毛刺槐花药培养及再生植株的获得

以毛刺槐的花药为材料,开展其组织培养和植株再生系统的研究。结果显示：将毛刺槐的花药接种在MS附加2,4—D0．1mg／L和BA3．0mg／L的培养基上,20d时花药愈伤组织诱导率可达41．5％。花药愈伤组织在MS附加BA5．0mg／L的分化培养基上继代培养2个月后,可分化出许多绿色的芽点,待不定芽长至2—3cm高时将其切下,转入MS附加IBA1．0mg／L的生根培养基上,2周后即可得到完整的再生植株。同时,研究就4℃低温预处理和蔗糖浓度对毛刺槐花药培养的影响进行了研究和讨论。     

发根农杆菌A4菌株转化苜蓿悬浮培养物

将苜蓿无菌苗下胚轴切割后,在附加2mg／L 2,4-D的MS培养基上诱导愈伤组织。愈伤组织在附加O．5mg／L 2,4-D的SH培养基中悬浮培养。悬浮培养物在用于转化之前,用0．45mol/L甘露醇处理1h．然后用O．16mol/L CaCl₂．2H₂O洗涤两次。预处理后的悬浮培养物用SH培养基悬浮(10ml／g悬浮培养物),再加O．2ml农杆菌悬浮液,于25±2℃共培养2d。共培养的悬浮培养物洗涤后在附加0．5mg／L羧苄青霉索的无激素培养基上选择培养。悬浮培养天数、悬浮培养基激素组成和选择培养基种类明显影响转化频率。纸电泳分折表明70％的转化体可以台成农杆碱和甘露碱。染色体观察显示转化组织细胞存在严重的数目和结构变异。     

影响油菜萝卜胞质不育系恢复材料花药培养的若干因素

对ＯｇｕＣＭＳ×Ａｄ－６（Ｆ４）的ＴＣＦ２代进行了花药离体培养。目的是诱导单倍体植株和纯合的二倍体植株,采集含单核靠边期的花芽,一部分放在４℃条件下黑暗贮存５ｄ,一部分直接解剖培养,探讨了培养基和培养温度对花药培养的影响,结果表明经过５ｄ的４℃低温预处理的花芽,再经过３３℃,２ｄ和３０℃,６ｄ的培养后花药出愈率明显高于其他条件,另外以Ｂ５作为基本培养基附加１０％或８％的蔗糖以及０．５ｍｇ／Ｌ,２,     

骆驼蓬的组织培养及植株再生

以骆驼蓬(Peganum harmala L)无菌苗下胚轴切段为材料,在不同的培养基上进行愈伤组织的诱导,发现在MS基本培养基附加2．0mg/L 2,4—D、0．5mg／L 6—BA和3％蔗糖时,可100％的诱导出愈伤组织。愈伤组织在附加2．0mg／L 6—BA、0．5mg／L NAA、500mg／L CH和3％蔗糖的MS培养基上诱导出丛生芽,进而发育成苗,苗的分化频率在30％左右。分化苗或其茎切断在附加0．2mg／L IBA、0．2mg/L NAA和3％蔗糖的l／2MS培养基上出现根的分化,分化频率在90％以上。再生植株经炼苗后移栽成活,成活率在80％以上。     

地黄组织培养及植株再生的研究

以地黄根茎所获无菌苗为材料,对其愈伤组织诱导、分化和再生植株的获取进行了初步研究。结果表明：取叶片、茎段、叶柄进行愈伤组织诱导,筛选出最适培养基为MS附加2,4-D0．5mg／L、BA1．0mg／L,愈伤组织诱导率可达100％。将叶片接种在分化培养基中,诱导不定芽,其最适分化培养基为MS附加BA 3mg／L、NAA 0．1mg／L,分化率为77．5％。试管苗在改良的MS(大量与微量元素、铁盐和有机物质各1／2)附加NAA 0．05mg／L的培养基上,经过15～20d培养,生根率可达100％。     

诸葛菜叶柄原生质体培养再生植株

本文首次报道用诸葛菜(Orychophragmus violaceus)试管苗叶牺为材料分离原生质体,经培养再生了植株。用于原生质体培养的基本培养基为Nitsch培养基,附加1OOmg／L丝氨酸,800mg／L谷氨酰胺和13％的蔗糖,激素成分为0.5mg／L BA,0．5mg／L NAA和lmg／L2,4一D(或0．5mg／L BA和2mg／L 2,4-D)。原生质体的培养密度为2×10⁵／ml。培葬7天的原生质体分裂频率约为40％。在附加O．05mg／L NAA和3mg／L BA的MS分化培养基上,愈伤组织可分化出大量的芽和苗,分化频率为100％。     

