大果良种沙棘愈伤组织诱导及植株再生的研究

大果良种沙棘的幼嫩茎尖,茎段外植体接种在MS,1／2MS附加不同浓度配比的IAA,IBA,BA,NAA培养基上可诱导茎尖及腋芽生长,将诱导产生的无性系芽接种在MS或1／2MS附加BA0．3－0．5mg/L,NAA0．05mg/L的培养基上可形成丛生芽,同时在小叶片和嫩茎上诱导产生愈伤组织,继续培养愈伤组织表面形成大量的绿色突起,进一步分化成不定芽,在相同培养基上,不定芽上可直接产生不定芽,从而形成多达数百个的不定芽族,不定芽长至3cm时切下转至1／2MS附加IAA或IBA 0．2mg/L的培养基上可生根而形成完整 的再生植株。     

白刺组织培养技术的研究

试验选用唐古特白刺幼嫩茎段和叶片作为材料,研究白刺不同外植体的离体培养技术。结果表明,白刺带芽嫩茎是诱导丛生芽的良好外植体,而叶片是诱导愈伤组织的良好外植体;白刺的最适增殖、壮芽培养基是：MS BA0.5mg／L NAA1．0mg／L GA32．0mg／L;最适生根培养基是：l／2MS IBA0.5mg／L;愈伤组织诱导培养基是：MS 2,4-D0.5～1．0mg／L。     

樱桃砧木Colt离体叶片再生

以樱桃砧木Colt试管苗的叶片为外植体 ,通过先诱导愈伤组织分化不定芽以及叶片直接分化不定芽两种途径诱导再生。结果表明 :在MS附加NAA 1 0mg/L、KT3 0mg/L、ZT0 2 5mg/L培养基中 ,愈伤诱导率可达 1 0 0 % ;诱导的愈伤在MS附加NAA 0 2mg/L、IAA0 5mg/L、6 BA 0 5mg/L、KT 1 0mg/L、GA 0 5mg/L培养基中 ,不定芽分化率为 2 1 3% ;在MS附加 6 BA 6 0mg/L、NAA 1 0mg/L、GA 0 5mg/L中 ,叶片 -叶柄不定芽诱导率可达 48 3%。     

贯叶金丝桃组织培养的研究

分别以甘肃天水贯叶金丝桃的幼根、幼茎、幼叶为外植体．在1／2MS培养基上附加各类激素,进行贯叶金丝桃的组培实验。研究发现各外植体的增殖速率由高到低分别为幼茎、幼根、幼叶,且得到贯叶金丝桃组培各阶段的最佳培养基成分。诱导愈伤组织的培养基为1／2MS 1．3～1．6mg／L BA 0．2mg／L NAA;培养基1／2MS 1．3～1．6mg／L BA 0．15mg／L NAA有利于不定芽的形成;诱导不定根的培养基为l／2MS IBA0．5～O．8mg／L 蔗糖2．0％。向1／2MS培养基中添加不同的生长素(IAA,IBA,NAA,2．4-D)．在不同浓度梯度的培养基上进行诱导贯叶金丝桃的愈伤组织及不定根的试验,结果表明：生长素IAA,IBA既可诱导愈伤组织,又可以诱导不定根的产生。生长素NAA,2,4-D可诱导产生愈伤组织,但对不定根的诱导作用较差。     

胡杨器官和体胚发生方式的植株再生

目的：为以胡杨为亲本的体细胞杂交育种奠定基础。方法：以胡杨苗叶片为外植体,通过器官和体胚两种不同发生方式建立了离体再生体系。结果：附加0．75mg/L BA、0．5mg/L NAA基本培养基及3w暗培养是愈伤组织诱导的最佳条件;附加0．25mg/L BA和0．1mg/L NAA的基本培养基上不定芽的诱导率最高;1／2大量元素的MS培养基附加0．1mg/l NAA、0．05mg／L和1．5％蔗糖对不定芽生根效果最好;诱导并筛选出的胚性愈伤组织在附加了0．5mg/L BA、0．5mg／L NAA的基本培养基上诱导获得大量胚状体,干化处理后大部分能经子叶胚期萌发成苗。结论：外植体的采集周期和培养条件影响胡杨离体叶片的形态发生途径。     

