印度块菌(Tuber indicum)菌根促生细菌的研究

【目的】筛选对印度块菌菌根量和菌根苗长势有促进作用的菌根促生细菌(Mycorrhization helper bacteria,MHB)。【方法】选择华山松为宿主植物,自块菌菌根根际土壤中分离得到的11种细菌为供试菌株,将印度块菌菌剂与不同浓度的细菌混合于特定基质中后接种于华山松上,并通过对印度块菌与华山松形成的菌根数、华山松的株高和地径三方面的统计与分析,确认MHB。【结果】Pseudomonas sp. JCM 5481 (P143)、Streptomyces sp. EN31 (S191)、Variovorax paradoxus (V633)在浓度为2.4×109 CFU/mL时对印度块菌菌根数、株高和地径均有极显著促进作用(P<0.01);Pseudomonas chlororaphis (P11)、Pseudomonas corrugate (P127)在浓度为0.8×109 CFU/mL时对印度块菌菌根数、株高和地径均有显著促进作用(P<0.05)。4种假单胞菌浓度梯度的设置显示了不同菌株适宜的浓度不同。【结论】实验获得5种MHB,并表明细菌浓度是获得MHB的一个重要影响因素。     

云南食用菌资源应用开发前景与展望

从栽培食用菌和野生食用菌两方面综述了云南食用菌的资源状况 ,通过对云南食用菌研究、开发现状的总结 ,就其存在的问题提出了相应的建议。简述了食用菌资源在云南应用开发中的广阔前景 ,并提出可持续利用发展的战略。     

云南干巴菌子实体内可培养微生物

【背景】微生物在菌根真菌的孢子萌发、菌丝体生长、菌根形成以及子实体发育等过程中起到一定作用。【目的】对采自云南省昆明市嵩明县和楚雄彝族自治州禄丰县的8个干巴菌子实体内的微生物进行分离培养鉴定,为后期研究微生物与干巴菌之间的相互作用奠定基础。【方法】采用传统平板分离法从干巴菌子实体内分离获得微生物群落,t检验分析不同地区采集的干巴菌子实体内微生物菌落总数的差异,16S r RNA基因和ITS序列进行系统发育树构建和微生物多样性分析。【结果】采自嵩明县和禄丰县的8个干巴菌子实体内共分离获得282株可培养的细菌,两个地区的细菌菌落总数无显著差异(P=0.22)。所有细菌分属2门12属15种。其中80%的细菌属于变形菌门,且以γ-变形菌为优势菌群,假单胞菌属(Pseudomonas)为优势菌属。其余20%的细菌属于拟杆菌门。从干巴菌子实体中分离获得114株真菌,两个地区的真菌菌落总数无显著差异(P=0.65)。所有真菌分属2门10属10种。其中62%的真菌属于子囊菌门(Ascomycota),并以分离自禄丰县干巴菌子实体内的Lophiostoma为优势属。38%的真菌属于担子菌门(Basidiomycota),并以Asterotremella为优势属。【结论】两个不同地区采集的干巴菌子实体内细菌和真菌在菌落总数上无显著差异。所有细菌都以γ-变形菌为优势菌群,假单胞菌属为优势菌属。嵩明干巴菌子实体内真菌以担子菌门为优势菌群,Asterotremella为优势属。而禄丰干巴菌子实体内真菌则以子囊菌门为优势菌群,Lophiostoma为优势属。     

云南松幼苗上红菇类菌根真菌的物种多样性及其菌根形态

以滇中1～2年生云南松幼苗为研究对象,观察鉴定与其共生的红菇属真菌外生菌根。形态观察发现了6种形态型（morphotypes）。本文对这6种形态型的外观和显微特征进行了详细描述,尤其强调了菌套形态特征。对rDNAITS片段比对分析表明,6种形态型对应6种红菇属真菌,它们分别是与Russula li-vescens、R.violeipes、R.densifolia、R.nigricans、R.sanguinea及R.nauseosa相近的红菇种类。本研究表明,形成的菌根及其菌套和囊状体的特征在红菇属真菌的系统分支间表现出较为稳定的差异。这一研究与前人对该属真菌的菌根形态及分类学研究基本吻合。红菇属真菌是云南松1～2年幼苗期的主要共生真菌类群。     

