照组患者采用单纯皮下注射聚乙二醇干扰素α-2b注射剂治疗,观察组采用恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α-2b治疗。比较两组患者治疗后的临床疗效、谷草转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乙肝病毒的脱氧核糖核酸(HBV-DNA)含量以及ALT复常率、HBeAg血清转换率、HBV-DNA转阴率及不良反应发生率。结果:观察组总治疗有效率为91.84%,明显高于对照组的77.55%(P0.05);治疗后,观察组的ALT、AST、HBV-DNA含量明显低于对照组(P0.05),观察组的ALT复常率、HBeAg血清学转换率、HBV-DNA转阴率明显高于对照组(P0.05);观察组治疗期间不良反应发生率为30.61%,与对照组的29.17%比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α-2b治疗HBeAg阳性乙肝较单用干扰素的抗病毒治疗疗效更高,可降低传染性,用药安全性较好。     

HBV Pre-S1与DNA及其他血清学标志物的相关性研究

目的研究乙型肝炎病毒血清前S1抗原、HBV-DNA与其他乙型肝炎血清标志物HBs-Ag、HBeAg的相关性。方法采用实时聚合酶链反应(Real-Time PCR)技术检测血清中HBV-DNA的含量,用酶联免疫法(ELISA)检测PreS1Ag、HBsAg和HBeAg。采用SPSS 13.0统计软件进行分析,成组设计资料,率比较采用配对的χ2检验,结果的关联性采用独立性的χ2检验。结果以HBV-DNA1.000E+03Copy/ml为阴性组;HBV-DNA≥1.000E+03Copy/ml为阳性组。600例HBsAg阳性的乙型肝炎患者中241例HBV-DNA阳性,283例Pre-S1阳性。其中241例HBV-DNA阳性患者中,Pre-S1阳性222例,阳性率为92.12%。显著高于HBV-DNA阴性组的Pre-S1阳性率(16.99%)。经配对的差异性检验P=0.000(确切概率)。经独立性检验,χ2=326.573,P=0.000。241例HBsAg、HBV-DNA阳性组,HBeAg阳性191例,Pre-S1阳性222例,其中191例HBeAg阳性患者中,Pre-S1Ag阳性185例,阳性率为96.86%。显著高于HBeAg阴性组的Pre-S1Ag阳性率(61.67%)。经配对的差异性检验P=0.000(确切概率)。经独立性检验,χ2=28.511,P=0.000。结论 Pre-S1Ag与HBV-DNA阳性高度相关,有好的一致性和互补性,较HBeAg更敏感。可作为乙肝病毒存在和复制的可靠标志,是反映HBV是否具有传染性的观察指标。     

zVAD-fmk对未成熟树突状细胞诱导初始性CD4＋T细胞分化为调节性T细胞影响的体外研究

目的 研究 Caspase 通路在未成熟树突状细胞（imDC）诱导同种异体 CD4＋ T 细胞转化为调节性 T 细胞（Treg）中的作用及探讨免疫耐受机制建立可能的分子机制.方法 将人外周血分离、培养出的imDC 与健康胎儿脐血中分离CD4＋ T 细胞混合培养,同时加入zVAD-fmk,以流式细胞仪检测CD4＋CD25＋ T 细胞（Treg 细胞）转化率.结果 （1）imDC 的鉴定：外周血经诱导后分离的imDC,以流式细胞仪检测细胞表面分子,imDC 表面分子表达的结果：CD80（7.27 ± 0.13）、CD83（3.53 ± 0.35）、CD1a（4.29 ± 0.27）;（2）混合培养后CD4＋CD25＋T细胞的转化率结果为：空白组（1.78 ± 0.11）﹪、对照组（22.23 ± 0.77）﹪、低浓度zVAD-fmk 组（21.63 ± 0.82）﹪、中浓度zVAD-fmk 组（12.24 ± 0.54）﹪、高浓度zVAD-fmk 组（12.20 ± 0.96）﹪,结果对照组和低浓度组、中浓度组和高浓度组间比较,P 〉 0.05,其余各组间比较,P 〈 0.05.加入zVAD-fmk 并与imDC 细胞混合培养的T 细胞转化率相对于未加入阻断剂的T 细胞较低,同时Caspase 信号通路对zVAD-fmk 无浓度依赖性.结论 imDC 可以诱导同种异体初始性CD4＋ T 细胞分化为Treg.Caspase 信号通路特异性的阻断剂zVAD-fmk 可以部分抑制Treg 的转化,说明Caspase 信号通路在诱导免疫耐受中可能起了较为重要的作用.     

