记忆增强肽促进大鼠海马内CREB磷酸化

五肽ＺＮＣ（ＣＰＲ（ｐＢＧｌｕ－Ａｓｎ－Ｃｙｔ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－ＯＨ）是精氨酸加压素（ＡＶＰ）在脑内的天然酶解产物,具有促进学习记忆的中枢效应。为了进一步阐明其作用的分子机制,以整体大鼠海马及离体大鼠海马切片为对象,研究了ＺＮＣ（Ｃ）ＰＲ对ｃＡＭＰ反应元件结合蛋白（ＣＲＥＢ）磷酸化的作用。发现ＺＮＣ（Ｃ）ＰＲ及其类似物ＮＬＰＲ能诱导大鼠海马内ＣＲＥＢ磷酸２化,该作用能被其拮抗剂ＺＤＣ（Ｃ）ＰＲ、Ｇ     

大麦幼苗多胺合成比脯氨酸合成对盐胁迫更敏感

NaCl 2 0 0mmol/L处理结合14 C Glu叶面饲喂 6天龄大麦幼苗 ,结果证明盐胁迫下Pro主要积累在叶片中 ,在根系中PA的积累占优势。PA合成途径对盐胁迫的响应早于Pro。盐处理 8h以后PA与Pro的合成竞争共同前体Arg。盐胁迫激活了Pro两条合成途径 ,胁迫 8h以前Pro积累主要受Glu途径控制 ,随后Orn途径对Pro积累的贡献占主导地位。盐胁迫促进了PA合成的Arg途径 ,对Orn途径没有影响     

百草枯和苯甲酸钠对渗透胁迫下抗旱性不同玉米品种愈伤组织的影响

两个品种玉米愈伤组织经０．５和５ｍｍｏｌ／Ｌ的百草枯处理３ｈ后,在渗透胁迫下处理２４ｈ电解质泄漏率增加;Ｈ２Ｏ２和ＭＤＡ积累;ＡｓＡ和ＣＡＲ含量的减少加剧。０．５和５ｍｍｏｌ／Ｌ的苯甲酸钠减轻渗透胁迫诱导的氧化伤害,促进ＣＡＴ活性的增加;使ＳＯＤ、ＧＲ、ＡＰ和ＰＯＤ能维持较高的活性;ＡｓＡ和ＣＡＲ含量降低的幅度减小。     

从织锦芋螺中克隆α芋螺毒素序列

为了从我国南海产织锦芋螺（Ｃｏｎｕｓｔｅｘｔｉｌｅ）中分离新的毒素序列并研究其应用价值,进行了织锦芋螺毒素基因的分离工作．从织锦芋螺毒管中提取ｍＲＮＡ,以Ａ族芋螺毒素的信号肽编码部分和３′端非翻译部分的保守序列为引物,通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增和序列分析方法获得新的芋螺毒素序列．结果得到两种不同的α芋螺毒素序列,两者都属于α４／７亚型芋螺毒素,预测其成熟肽序列分别为Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－Ｃｙｓ－Ａｓｎ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｌｅｕ－Ｃｙｓ－Ｇｌｙ（Ｃ端Ｇｌｙ可能被酰胺化）和Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ａｌａ－Ｃｙｓ－Ａｓｎ－Ｖａｌ－Ａｓｐ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｉｌｅ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ．采用传统的生化分离手段尚未从织锦芋螺中获得过α芋螺毒素序列,这两种α芋螺毒素作用的种属特异性、受体类型特异性和在小细胞肺癌的诊断和治疗中的应用价值有待进一步研究     

NaCl对大麦幼苗根系蛋白质和游离氨基酸含量的影响

大麦幼苗在２００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ处理６ｄ过程中,根中蛋白水麦活性下降,可溶性蛋白含量在处理１、２、４ｄ下降,６ｄ时有所提高。多数游离氨基酸相对含量及其总量呈上升势,胁迫１、２、６ｄ时,总量较对照分别上升６４．２０％、５６．６９％和１．６９％,其中Ｐｒｏ、Ｇｌｕ、Ａｌａ和Ｔｈｒ较为突出,盐胁迫下根系质膜和液泡膜结合慢白含量上升。可溶性蛋经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和扫描分析,在盐胁迫１、２、６ｄ中２５     

