蜈蚣衣内生真菌研究(英文)

对北京东灵山地衣蜈蚣衣进行内生真菌分离,经过6种不同的方法消毒后,内生真菌的定殖率为55.4%~100%;从316个地衣组织块上共分离到28个真菌分类单元,其中包括1个子囊菌,22个丝孢菌,3个腔孢菌,1个毛霉和1个酵母菌。根据定殖率和分离到的内生真菌的种类两个指标综合考虑,消毒方法IV(75%乙醇1min,2%次氯酸钠3min,75%乙醇30s)为进行地衣内生真菌研究的最佳消毒方法。     

洋甘菊组织培养及植株再生

洋甘菊种子灭菌后,置于MS 培养基上发芽形成无菌苗,发芽率可达80 %.适合洋甘菊种子的灭菌的方法是:75 %酒精30 s+3.5 %次氯酸钠15 min+2 %次氯酸钠10 min.在研究范围内,洋甘菊不定芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,碳源以蔗糖浓度3 %最佳.适宜洋甘菊生根的最佳培养基为MS+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.2 mg/L.     

不同培养基对兰科药用植物手参原球茎共生真菌的分离效果

兰科植物手参Gymnadenia conopsea作为国家二级重点保护野生植物具有重要的药用价值。目前手参还未实现人工栽培,但其种子的真菌共生萌发已获成功。为明确除促萌发真菌外,还有哪些土著真菌参与了手参种子的萌发过程,本研究在自然条件下采用促萌发真菌伴播手参种子,获得了种子萌发形成的原球茎,进而对比了6种常见的培养基PDA (马铃薯葡萄糖琼脂培养基)、MMN (改良Melin-Norkrans培养基)、FIM (真菌分离培养基)、MEA (麦芽浸膏琼脂培养基)、CAM (胡萝卜葡萄糖琼脂培养基)和CMA (玉米粉琼脂培养基)对手参原球茎共生真菌分离效果的影响。共从6种培养基上分离获得了75个菌株,其中MMN、CAM、PDA、FIM、MEA、CMA培养基依次分离得到20株、16株、15株、11株、8株、5株菌。此外,真菌的多样性分析结果表明,MMN培养基的Chao 1、Shannon-Wiener和Simpson多样性指数最高,CAM和PDA培养基次之,CMA培养基最低。综上所述,真菌分离效果最好的是MMN培养基,其次是CAM和PDA培养基,而FIM和MEA培养基对真菌的分离效果影响不大,CMA培养基的分离效果最差。本研究结果可为其他兰科植物原球茎共生真菌的分离提供借鉴,所获得的菌株也有望进一步应用于功能菌剂的研发。     

花梨木组织培养外植体消毒方法初步探讨

针对在花梨木(Dalbergia odofifera T. Chen)组织培养过程中外植体的有效消毒方法进行研究。外植体消毒主要以2年生以上实生苗的茎段为材料,开展了茎段外植体次氯酸钠(5%,10%,15%)和升汞(0.05%,0.1%,0.2%)3个浓度水平的消毒试验。在此基础上,开展了外植体消毒的时间试验,次氯酸钠消毒时间为10 min、20 min、30 min,升汞消毒时间为5 min、10 min、15 min。结果表明：茎段外植体采用10%浓度的次氯酸钠消毒效果较好,最佳消毒方式75%的酒精浸泡2 min,10%次氯酸钠消毒20 min,该方法污染率最低、存活力最高。     

云南松外生菌根真菌分离培养研究

就滇中一带云南松林进行了多次调查,共采集、鉴定标本130余号;从中选取13科, 19属, 33种真菌进行了菌种分离、培养的研究。选用并修改4种培养基进行了外生菌根真菌分离、培养的比较,结果共有11科, 17属, 25种真菌分离获得成功,成功率高达75.8%, 4种培养基的分离成功率依次为36.4%、63.6%、33.3%和57.6%。其中,修改PDA培养基和松针、玉米培养基较适宜于云南松外生菌根真菌的分离、纯化和培养。     