纯化自体外周血CD34^＋细胞移植治疗肢体重度缺血的中期疗效

目的探讨纯化CD34^＋细胞移植治疗肢体重度缺血的中期疗效。方法自2009年5月至2011年12月录入30例肢体重度缺血患者,男性29例,女性1例,平均年龄43 ± 12岁（23 - 75岁）,均不具备外科血管重建条件,共治疗31条下肢和4条上肢。G-CSF（5-10μg/kg）动员,第5天采集外周血单个核细胞,分选获得纯化CD34^＋细胞,肢体肌肉局部注射。根据移植细胞数分为3组：低剂量组（105/kg）、中剂量组（5 × 105/kg）和高剂量组（106/kg）。结果随访16 - 48个月,1个月和2个月时Wong-Baker FACES疼痛评分由术前7 ± 2降到3 ± 3（P〈 0.001）和1 ± 2（P〈 0.001）。术后3个月和6个月：最长无痛步行时间由术前的（5 ± 3）min分别延长至（12 ± 6）min（P〈 0.001）和（19 ± 5）min（P〈 0.001）;踝肱指数由术前的0.44 ± 0.20提高至0.62 ± 0.18（P= 0.04）和0.66 ± 0.14（P〈 0.001）;经皮氧分压由术前（26 ± 11）mmHg分别上升至（42 ± 11）mmHg（P 〈 0.001）和（56 ± 12）mmHg（P〈 0.001）。16例溃疡患者愈合11例。Kaplan Meier生存分析法计算16个月保肢率为84﹪（95﹪可信区间为0.63 - 0.94）。3个不同剂量组之间的比较,治疗效果差异无统计学意义,除了1个月时WFPRSC检测结果显示：高剂量组明显优于低、中剂量组。结论纯化自体外周血CD34^＋细胞移植治疗肢体重度缺血性疾病安全、可行,能够较为持久地缓解缺血,挽救肢体,改善患者生活质量。     

不同临床类型乙型病毒感染者外周血T细胞亚群与血清HBVDNA载量及HBeAg滴度相关性分析

目的：探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者外周血T细胞亚群与血清HBVDNA载量及HbeAg滴度的关系。方法：选取103名HBV感染患者和20名健康者为研究对象。流式细胞术检测外周血T细胞亚群,聚合酶链式反应及酶免疫分析法分别检测血清HBVDNA载量及HbeAg滴度。结果：慢性乙型肝炎患者和慢性HBV携带者外周血CD3可、CD4T淋巴细胞亚群百分数低于健康对照组,结果有统计学意义（P〈0．05或0．01;而CD8＋T细胞亚群则呈现相反趋势,结果亦有统计学意义（P〈0．05或0．01）。HBeAg阴性组中,HBVDNA水平与CD8T细胞亚群百分数呈正相关（r=0．567,P〈0．01）,与CD47CD8＋T细胞亚群百分数比值呈负相关（r=-0．601,P〈0．01）,而与CD3＋T、CD4＋T细胞亚群百分数无相关性。HBeAg阳性组中,HBVDNA水平及HbeAg滴度与cD3＋1r、cD41、CD8叮细胞百分数及CD47CD8＋T细胞百分数均无相关性（P〉0．05）。结论：不同临床类型的慢性乙型肝炎病毒感染患者外周血T细胞亚群存在不同程度细胞免疫功能降低和细胞免疫调节异常。HbeAg阴性的HBV感染患者,其血清HBVDNA水平与外周血T淋巴细胞免疫存在相关性。     