菘蓝花药培养及单倍体的诱导

探讨菘蓝花药处于单核晚期的形态指标,并以适宜发育时期的花药为外植体,进行花药培养及单倍体诱导。实验结果表明,4℃低温处理2d后,在含有6-BA0．5mg·L-1和NAA1．0mg·L-1。的Ms培养基上,花药愈伤组织的诱导率为23．35％;将其转接到Ms附加6．BA1．0mg·L-1,NAA0．5mg·L-1的分化培养基上,80．00％以上的愈伤组织可以诱导产生不定芽;再将分化出的试管苗转接到1／2MS＋NAA1．0mg·L-1的生根培养基上,3d左右即可获得完整植株。经叶边缘压片检查染色体数目,花药培养所得的弱小绿苗为单倍体植株。     

草木樨状黄芪甲硫氨酸抗性系的原生质体培养及植株再生

建立了草木樨状黄芪(Astragalus melilotoides Pall．)甲硫氨酸抗性系原生质体再生植株的实验体系。以茎切段诱导的松软愈伤组织为材料,通过酶法分离出大量有活力的原生质体。原生质体经培养持续分裂形成了愈伤组织,并高频率地分化出再生苗。比较了不同培养基、培养方法和培养密度对原生质体分裂和再生的影响。结果表明,原生质体以3×10⁵/mL的植板密度,采用琼脂糖岛法培养在附加1．0mg／L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、0．5mg／L 6-苄氨基嘌呤(6BA)、500mg／L水解酪蛋白、3％蔗糖、0．3mol／L甘露醇的KM_8p培养基中,可获得最佳效果,其细胞分裂频率达38％左右。原生质体培养后仍然保持对甲硫氨酸的抗性,同时对乙硫氨酸表现交叉抗性。     

尾巨桉胚培养与快速繁殖研究(简报)

尾巨桉种胚在改良H＋2,4-D0．5mg／L＋6-BA0．1mg／L＋蔗糖3％培养基上诱导形成愈伤组织,每个愈伤组织块在改良H＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋蔗糖5％培养基上分化形成芽点,经30d继代培养,产生有效苗30～50株。利用改良MS＋6-BA0．4mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖3％培养基进行壮苗,改良MS＋ABT0．6mg／L＋IBA0．2mg,L＋蔗糖1．5％培养基进行生根诱导．有效成苗率达95％以上。移栽成活率达98％．     

紫果猕猴桃幼胚愈伤组织诱导及植株再生

以紫果猕猴桃(Actinidia arguta var．purpurea)幼胚为外植体,诱导愈伤组织并进行植株再生。结果表明：不同的培养基和不同的培养条件对幼胚愈伤组织的诱导率及分化率不同;0．2mg／L ZT与0．5mg／L GA。配合使用有利于促进愈伤组织的诱导;7％蔗糖、600mg／L CH与400mg／L Gln都有利于促进愈伤组织的形成;在添加0．5mg／L 6-BA、0．05mg／L NAA与0．5mg／L GA3的MS培养基中植株的再生率达93．3％。     

中粒种咖啡花药培养成完整植株

1 植物名称中粒种咖啡(coffea robusta)。 2 材料类别花药。 3 培养条件基本培养基为MS,(1)诱导愈伤组织培养基附加KT0.8 mg/L(单位下同)、2,4-D 0.8、NAA1、蔗糖5％、琼脂0.5％,pH 5.8。(2)诱导胚状体培养基附加BA 2、KT 0.5、NAA 0.2、CH 500、蔗糖3％、琼脂0.6％,pH 5.8。(3)胚状体分化成苗培养基为3/4MS附加BA0.5、NAA0.8、GA0.1、活性炭0.1％、蔗糖2.5％、琼脂0.7％,pH 5.8。培养温度25     

大豆顶芽组织培养植株再生的研究

栽培大豆(Glycine max)6个品种顶芽组织培养植株再生中,以铁丰18形成愈伤组织的能力最强,在B_5附加2,4-D 1.0mg/L,BA 0.5mg/L的培养基上,诱导率可达80％左右。愈伤组织出现10d后及时转移到MS附加BA 1.0,KT0.5,ZT0.5和IAA0.5mg/L的分化培养基上,分芽化的频率达40％左右。切割的不定芽在1/2MS基本培养基附加IBA 0.2～0.5mg/L、蔗糖2％的琼脂培养基上,可诱导生根,长成完整小植株。     

防风组织培养中畸形胚状体的发生和控制

采用组织培养和石蜡切片法,分析多种因素对防风畸形胚状体发生和发育过程的影响及控制。结果表明,诱导正常体细胞胚高频发生的培养基组合是：启动胚性愈伤组织的培养基是MS 0．5mg／L 2．4-D,蔗糖浓度3％;分化培养基是MS 1mg／L 6-BA 0．2mg／L NAA 0．5mg／L ABA,蔗糖浓度4％～5％;成熟培养基是MS培养基,蔗糖浓度3％。结论：一定浓度的生长素是诱导防风胚性愈伤组织的关键因素,细胞分裂素在体细胞胚的分化和发育过程中起协同作用;蔗糖浓度、ABA、接种方法以及适宜的培养条件和培养容器等均可有效降低畸形胚状体的发生率。     