野生姜科植物土田七的外植体灭菌技术研究

为筛选出土田七组织培养适宜的外植体类型及其消毒方法,为土田七的无性繁殖提供技术支持,以土田七的茎尖、幼嫩叶片和根茎作为外植体,采用75%酒精和0.1%HgCl_2 2种灭菌剂进行消毒灭菌处理,研究了土田七组织培养中外植体的最佳灭菌方法。结果表明:茎尖的消毒相对容易,幼嫩叶片次之,根茎的消毒相对较难。茎尖采用75%酒精30 s+0.1%HgCl_2 15 min的灭菌方法好;幼嫩叶片采用75%酒精10 s+0.1%HgCl_2 5 min的灭菌方法好;根茎采用75%酒精30 s+0.1%HgCl_2 30 min方法效果较好。     

红锥不同外植体消毒技术初探

以红锥种子、茎段为材料,进行外植体消毒试验。结果表明,种子灭菌的条件:75%酒精5~15min+0.1%HgCl230~40min(不剥壳去皮),75%酒精1min+0.1%HgC220min(剥壳去皮),这2种处理污染率均较低,种子发芽率相差不大;茎段用0.1%升汞+20%次氯酸钠组合消毒效果最好,在0.1%升汞+20%次氯酸钠组合消毒时间为8min+5min时污染率最低,平均仅为28.89%。     

油松根际外生菌根真菌龟裂秃马勃的分离鉴定及培养

该研究采用组织分离法对黄土高原子午岭林区连家砭林场油松根际外生菌根真菌进行了分离,并采用ITS序列对分离的真菌进行鉴定,研究了菌根真菌的培养条件,为菌剂的生产奠定基础。结果表明:子午岭林区油松根际分离培养出的真菌为龟裂秃马勃(Handkea utriformis),能够与油松形成外生菌根。采用MMN培养基为基础培养基,纯培养条件下,龟裂秃马勃生长的最适pH为6.0,最适温度为25℃。以蔗糖为唯一碳源的培养基中龟裂秃马勃生长速度最快,其次是麦芽糖和葡萄糖,生长最慢的为乳糖,在以几丁质和碳酸氢钠为碳源的培养基上不生长。有机氮源中,对脯氨酸为唯一氮源的利用能力最好,其次是酪蛋白,尿素最差;无机氮源中,以磷酸氢二铵为唯一氮源时生长最好,其次是硝酸钙,最差为酒石酸铵。该研究首次报道了黄土高原子午岭林区外生菌根真菌龟裂秃马勃,并初步确定了其最佳培养条件。     

红锥不同外植体消毒技术初探

以红锥种子、茎段为材料,进行外植体消毒试验。结果表明,种子灭菌的条件:75%酒精5~15min+0.1%HgCl230~40min(不剥壳去皮),75%酒精1min+0.1%HgC220min(剥壳去皮),这2种处理污染率均较低,种子发芽率相差不大;茎段用0.1%升汞+20%次氯酸钠组合消毒效果最好,在0.1%升汞+20%次氯酸钠组合消毒时间为8min+5min时污染率最低,平均仅为28.89%。     

南方红豆杉内生真菌分离时的表面消毒方法探索

表面消毒是植物内生菌分离的关键环节,在南方红豆杉(Taxus chinensis var. mairei)内生真菌分离的过程中,使用75％乙醇、2％次氯酸钠（NaClO）代替升汞对外植体进行了表面消毒摸索。结果显示：红豆杉叶、茎、皮经预处理后,先用75％乙醇浸泡3 min,再用2％次氯酸钠浸泡2 min,然后红豆杉叶、茎、皮分别用75％乙醇浸泡3 min、5 min、7 min,可取得满意的表面消毒效果。     