自体CIK细胞治疗21例中晚期恶性实体瘤的肿瘤标志物变化观察

目的观察自体细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）过继免疫疗法治疗中晚期恶性实体肿瘤的临床疗效及肿瘤标志物变化,初步对该疗法作出评价。方法取中晚期恶性实体肿瘤患者自体外周血50ml,根据文献报道方法体外诱导扩增CIK细胞。培养约14d后,一次性回输入患者体内,观察患者CIK细胞回输前2周及回输后4周左右外周血免疫指标变化、肿瘤标志物变化、生活质量及Karnofsky评分变化,随访1年观察1年生存率。采用t检验及寿命表法进行统计分析。结果在21例接受CIK回输治疗的患者中,治疗前出现有代表意义的肿瘤标志物异常升高的患者有14例,1次回输后有8名患者出现肿瘤标志物下降,其中1名患者降至正常范围;免疫指标在CIK细胞回输后4周较回输前2周均无有统计学意义,其中CD3由70.81﹪±10.52﹪升至71.91﹪±11.09﹪,t=0.762,P=0.455;CD4由39.06﹪±11.03﹪升至39.21﹪±8.74﹪,t=0.093,P=0.927;CD8由28.75﹪±8.22﹪升至29.88﹪±10.13﹪,t=0.895,P=0.382;CD16^＋CD56^＋（即NK细胞）由15.73﹪±9.52﹪升至15.37﹪±6.66﹪,t=-0.173,P=0.865;EORTCQLQ-C30（vertion3.0）评分中总体健康状况（globalhealth）由（41.67±17.28）分上升至（46.43±17.19）分,P=0.076;以上各指标治疗前后差异均无统计学意义。但功能子量表中的躯体功能（physicalfunctioning）单项[由（62.94±17.48）分上升至（66.67±17.37）分,P=0.012]和症状子量表中的疲倦（fatigue）[由（51.33±20.03）分下降至（43.38±16.81）分,P=0.012]、疼痛（pain）[由44.44﹪±19.24﹪下降至（36.51±14.55）分,P=0.038]及食欲丧失（appetiteloss）[由（52.38±19.92）分下降至（38.09±21.82）分,P=0.016]单项差异均有统计学意义（P〈0.05）;卡氏评分由[（61.42±3.59）分上升至（62.38±4.36）分,t=1.000,P〉0.05];随访1年内有3名患者死亡,生存率约85.7﹪。结论自体CIK细胞回输治疗后肿瘤标志物有明显改变,同时对缓解晚期恶?     

聚乙二醇干扰素α-2a对慢性乙型肝炎患者树突状细胞B7-H1表达的影响

目的：观察聚乙二醇干扰素α-2a对慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞功能及B7-H1的影响,探讨慢性乙型肝炎病毒逃逸的的机制。方法：慢性乙型肝炎患者31例,给予聚乙二醇干扰素α-2a180txg抗病毒治疗52周,分别于0、12、26、52周检测肝功能、HBV-DNA;流式细胞术检测外周血mDC表面HLA-DR、CD80、CD86、CD83、CDla、B7一H1水平。根据患者HBV—DNA水平,将患者分为应答组（A组）、非应答组（B组）,10例健康志愿者作正常对照组（C组）。结果：慢性乙肝患者的树突状细胞膜表面分子HLA-DR、CD80、CD86、CD83、CDla的表达均降低。聚乙二醇干扰素α-2a治疗后应答组膜表面分子HLA-DR、CD80、CD86、CD83、cDla的表达高于非应答组65．3±6．2％VS44．2±5．5％,67．2±7．4％VS37.3±7．2％,68．4±3．6％VS42．5±7．3％,65．6±6．8％VS43．2±3．9％,49．4±9．5％VS37．5±7．9％,（P〈0．05）。应答组B7-H1表达水平较治疗前下降,非应答组B7-H1水平无明显变化12．73±3．8％VS25．24±2．92％,（P〈0．05）。结论：慢性乙型肝炎患者树突状细胞功能低下,聚乙二醇干扰素α-2a治疗可以提高树突状细胞功能,降低B7-H1表达,促进HBV-DNA的清除。树突状细胞功能低下及B7-H1高表达是乙型肝炎病毒免疫逃逸的因素之一。     