盐胁迫激活大麦幼苗脯氨酸合成的鸟氨酸途径

２００mmol/L NaCl处理结合^14C-Ｇlu和^14C-Arg叶面饲喂６d龄大麦（Ｈordeum vulgareL.)幼苗,结果证明６d龄大麦幼苗体内普遍存在Ａrg（谷氨酸）→Ｏｍ（鸟氨酸）→Ｐro(脯氨酸）途径。直 迫明显激活了Ａrg→Ｏｍ→Ｐro途径,胁迫处理７d,大麦幼苗叶片和根系中该途径对Pro含量上升的贡献是Glu→Pro途径的１．０－１．５倍。而盐的“鉴４”品种Ａrg→Ｏｍ→Ｐro途径对Pro含量上升的贡献是对盐敏感的“科品７号”的１．７－２．０倍,结果表明盐胁迫下Ａrg→Ｏｍ→Ｐro途径的激活对大麦幼苗耐盐性的提高具有重要意义。     

一组丝瓜籽小分子核糖体失活蛋白LuffinS的分离、纯化和性质

通过硫酸铵分级沉淀、ＣＭ－５２阳离子交换层析、ＨＲＬＣ分子排阻层析及ＦＰＬＣＭｏｎｏＳ离子交换层析等步骤,从丝瓜籽中分离到一组分子量为８ｋＤ左右的小分子核糖体失活蛋白——ＬｕｆｉｎＳ１、ＬｕｆｉｎＳ２、ＬｕｆｉｎＳ３。末端分析结果表明,它们的Ｎ端氨基酸分别为Ａｌａ、Ｐｒｏ和Ｔｈｒ。氨基酸序列分析确定了ＬｕｆｉｎＳ２的Ｎ端９个氨基酸的序列是Ｐｒｏ－Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ｇｌｎ－Ｇｌｕ－Ａｌａ－Ｐｈｅ－Ａｓｐ。ＬｕｆｉｎＳｓ对核糖体的失活机制与天花粉蛋白（ＴＣＳ）一致,是ＲＮＡＮ－糖苷酶催化型的。它们对无细胞蛋白质生物合成的抑制活性较ＴＣＳ略强,ＩＣ５０分别为１．３×１０－１１、１．０×１０－１０和６．３×１０－１１ｍｏｌ／Ｌ左右。因此ＬｕｆｉｎＳｓ有可能开发成免疫毒素的高效“弹头”。     

2,4—D和乙烯利对玉米幼苗抗旱性效应的研究

水分胁迫下,２０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和４００ｍｇ／Ｌ乙烯利（ＣＥＰＡ）分别不同程度地降低和提高玉米幼叶生长部位的相对含水量（ＲＷＣ）、水势（ψｗ）和渗透调节能力（ＯＡ）。胁迫后期,玉米幼叶中脯氨酸含量（Ｐｒｏ）为：ＣＥＰＡ〉对照（ＣＫｓ）〉２,４－Ｄ。随胁迫宾进行,２,４－Ｄ处理幼叶的膜相对透性（ＲＰ）始终处于较高水平且增长幅度较大,叶片延伸生长速率（ＬＥＲ）对ＲＰ的变化较为敏感;而ＣＥＰＡ处理则与     