裂褶菌培养基形态学观察和DNA序列分析

目的通过观察裂褶菌在5种培养基上的生长状态、扫描电镜及DNA序列分析,了解该菌形态学及分子生物学等方面的特征。方法菌落转种于沙氏培养基(SDA),麦芽浸膏琼脂(MEA),马铃薯葡萄糖琼脂(PDA),玉米粉琼脂(CMA)和察氏琼脂(CZA)平皿培养基,27℃和37℃培养2周,观察菌落生长情况,进行扫描电镜检测及DNA序列分析。结果菌落在SDA,MEA和PDA上生长状态较好,呈蓬松白色羊毛状;尿素酶试验阳性,放线菌酮耐受试验阴性。光镜下见分支分隔菌丝、侧生的钉状突起及类水母体变异子实体。扫描电镜见菌丝分隔处闭锁联合、侧生钉状突起和泪滴状球形分泌物。经26S rDNAD1/D2区序列分析证实该菌株为裂褶菌。结论裂褶菌只有丝状型一种菌落形态;分支分隔菌丝及分隔处闭锁联合,侧生钉状突起和泪滴状球形分泌为其形态学特征;孢子由类水母状子实体产生。     

Pathogenicity and in vitro extracts inhibition of fungi causing severe leaf blight in Thaumatoccocus danielli (Benn.) Benth

Isolation and identification of fungi associated with severe leaf blight of Thaumatococcus danielli was conducted. The fungi were subjected to pathogenicity test in the screenhouse experiment. Laboratory assessment of antifungicidal activities of; Ficus asperifolia, Psidium guajava, Mormodica charantia and Anarcadium occidentales prepared at 25, 50 and 75?mg/mL concentrations against the three most virulent pathogens was carried out on PDA, V8 Agar, CZA, and MEA culture media. Data gathered were subjected to ANOVA. Aspergillus niger, A. flavus, Pythium sp., Penicillium sp., Fusarium oxysporum, Macrophomina phaseolina, Trichoderma viride, T. koniigi and T. harzianum were the fungi found associated with the diseased parts and the rhizospheric soil. M. phaseolina, A. flavus and A. niger were the most virulent obtained in the pathogenicity test. Growths of these pathogens were mostly inhibited by M. charantia as its efficacy increased with increase in the concentration levels. Mycelia growths were mostly supported by MEA medium.     

Comparison of four media for the isolation ofAspergillus flavus group fungi

Four agar media used to isolate aflatoxin producing fungi were compared for utility in isolating fungi in theAspergillus flavus group from agricultural soils collected in 15 fields and four states in the southern United States. The four media wereAspergillus flavus andparasiticus Agar (AFPA, 14), the rose bengal agar described by Bell and Crawford (BCRB; 3), a modified rose bengal agar (M-RB), and Czapek's-Dox Agar supplemented with the antibiotics in BC-RB (CZ-RB). M-RB was the most useful for studying the population biology of this group because it permitted both identification of the greatest number ofA. flavus group strains and growth of the fewest competing fungi. M-RB supported an average of 12% moreA. flavus group colonies than the original rose bengal medium while reducing the number of mucorales colonies and the number of total fungi by 99% and 70%, respectively. M-RB was successfully employed to isolate all three aflatoxin producing species,A. flavus, A. parasiticus andA. nomius, and both the S and L strains ofA. flavus. M-RB is a defined medium without complex nitrogen and carbon sources (e.g. peptone and yeast extract) present in BC-RB. M-RB should be useful for studies on the population biology of theA. flavus group.Abbreviations M-RB Modified Rose Bengal Agar - CZ-RB Czapeks Rose Bengal Agar - BC-RB Bell and Crawford's Rose Bengal Agar - AFPA Aspergillus flavus andparasiticus agar     