樱桃砧木Colt离体叶片再生

以樱桃砧木Colt试管苗的叶片为外植体,通过先诱导愈伤组织分不定芽以及叶片直接分化不定芽两种途径诱导再生,结果表明,在MS附NAA1．0mg/L、KT3．0mg/L、ZT0．25mg/L培养基中,愈伤诱导率可达100％;诱导的愈伤MS附加NAA0．2mg/L、IAA0．5mg/L、6－BA0．5mg/L、KT1．0mg/L,GA0．5mg/L培养基中,不定芽分化率为21．3％,在MS附加6-BA6．0mg/L、NAA1．0mg/L、GA0．5mg/L中,叶片一叶柄不定芽诱导率可达48．3％。     

毛刺槐花药培养及再生植株的获得

以毛刺槐的花药为材料,开展其组织培养和植株再生系统的研究。结果显示：将毛刺槐的花药接种在MS附加2,4—D0．1mg／L和BA3．0mg／L的培养基上,20d时花药愈伤组织诱导率可达41．5％。花药愈伤组织在MS附加BA5．0mg／L的分化培养基上继代培养2个月后,可分化出许多绿色的芽点,待不定芽长至2—3cm高时将其切下,转入MS附加IBA1．0mg／L的生根培养基上,2周后即可得到完整的再生植株。同时,研究就4℃低温预处理和蔗糖浓度对毛刺槐花药培养的影响进行了研究和讨论。     

地黄组织培养及植株再生的研究

以地黄根茎所获无菌苗为材料,对其愈伤组织诱导、分化和再生植株的获取进行了初步研究。结果表明：取叶片、茎段、叶柄进行愈伤组织诱导,筛选出最适培养基为MS附加2,4-D0．5mg／L、BA1．0mg／L,愈伤组织诱导率可达100％。将叶片接种在分化培养基中,诱导不定芽,其最适分化培养基为MS附加BA 3mg／L、NAA 0．1mg／L,分化率为77．5％。试管苗在改良的MS(大量与微量元素、铁盐和有机物质各1／2)附加NAA 0．05mg／L的培养基上,经过15～20d培养,生根率可达100％。     

海巴戟(Morinda citrifolia L.)组织培养研究

以海巴戟（Morinda citrifolia L．）种子为试材,在不剥除种皮的情况下,在MS无激素培养基上播种1年内未见发芽,在剥除种皮的情况下,在MS无激素培养基上发芽率最高,50d内可达75％。海巴戟子叶和下胚轴均能单独由细胞分裂素BA0．7～2．0mg／L诱导不定芽发生,不定芽可直接从外植体发生,也可从愈伤组织发生,添加生长素NAA0．05～0．1mg／L则完全抑制不定芽发生,同时强烈促进愈伤组织生长和不定根发生。带芽茎段在BA1．5mg／L配合低浓度生长素时均能通过腋芽萌发和不定芽发生而增殖。芽梢在NAA0．1mg／L、IBA0．1mg／L或IAA0．1mg／L均有根群发生,但NAA0．1mg／L诱导生根时切口愈伤组织较多,部分不定根由愈伤组织发生。而IAA0．1mg／L诱导生根时根群欠发达,以IBA0．1mg／L最佳。     

罗汉果叶片离体再生快繁技术

以罗汉果(Ssiraiti grosvenori)叶片为外植体,探讨培养方式、激素组合对愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。结果表明:罗汉果叶片在培养基MS+BA 1.0 mg/L+IBA 0.7 mg/L上培养4周愈伤组织的诱导率达90%以上;罗汉果愈伤组织在培养基MS+BA 1.0 mg/L+IBA0.2 mg/L+赛苯隆(TDZ)0.1 mg/L上不定芽的分化率可达70%,平均出芽指数3.7;罗汉果试管苗在培养基MS+BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L上茎芽增殖比较稳定,在培养基MS+IBA0.1 mg/L上培养2周开始分化不定根,其生根率在90%以上。     