多胺对水稻CMS系及其保持系幼穗蛋白质、核酸和活性氧代谢的影响

用ＤＡｒｇ＋ ＭＧＢＧ 处理保持系, 降低花粉可育度, 并使其幼穗中蛋白质、ＤＮＡ 和ＲＮＡ含量以及蛋白酶、ＲＮＡ 酶和ＤＮＡ 酶活性下降,使Ｏ－·２ 生成速率和ＭＤＡ 含量上升。Ｐｕｔ＋ Ｓｐｄ ＋ Ｓｐｍ 可消除或部分消除ＤＡｒｇ ＋ＭＧＢＧ的上述效应（ 对酶活性的影响除外） 。ＤＡｒｇ ＋ ＭＧＢＧ 也使ＰＯＤ、ＳＯＤ 和ＣＡＴ活性上升, 但是,多胺只能降低抑制剂对ＰＯＤ 的刺激作用。用Ｐｕｔ＋ Ｓｐｄ ＋ Ｓｐｍ 处理不育系, 使花粉可育度轻度提高, 并使其幼穗蛋白质、ＤＮＡ和ＲＮＡ 含量略有上升,使蛋白酶、ＤＮＡ酶和ＲＮＡ 酶活性、Ｏ－·２ 生成速率、ＭＤＡ 含量、ＳＯＤ 和ＣＡＴ活性下降, 使ＰＯＤ 活性上升     

白细胞介素—2分子α螺旋B中的活性相关区域

根据人白细胞介素－２（ＩＬ－２）α螺旋Ｂ中氨基酸残基的空间分布选择性地突变了一些氨基酸残基,结果发现：５７Ｇｌｎ→Ｇｌｕ,６２Ｇｌｕ→Ｌｅｕ,６２Ｇｌｕ→Ａｒｇ和６５Ｐｒｏ→Ａｒｇ这些替换均使ＩＬ－２活性显著降低或丧失,而６３Ｌｅｕ→Ｓｅｒ或６４Ｌｙｓ→Ａｌａ对ＩＬ－２活性影响不大。从受体竞争抑制结合实验结果可知,上述不表现活性的突变体也同时丧夫了与高亲和力受体的结合能力,这说明α螺旋Ｂ中这些位点     

培养的海马神经元致痫后谷氨酸的合成和释放的变化

通过谷氨酸（Ｇｌｕｔａｍａｔｅ,Ｇｌｕ）免疫细胞化学染色法观察到马桑内酯（ＣｏｒｉａｒｉａＬａｃｔｏｎｅ,ＣＬ）（２．５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ）作用于体外培养的海马神经元６ｈ呈色增强,此后呈色反应明显减弱,阳性细胞数减少,胞体变小,突起短而稀少。ＭＫ－８０１（４×１０－５ｍｏｌ／Ｌ）可降低ＣＬ引起的海马神经元Ｇｌｕ免疫反应性。高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定ＣＬ作用于培养的海马神经元２４ｈ后培养基中Ｇｌｕ和天门冬氨酸（Ａｓｐ）含量增加（Ｐ＜０．００１）,ＭＫ－８０１并不能阻断此种效应。结果提示ＣＬ致痫后,早期神经元内Ｇｌｕ合成增加,后期向胞外释放。     

人为调节荔枝果皮有机自由基及其与果皮变褐的可能关系

荔枝果实以１０ｐｐｍ的６－ＢＡ、ＮＡＡ、ＧＡ３＋ＮＡＡ或ＰＶＰ（１％）＋ＮＡＡ处理２ｍｉｎ,１℃贮藏８天后再于室温放２天,ＥＰＲ分析表明果皮的有机自由基比对照低９％－２２％,花色素苷含量高５％－４６％。离体果皮小圆片同法浸泡１ｈ或１６ｈ,有机自由基反而比对照高,Ｏ２的捕获剂Ｔｉｒｏｎ和抗氧化剂ＰＧ＋ＣＡ处理皮小圆片１ｈ,有机自由基降低８％－１１％,处理１６ｈ则自由基高于对照。邻苯二酚和Ｈ２Ｏ２加速     