滤泡辅助性T细胞在特发性血小板减少性紫癜患者的变化及其意义

目的：研究滤泡辅助性T细胞（T follicular helper cells,Tfh）在免疫性血小板减少性紫癜（immune thrombocytopenic purpura,ITP）患者的表达并探讨其临床意义。方法：用流式细胞术检测20例健康人、25例ITP患者外周血CXCR5＋CD4＋T细胞占CD4＋T细胞的比例。结果：与健康对照组相比,ITP患者外周血CXCR5＋CD4＋T细胞占CD4＋T细胞的比例显著增高（P〈0.05）。结论：Tfh在ITP患者外周血比例增高,为Tfh能否为ITP的免疫调节和干预提出新的方向提供了证据。     

北京地区实验恒河猴外周血T淋巴细胞亚群分析

目的测定正常实验恒河猴外周血T淋巴细胞亚群,获取基础数值。方法使用BD FACS Calibur流式细胞仪,Cell QuestTM3.3分析软件,应用CD3-Percp、CD4-FITC、CD8-PE荧光标记的抗体,对北京地区84只实验恒河猴的外周血T淋巴细胞亚群进行统计分析。结果北京地区实验恒河猴外周血CD3＋,CD4＋T淋巴细胞占淋巴细胞（LYM）的百分比为32.82%±5.93%;CD3^＋CD8^＋T淋巴细胞占淋巴细胞百分比为（23.99±6.34）%;CD4^＋/CD8^＋的比值为1.45±0.41;LYM百分比为白细胞的（49.70±14.00）%;LYMF为（4.634±2.181）×106/mL。结论实验用恒河猴T淋巴细胞亚群的基础数值测定为相关比较医学研究奠定基础。     

siRNA沉默t-bet基因对CD4、CD8T淋巴细胞亚群IFN-γ产生的影响

利用化学合成针对人t-bet基因的小干扰RNA（siRNA）,转染体外培养的人外周血单个核细胞,利用流式细胞仪分选纯化CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞,半定量RT-PCR检测CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞中t-betmRNA的表达变化,流式细胞术检测转染前后IFN-γ产生的变化情况。探讨转录因子t-bet对人CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞亚群IFN-γ产生的调控作用。与对照组相比,转染后的人CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞t-betmRNA表达水平明显下降;转染siRNA后,CD4＋T淋巴细胞中IFN-γ＋细胞比例为（18.46±6.86）%,与对照组（50.20±5.91）%比较有显著性差异（P〈0.01）;CD8＋T淋巴细胞IFN-γ＋细胞比例为（74.18±9.33）%,和对照组（76.51±6.49）%比较差异不明显（P〉0.05）。体外转录合成的siRNA可有效降低人CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞t-bet的基因表达;转录因子t-bet对人不同淋巴细胞亚群IFN-γ的产生所起作用不同。     

循环DNA和HBV—DNA载量与原发性肝癌的相关性探讨

目的：探讨血浆DNA和HBV—DNA载量在病毒性肝炎肝硬化后原发性肝癌（PHC）的诊断价值。方法：用RT—PCR方法随访检测HBsAg阳性且经彩色B超诊断为肝硬化的患者,每6个月检测一次患者的血液循环DNA和HBV-DNA载量,直到经临床症状、彩色B超、CT诊断为原发性肝癌为止。结果：在PHC中,循环DNA61．3±31．9ng／ml,健康对照组20．3±9．9ng／ml,两组差异显著（P〈0．01）;而HBV—DNA载量,在PHC确诊时多数处于较低水平,78％≤105copies／ml,与PHC确诊前有明显差异（P〈0．01）。PHC未发生淋巴结转移者循环DNA51．2±17．9ng／ml,淋巴结转移者循环DNA73．9±23．7ng／ml,两者存在差异（P〈0．05）;而HBV-DNA载量有无淋巴结转移无明显差异。结论：联合检测血液循环DNA和HBV—DNA载量对PHC的预测、预后价值明显,且方法简单,易于开展。