长柄双花木愈伤组织诱导及植株再生

以长柄双花木当年生嫩梢上的叶柄、嫩茎、嫩叶为外植体,对影响长柄双花木愈伤组织诱导和继代、分化主要因素进行研究。结果表明:在培养基MS+NAA0.5mg/L+2,4-D2.0mg/L上,三种外植体均可诱导出愈伤组织,其中叶片愈伤组织诱导率最高。该培养基还可作为愈伤组织继代培养基,但继代培养周期不超过2周。愈伤组织接种在MS+BA2mg/L上分化不定芽,根的诱导在1/2MS+IBA0.5mg/L培养基上进行。     

鱼腥草体细胞胚胎发生和植株再生

目的:利用鱼腥草的叶片和叶柄为材料,进行体细胞胚胎诱导及植株再生研究。方法:运用正交设计试验,考察在改良的MS固体培养基上添加不同种类、不同浓度的植物生长物质组合及其配比对鱼腥草愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响。结果:鱼腥草无菌苗叶片在含有2,4-D 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L的改良MS培养基上能诱导出胚性愈伤组织;胚性愈伤组织在含有6-BA 1.0 mg/L的改良的MS培养基上诱导体细胞胚的发生;叶柄在含有6-BA 1.0 mg/L改良MS培养基上直接产生体细胞胚。体细胞胚在改良的MS NAA0.1 mg/L 6-BA 1.0 mg/L的培养基上能够快速繁殖,形成大量不定芽,在不加任何激素的MS培养基上就可以萌发出不定根,发育为成完整植株,在MS IBA 1.0 mg/L的固体培养基上能够形成大量的根。结论:建立了鱼腥草体细胞胚胎发生及植株再生的体系。     

吊钟花的组织培养技术研究

以吊钟花(Enkianthus quinqueflorus Lour.)茎尖及带腋芽的茎段为外植体进行组织培养.结果表明,改良B5培养基(B5大量元素和钙盐+MS有机物、铁盐、微量元素)最有利于吊钟花的培养,外植体在改良B5+2,4D- 1 mg L-1的培养基中,愈伤组织诱导率可达100%.在含BA 1～2 m L-1+NAA0.1～0.5 mg L-1培养基中,可诱导产生不定芽.继代培养以改良B5+BA 1 mg L-1+NAA0.5 mg L-1培养基的增殖系数最高.生根培养基以1/2MS+IBA2 mg L-1为最佳,生根率可达80%以上.试管苗移栽成活率为90%以上.     

从麻疯树上胚轴外植体再生植株

以麻疯树上胚轴为实验材料在MS添加IBA和BA的培养基上进行离体培养实验.结果表明,在IBA O.1 mg/L与BA 0.2～0.7 mg/L组合的条件下,不定芽从上胚轴外植体的表面直接被诱导分化,其中以在MS IBA 0.1 mg/L BA 0.5 mg/L上的诱导率最高.从愈伤组织来源的植株再生需要IBA 0.5 mg/L与BA 0.1 mg/L、IBA 0.5 mg/L与BA0.2mg/L以及IBA1.0mg/L与BA0.5mg/L的激素组合,其分化的最佳培养基是MS IBA1.0 mg/L BA0.5 mg/L.生长健壮的不定芽和再生植株能在无激素的MS基本培养基上生根.发育良好的再生苗可成功地转移到温室栽培而没有可见的变异.     