水分胁迫下湖北海棠根系脂氧合酶活性与ABA积累的关系

采用无细胞体系（ｃｅｌｌ－ｆｒｅｅ ｓｙｓｔｓｍ）及非离体根,研究了湖北海棠（Ｍａｌｕｓ ｈｕｐｅｈｅｎｓｉｓ（Ｐａｍｐａｎ．）Ｒｅｈｄ．）实生幼苗根中脂氧合酶（ＬＯＸ）活性和脱落酸（ＡＢＡ）生物合成及胁迫诱导ＡＢＡ积累的关系。结果表明,水分胁迫（３０％ＰＥＧ处理或０．６ｍｏｌ／Ｌ甘露醇处理）及盐胁迫（０．２ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）诱导ＡＢＡ积累的同时,ＬＯＸ活性也上升,两者呈一致关系。ＬＯＸ专一抑制     

人胃癌细胞系中p53抑癌基因变异的检测及其序列分析

ｐ５３抑癌基因由于点突变,缺失或易位等方式而丧失活性是多种肿瘤发生发展的重要机理之一。本文应用聚合酶链式反应─—单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法,对四种人胃癌细胞系ＭＧＣ８０３,ＢＧＣ８２３,ＧＣ７９０１和ＰＡＭＣ－８２中ｐ５３基因的第５、６、７、８四个外显子进行检测,结果发现,ＰＡＭＣ－８２的第５和第８外显子,ＧＣ７９０１的第６外显子存在突变。ＰＣＲ－直接测序证明,它们分别在１７４位、２８０位、２０４位密码子发生缺失Ｇ,ＧＣ→ＣＧ,ＡＴ→ＣＧ转变,因而可使其编码的ｐ５３蛋白分别发生移码突变,Ａｒｇ→Ｔｈｒ,Ｇｌｕ→Ａｌａ,而丧失肿瘤抑制功能。实验结果表明,ｐ５３基因在胃癌发生发展过程中,尤其是较晚阶段具有重要作用。     

人组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）突变体FrGGI的构建,表达及特性…

为了获得半衰期延长,特异活性提高及具有ＰＡＩ－１抗性的新型ｔ－ＰＡ溶性剂,利用基因重组及定位突变技术构建了ｔ－ＰＡ的Ｋ１、Ｋ２区糖基化位点消除,ＰＡＩ－１结合位点缺失,Ｆ与Ｅ区连接序列Ｈｉｓ４４￣Ｓｅｒ５０置换为纤粘蛋白Ｉ型Ｆ区间连接序列Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｇｌｕ Ｇｌｕ的ｔ－ＰＡ组合突变体ＦｒＧＧＩ,并在中国仓鼠卵巢细胞中获得了高效表达,对表达产物的生物学特性分析表明     

人组织型纤溶酶原激活剂（t－PA）突变体FrGGI的构建、表达及特性分析

为了获得半衰期延长,特异活性提高及具有ＰＡＬ－１抗性的新型ｔ－ＰＡ溶栓剂,利用基因重组及定位突变技术构建了ｔ－ＰＡ的Ｋ１、Ｋ２区糖基化位点消除,ＰＡＩ－１结合位点缺失,Ｆ与Ｅ区连接序列Ｈｉｓ４４～Ｓｅｒ５０置换为纤粘蛋白Ⅰ型Ｆ区间连接序列ＧｌｕＳｅｒＬｙｓＰｒｏＧｌｕＡｌａＧｌｕＧｌｕ的ｔ－ＰＡ组合突变体ＦｒＧＧＩ,并在中国仓鼠卵巢细胞中获得了高效表达。对表达产物的生物学特性分析表明,ＦｒＧＧＩ在大鼠血浆中的半衰期延长了１５倍,并获得了ＰＡＩ－１抗性,是一株很有希望的新型溶栓剂候选株。     

春小麦幼苗在水胁迫下内源ABA含量与自由基清除酶活力的变化

３个基因型的春小麦幼苗分别用ＰＥＧ作轻主胁迫（－０．６ＭＰａ）或中度胁迫（－１．５６ＭＰａ）的２个处理,不胁迫为对照,２ｄ后分开观察成熟叶和新生叶中内源ＡＢＡ和３个自由基清除酶活力对水胁迫的反应。３个基因型新生叶ＳＯＤ、ＣＡＴ平均活力极显著的高于成熟叶中的平均活力（Ｐ〈０．０１）,ＰＯＤ却是成熟的高,中度胁迫与对照相比,各基因型各叶龄的酶活力除成熟叶中ＣＡＴ的活力显著下降（Ｐ〈０．０１）外,其它都     

