免疫毒素Luffin B-Ng76对人黑色素瘤细胞的体外抑制作用

用ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ凝胶亲和层析法从丝瓜籽中分离纯化了单链致核糖体失活蛋白（ｒｉｂｏｓｏｍｅｉｎａｃ－ｔｉｖａｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ,ＲＩＰ）——ｌｕｆｉｎＢ。并将ｌｕｆｉｎＢ与抗人黑色素瘤细胞单抗Ｎｇ７６制成了免疫毒素,命名为ｌｕｆｉｎＢ－Ｎｇ７６,它对体外培养的黑色素瘤细胞Ｍ２１有很强的抑制作用,ＩＣ５０为２．５×１０－１１ｍｏｌ／Ｌ,毒性比游离的ｌｕｆｉｎＢ提高４０００倍,而它对非靶的ＨｅＬａ细胞的毒性较Ｍ２１细胞低１２００倍。结果提示ｌｕｆｉｎＢ用于制备免疫毒素具有良好的应用前景。     

一组丝瓜籽小分子核糖体失活蛋白LuffinS的分离、纯化和性质

通过硫酸铵分级沉淀、ＣＭ－５２阳离子交换层析、ＨＲＬＣ分子排阻层析及ＦＰＬＣＭｏｎｏＳ离子交换层析等步骤,从丝瓜籽中分离到一组分子量为８ｋＤ左右的小分子核糖体失活蛋白——ＬｕｆｉｎＳ１、ＬｕｆｉｎＳ２、ＬｕｆｉｎＳ３。末端分析结果表明,它们的Ｎ端氨基酸分别为Ａｌａ、Ｐｒｏ和Ｔｈｒ。氨基酸序列分析确定了ＬｕｆｉｎＳ２的Ｎ端９个氨基酸的序列是Ｐｒｏ－Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ｇｌｎ－Ｇｌｕ－Ａｌａ－Ｐｈｅ－Ａｓｐ。ＬｕｆｉｎＳｓ对核糖体的失活机制与天花粉蛋白（ＴＣＳ）一致,是ＲＮＡＮ－糖苷酶催化型的。它们对无细胞蛋白质生物合成的抑制活性较ＴＣＳ略强,ＩＣ５０分别为１．３×１０－１１、１．０×１０－１０和６．３×１０－１１ｍｏｌ／Ｌ左右。因此ＬｕｆｉｎＳｓ有可能开发成免疫毒素的高效“弹头”。     

一组丝瓜籽小分子核糖体失活蛋白LuffinS的分离,纯化 …

通过硫酸铵分级沉淀、ＣＭ－５２阳离子交换层析、ＨＲＬＣ分子排阻层析及ＦＰＬＣ Ｍｏｎｏ Ｓ离子交换层析等步骤,从丝瓜籽中分离到一组分子量为８ｋＤ左右的小分子核糖体失活蛋白－ＬｕｆｆｉｎＳ１、ＬｕｆｆｉｎＳ２、ＬｕｆｆｉｎＳ３。末端分析结果表明,它们的Ｎ端氨基酸分别为Ａｌａ、Ｐｒｏ和Ｔｈｒ。氨基酸序列分析确定了ＬｕｆｆｉｎＳ２的Ｎ端９个氨基酸的序列是Ｐｒｏ－Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ｐｈｅ－Ａ     

免疫毒素—疾病治疗与临床

免疫毒素药物在治疗疾病方面取得了一些成功，能治疗一些与免疫相关的动物和人类的疾病，如血癌、自身免疫性疾病、GvHD病、HIV感染的细胞疾病以及一些实体瘤等，同时，在临床上也取得了一些进展，获得了一些数据，本文作一简要介绍。