高效诱导甜菜再生植株的研究

研究了栽培甜菜(Beta vulgaris L.)4倍体品系405叶柄外植体的离体培养。成功地建立了一套高频率诱导再生芽的程序。外植体取自生长在改良MS(MSB)附加BA和NAA或者单加BA的培养基中。经过30d以上预培养后的幼苗叶柄,在MS附加BA 1．0mg／L或NAA0．3mg／L,Bal．0mg／L培养基上直接诱导再生芽,并发育成苗．诱导频率最高可达51．3％。在1／2MS(MS培养基大量元素减半)附加NAA0．5～1．0mg／L的培养基上诱导生根．这一程序为甜菜扩大繁殖和遗传转化提供了一个良好的试验系统。     

盾叶薯蓣组织培养技术的优化

以盾叶薯蓣的根状茎、茎段、叶柄、幼叶为材料,进行愈伤组织诱导、分化及再生植株形成的研究。结果表明：盾叶薯蓣不同外植体均能诱导出愈伤组织,其中茎段愈伤组织的诱导率最高;不同激素配比的培养基对愈伤组织的形成有很大的影响：以LS为基本培养基,2,4-D浓度为4．0mg／L、6-BA浓度为1．0mg／L的激素配比诱导率最高,达62．5％;以改良MS为基本培养基,2,4-D浓度为2．0mg／L、6-BA浓度为0．5mg／L的激素配比诱导率最高,达71．4％。筛选到优化的分化培养基为改良MS附加2．0mg／L的6-BA和0．5mg／L的Vc,且能直接诱导出根,并形成完整植株。     

黄山药愈伤组织诱导与分化

采用黄山药野生植株作为外植体,试验了不同激素处理对黄山药愈伤组织的诱导、分化影响,结果表明：不同的外植体的诱导率差别较大,叶片的诱导率最高,最高达到85．7％,茎段的诱导率较低,平均诱导率仅10％左右。以叶片作为外植体诱导愈伤组织的最佳培养基配方为MS 2,4-D2．0mg／L 6-BA2．5mg／L;愈伤组织分化生芽的最佳配方为MS BA1．0mg／L NAA0．5mg／L 蔗糖2％ pH6．4;愈伤组织分化生根的最佳配方诱MS BA1．0mg／L NAA0．1mg／L 蔗糖3％ pH6．80。     

牡丹子叶离体再生体系研究

以日本牡丹品种“太阳”为试验材料,研究不同激素组合对牡丹胚初代培养、愈伤组织诱导、分化及植株再生的影响。结果表明：牡丹胚初代培养在1．0mg／L6-BA＋0．25mg／LTDZ的MS培养基上,牡丹胚诱导率最高可达96．1％;剪取无菌子叶转接到附加含有2．0mg／L6-BA＋2．0mg／L2,4-D＋0．2mg／LTDZ的MS培基养上进行愈伤组织培养．诱导率可达100％;愈伤组织在MS＋0．5mg／LKT培养基上分化出芽,分化率达26．6％：不定芽在1／2MS＋1．0mg／LNAA＋4．0mg／LIBA生根培养基上的生根率达27％．     

不同理化因子对雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响

在 1 2MS液体培养基上研究了不同理化因子对水母雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响。实验结果表明 :氮源总浓度 (包括NH+4和NO-3)为 30mmol L ;NH⁺₄ NO^-₃比例为 5∶2 5 ;2 %蔗糖和 3%葡萄糖组合 ;0.5mg LGA₃和 0.5mg LIBA ;pH5.8;18h d的光照 (光强为 35.0.0lx) ;2.4℃ ;摇床转速为 100rmin有利于毛状根生长及总黄酮的生物合成。在此培养条件下 ,经过21d的培养毛状根生长量达到 12.8g L(DW) ,总黄酮合成量为 192.2mg L ,即总黄酮含量占毛状根干重的 15 % ,约为干重野生水母雪莲植株总黄酮含量的 2.5倍。     

山茱英的组织培养与植株再生

目的：建立山茱萸的组织培养及植株再生体系。方法：分别以山茱萸的叶片、花柄和花托为材料,进行山茱萸不同外植体的离体培养研究,筛选最佳培养基组成。结果：适宜山茱萸叶片愈伤组织诱导的培养基组合为1／2MS,附加BA2．0mg/L、IBA0,5—1．0mg／L;适宜山茱萸花柄、花托愈伤组织诱导的培养基组合为1／2MS,附加BA1．0mg／L、2,4-D0．5mg／L;在1／2MS附加BA2．0mg／L、IBA0．05mg／L的培养基上,可诱导不定芽的产生;1／2MS附加IBA2．0mg／L的培养基有利于山茱萸试管苗生根。讨论：山茱萸的花托是进行组织培养的最适外植体,白色或翠绿色、结构致密的愈伤组织较易分化产生不定芽。     

聚合草花药愈伤组织的诱导和植株再生

植物名称:聚合草(Symphytum officinale)。材料类别:花粉发育时期为单核靠边期的花药。培养条件:诱导愈伤组织培养基以N_6、MS为基本培养基。分别附加 2,4-D0.5、2、4mg/l。蔗糖浓度为5％,pH5.8,将聚合草花药分别接种在以上培养基上,然后置于25℃的培养室内进行暗培