药用植物灯盏花的组织培养

以灯盏花花葶、花盘及叶柄为外植体,MS为基本培养基,通过不同的激素种类和浓度配比,建立灯盏花组培快繁体系。结果如下:在所有实验方案中,花葶的出愈率最高,是理想的快速繁殖材料。较适宜的诱导愈伤组织的培养基为MS+BA1.0mg/L+IBA0.05mg/L+蔗糖3.0%,诱导不定芽的培养基为MS+BA2.0mg/L+IAA1.0mg/L+蔗糖3.0%或MS+Kt3.0+IAA0.5mg/L+蔗糖3.0%,而根的诱导则是在1/2MS+NAA1.0Mg/L+蔗糖3.0%的培养基上进行。同时对组织培养过程中灯盏花植株再生的方式进行了讨论。     

High-frequency plant regeneration from leaf-disc cultures of Jatropha curcas L.: an important biodiesel plant

A simple, high-frequency and reproducible protocol for induction of adventitious shoot buds and plant regeneration from leaf-disc cultures of Jatropha curcas L. has been developed. Adventitious shoot buds were induced from very young leaf explants of in vitro germinated seedlings as well as mature field-grown plants cultured on Murashige and Skoog’s (MS) medium supplemented with thidiazuron (TDZ) (2.27 μM), 6-benzylaminopurine (BA) (2.22 μM) and indole-3-butyric acid (IBA) (0.49 μM). The presence of TDZ in the induction medium has greater influence on the induction of adventitious shoot buds, whereas BA in the absence of TDZ promoted callus induction rather than shoot buds. Induced shoot buds were multiplied and elongated into shoots following transfer to the MS medium supplemented with BA (4.44 μM), kinetin (Kn) (2.33 μM), indole-3-acetic acid (IAA) (1.43 μM), and gibberellic acid (GA₃) (0.72 μM). Well-developed shoots were rooted on MS medium supplemented with IBA (0.5 μM) after 30 days. Regenerated plants after 2 months of acclimatization were successfully transferred to the field without visible morphological variation. This protocol might find use in mass production of true-to-type plants and in production of transgenic plants through Agrobacterium/biolistic-mediated transformation.     

绿巨人叶柄离体培养及植株再生

在MS基本培养基中添加不同植物生长调节剂(mg/L)对绿巨人无菌苗的叶柄进行离体培养,结果表明,MS+6-BA 1.0+NAA 2.0+2,4-D 1.0诱导效果最好,产生愈伤组织并分化出丛芽;MS+6-BA 2.0~3.0+NAA 0.2+0.2% PVP对芽的增殖效果好;附加0.2%PVP对防止褐变有一定效果;生根培养基选用1/2MS+NAA 0.1~0.5+IBA 1.0的组合。     

Efficient regeneration of sorghum, Sorghum bicolor (L.) Moench, from shoot-tip explant

Novel protocols for production of multiple shoot-tip clumps and somatic embryos of Sorghum bicolor (L.) Moench were developed with long-term goal of crop improvement through genetic transformation. Multiple shoot-tip clumps were developed in vitro from shoot-tip explant of one-week old seedling, cultured on MS medium containing only BA (0.5, 1 or 2 mg/l) or both BA (1 or 2 mg/l) and 2,4-D (0.5 mg/l) with bi-weekly subculture. Somatic embryos were directly produced on the enlarged dome shaped growing structures that developed from the shoot-tips of one-week old seedling explants (without any callus formation) when cultured on MS medium supplemented with both 2,4-D (0.5 mg/l) and BA (0.5 mg/l). However, the supplementation of MS medium with only 2,4-D (0.5 mg/l) induced compact callus without any plantlet regeneration. Each multiple shoot-clump was capable of regenerating more than 80 shoots via an intensive differentiation of both axillary and adventitious shoot buds, the somatic embryos were capable of 90% germination, plant conversion and regeneration. The regenerated shoots could be efficiently rooted on MS medium containing indole-3-butyric acid (IBA 1 mg/l). The plants were successfully transplanted to glasshouse and grown to maturity with a survival rate of 98%. Morphogenetic response of the explants was found to be genotypically independent.