中国大型高等真菌生物多样性的关键类群

由于生物多样性的关键类群在科学研究、社会经济及生态系统中所处的重要地位,有必要对其进行筛选和确定。在多年的野外考察和有关文献资料分析的基础上,参照植物和动物关键类群的划分原理及方法,结合高等真菌的特点将大型高等真菌划分为3种类型：濒危类群、重大科学价值类群和重要经济类群。其中,濒危类群指在近年的考察和报告中发现的数量急剧减少或由于过度的采集资源明显受到威胁的种类,其中有虫草属(Cordyceps)的中华虫草(C．siaensis)、块菌属(Tuber)的中华块菌(T．sinense)、假下陷块菌(T．pseu—doexcawatum)、喜马拉雅块菌(T.himalayense)、革菌属(Thelephora)的干巴菌(T．ganbajun)、口蘑属的松茸(Tricholoma matsuatke)及其近缘种和蒙古口蘑(T．mongolicum);重大科学价值类群指在真菌系统演化或与动、植物和其它真菌协同进化中的一些重要类群,或在应用研究领域具重要价值的类群,如鸡Zong菌属(Termitomyces)、鹅膏属(Amanita)、腹菌与伞菌的过渡类型如地红菇属(Macowanites)、粉褶包属(Richoniella)、轴腹菌属(Hydnangium)、腹牛肝菌属(Gastroboletus)等、牛肝菌类中的一些特殊单种属和寡种属如圆花孢牛肝菌属(Heimiel-la)、圆孔牛肝菌属(Gyroporus)等;重要经济类群指广为利用的食用菌、药用菌和外生菌根菌,其中主要有虫草属的中华虫草、块菌属的中华块菌、鸡Zong菌属盾尖鸡Zong菌(T．dypeatus)、鸡Zong菌(T.ewrhizus)、球形鸡Zong菌(T．gtoulus)、口蘑属的松茸群及蒙古口蘑、牛肝菌属(Bolaus)的美味牛肝菌(B．edulis)、小美牛肝菌(R．speciosus)、茶褐牛肝菌(B．brunneissimus)等,乳菇的红汁乳菇(L,hatsudake)、松乳菇(L．deliciosus)、多汁乳菇(L．volemus）、红菇属的变绿红菇(R．vir-escens)、蓝黄红菇(R．cyanoxantha)、鹅膏属的红黄鹅膏(A．hemibapha)、隐花青鹅膏(A．mang-iniana)、灵芝属(Ganoderma)的灵芝(G,lucidum)及紫芝(G,sinense)、竹荪属(Dictyophora)、豆马勃属(Pisdithus)的一些种。这些种由于具有重要的经济价值而受到过度的采集,故往往与濒危的种类一致。关键类群的筛选与提出为大型高等真菌的研究、应用和保护提供参考。     

外生菌根合成过程中外源竞争性真菌及其菌根形态

在温室内,利用松属Pinus、栎属Quercus植物幼苗分别与乳菇属Lactarius、块菌属Tuber中重要食用菌进行菌根合成过程中,发现有9种外源竞争性菌根真菌exogenous competitive mycorrhizal fungi （ECMF）会造成宿主植物污染。形态解剖和分子生物学鉴定结果表明,9种ECMF分属5个属（Amphinema、须腹菌属Rhizopogon、硬皮马勃属Scleroderma、小球孢盘菌属Sphaerosporella、乳牛肝菌属Suillus）5科（阿太菌科Atheliaceae、须腹菌科Rhizopogonaceae、硬皮马勃科Sclerodermataceae、火丝菌科Pyronemataceae、乳牛肝菌科Suillaceae）,其中,造成松树苗污染的主要为Amphinema、Rhizopogon和Suillus属的种类,造成栎树苗污染的主要为Scleroderma属的种类,而Sphaerosporella属的种类既能污染松也能污染栎。同时,对ECMF形成菌根的形态与解剖特征进行了描述,以期为菌根合成过程中ECMF污染的识别与控制提供借鉴。     