千层塔内生真菌的分离与鉴定

目的：为从千层塔中分离具有药用价值的内生真菌奠定基础。方法：新鲜千层塔茎段,经酒精和升汞消毒后,接种于PDA平板培养基上进行内生真菌的分离、纯化;根据菌落形态和孢子等形态特征,结合核糖体基因居间序列（ITS序列）进行菌株鉴定。结果：从千层塔的茎中分离出4株内生真菌。内生真菌I菌落形态和孢子特征与枝状枝孢霉属的特征相符合,ITS序列与GenBank中多条属于枝状枝孢霉的ITS序列相似,鉴定该菌株属于枝状枝孢霉;内生真菌II菌落形态和孢子特征与黄青霉的特征相符合,鉴定该菌株属于黄青霉;内生真菌III菌落形态和孢子特征与尖孢镰刀菌的特征相符合,ITS序列与GenBank中多条属于尖孢镰刀菌的ITS序列相似程度高,鉴定该菌株属于尖孢镰刀菌;内生真菌Ⅳ菌落形态与盾壳霉相似,ITS序列与GenBank中6条属于盾壳霉的ITS序列具有较高的相似性,鉴定该菌株属于盾壳霉。结论：从千层塔中分离和鉴定出4株内生真菌,分别属于枝状枝孢霉、黄青霉、尖孢镰刀茵和盾壳霉。     

春兰菌根的显微结构及菌根真菌的分离

以盆栽春兰和野生春兰的根为材料,通过切片观察菌根真菌的分布特点和菌根的显微结构。同时采用组织分离方法从盆栽和野生春兰根分别分离得到6个和15个真菌菌株,分离菌株的出现频率分别为16．7％～50％和6．7％～73．3％,并由此判断CGP-3为盆栽春兰菌根的优势菌种,CGW-3为野生春兰菌根的优势菌种。经形态学观察将其初步分为6个分类单元,其中CGP-2和CGW-2分别具有拟日本曲霉（Aspergillus japonicus-like）和拟木霉属（Trichoderma sp.-like）的形态特征。此外,对兰科棺物与内生真菌间的专一件讲行了讨论。     

AM真菌在煤矿废弃物中生态适应性的初步研究

以粉煤灰、草炭、蛭石、河沙为培养基质,分别对4种不同AM真菌:Glomus mosseae,G.diaphanum,G.intraradices和G.versiforme的生态适应性进行研究。结果表明,菌根的侵染率、孢子密度和菌丝长度分别与菌根真菌种类、培养基质状况及寄主植物种类有关。4种基质的扩繁效果顺序为:河沙>粉煤灰>草炭>蛭石。G.mosseae和G.diaphanum在基质中的产孢量和菌丝长度优于G.intraradices和G.versiforme,可作为优势菌株。4种菌根真菌在粉煤灰中对寄主的侵染率均达到60%以上,粉煤灰作为菌根真菌培养基质具有更大潜力和实际应用价值。     

春兰内生真菌的分离及其抑菌活性的初步研究

采用平板分离法从皖西大别山野生兰花的根、茎、叶中分离内生真菌32株,用琼脂块法对获取的菌株进行抑菌活性筛选,其中有4种兰花内生真菌对供试菌株有抑菌作用,占总分离菌株的12.50%,对抑菌活性较强的一株内生真菌进行形态学鉴定,结果表明它属于无孢类群。     

利用基本培养基初步筛选牛瘤胃中纤维素降解菌

目的初步筛选牛瘤胃中纤维素降解菌。方法分别采用基本培养基（牛肉膏蛋白胨培养基、马丁培养基）,利用好氧、兼性和厌氧3种不同的培养方法进行初选,初步分离牛瘤胃中的细菌与真菌,再通过复选培养基（加入微晶纤维素）,筛选降解纤维素的菌种。结果筛选分离出降解纤维素的1株厌氧细菌和1株厌氧真菌。结论此实验方法简单易行,能够有效地从牛瘤胃中筛选出生长良好的纤维素降解菌。