多胺对水稻CMS系及其保持系幼穗蛋白质,核酸和活性氧代谢的影响

用Ｄ－Ａｒｇ＋ＭＧＢＧ处理保持系,降低花粉可育度,并使其幼穗中蛋白质、ＤＮＡ和ＲＮＡ含量以及蛋白酶、ＲＮＡ酶和ＤＮＡ酶活性下降,使Ｏ２生成速率和ＭＤＡ含量上升。Ｐｕｔ＋Ｓｐｄ＋Ｓｐｍ有除或部分消除Ｄ－Ａｒｇ＋ＭＧＢＧ的上述效应（对酶活性的除外）。Ｄ－Ａｒｇ＋ＭＧＢＧ也使ＰＯＤ、ＳＯＤ和ＣＡＴ活性上升,但是,用Ｐｏｔ＋Ｓｐｄ＋Ｓｐｍ处理不育系,使花粉可育度轻度提高,并使其幼穗蛋白质、ＤＮＡ和ＲＮＡ含     

大鼠卵巢绒毛膜促性腺激素受体在CHO中的表达和扩增

本文报道了利用二氢叶酸还原酶放大系统将大鼠ＬＨ／ｈＣＧ受体（记为Ｆ－ｈＣＧＲ）及其胞外肽段（记为Ｔ－ｈＣＧＲ）在中国苍鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）中的表达。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明,Ｆ－ｈＣＧＲ为一条蛋白质带,其表观分子量为９２ｋｄ,而Ｔ－ｈＣＧＲ为３５ｋｄ和３７ｋｄ两条带。表达受体对其配基ｈＣＧ表现出高的亲合力,Ｆ－ｈＣＧＲ的解离常数为７×１０－９ｍｏｌ／Ｌ,Ｔ－ｈＣＧＲ为６．４×１０－９ｍｏｌ／Ｌ。表达Ｆ－ｈＣＧＲ的转染ＣＨＯ细胞可结合１２５Ｉ－ｈＣＧ,而表达Ｔ－ｈＣＧＢ者不结合１２５Ｉ－ｈＣＧ。这提示Ｆ－ｈＣＧＲ主要存在于细胞质膜表面上。表达Ｆ－ｈＣＧＲ的转染ＣＨＯ细胞能刺激。ｃＡＭＰ的形成,而表达Ｔ－ｈＣＧＲ者不能刺激ｃＡＭＰ形成。免疫荧光定位结果表明,Ｔ－ｈＣＧＲ主要分布于质膜的细胞质侧以及胞内其他一些细胞器膜上。用免疫亲和层析可以得到纯化的Ｔ－ｈＣＧＲ。     

钙对水稻幼苗抗冷性的影响

ＣａＣｌ２浸种提高水稻幼苗叶片中结合态钙、内源抗氧化剂（ＧＳＨ、ＡｓＡ）含量和膜保护酶（ＣＡＴ、ＳＯＤ和ＰＯＤ）活性,也增加可溶性蛋白质中煮沸稳定蛋白质（ｂｏｉｌｉｎｇ－ｓｔａｂｌｅｐｒｏｔｅｉｎ）的含量。冷胁迫期间,ＣａＣｌ２并能减少因冷胁迫引起的ＧＳＨ、ＡｓＡ含量,ＣＡＴ、ＳＯＤ和ＰＯＤ活性以及煮沸稳定蛋白质下降的程度。在恢复期间,经ＣａＣｌ２处理的幼苗其ＧＳＨ、ＡＳＡ、ＣＡＴ、ＳＯＤ和ＰＯＤ以及煮沸稳定蛋白质水平均有回升。