两种乳菇菌丝生长的最适培养基与菌根合成

通过测量菌丝直径和干重对松乳菇（rcb-74）和靓丽乳菇（rll-107,rmsh-118）进行最适菌丝生长培养基的筛选。结果表明所有菌株均在改良的biotin-aneurine-folic acid（BAF）培养基上表现出较大的菌丝直径以及最大菌丝干重。用改良的BAF培养基制备乳菇液体菌丝,接种云南松、马尾松和油松,并在13-30d后发现rcb-74与云南松和油松形成菌根,rll-107与马尾松形成菌根,rmsh-118与云南松形成菌根。     

外生菌根研究及应用的回顾与展望

简要回顾了一百多年来外生菌根研究史;综述了外生菌根资源调查。分类鉴定,生态,生理,分子生物学以及生物技术研究与应用诸方面的阶段性成果和进展,通过对外生菌根研究与应用现状的归纳与分析,就我国菌根研究与应用等方面存在的主要问题提出了以下4点建议;1,加强菌根资源的系统调查;确认对应植物属种,进行编目与建立数据库以及菌根DNA文库。2,采集与收集菌根真菌,进行分离,培养,繁育与保藏,建立菌根真菌菌种库和DNA文库,3,加强菌根技术研究,侧重研究造林树种菌根化育苗和造林的新技术,新工艺,4,改革传统的育苗与造林的方式,方法,选育对应的优良菌根真菌菌株应用于育苗造林;制定相关的政策,法规以规范和推广菌根技术。     

云南松(Pinus yunnanensis)林外生菌根真菌的时空分布

2000年至2005年,调查了滇中及其附近云南松林下外生菌根真菌的生态分布,共采集、鉴定标本834号,计有27科39属211种（含变种、变型）。结果表明,红菇属（Russula）、牛肝菌属（Boletus）、乳菇属（Lactarius）、乳牛肝菌属（Suillus）、口蘑属（Tricholoma）、鸡油菌属（Cantharellus）和革菌属（Thelephora）等为云南松林下的主要外生菌根菌类群。它们的发生与分布受到气候（如：气温和降水）、植被（如：林龄、林地郁闭度和草本植被）、地形特征（如：海拔、坡向和坡度）、土壤条件（如：pH值、地表腐殖质和枯枝落叶层等）和人为干扰（比如：商业化采集、林木采伐、火烧和地表物清理）诸多因素的影响。总结为如下：（1）5a的调查结果显示,云南松外生菌根菌的分布表现出季节性变化的规律;其中以每年1、2、3月份的物种多样性为最低,雨季期间急剧增加,至中夏和秋末达到顶峰,种类最为繁多。（2）在海拔1500-2100m,云南松外生菌根菌种类随着海拔的升高而逐渐增加,至顶峰后,又呈缓慢下降趋势。海拔因素不但对其物种多样性,而且对于类群的组成也具有重要的影响。特定的类群往往发生在特定海拔范围。（3）随着云南松林龄的增加,外生菌根菌呈现由少至多的演替过程。外生菌根菌多样性随云南松林生长而逐渐增加的演替方式,可能与宿主光合作用产物、根部分泌物和土壤条件的逐渐变化有关。（4）人类干扰是云南松外生菌根菌物种多样性和类群组成的主要负影响因子。大规模的商业化采集可破坏或枯竭地下菌丝体,打破各物种之间的竞争平衡,减少孢子释放影响资源再生能力,进而直接影响到子实体的产生。外生菌根菌物种多样性的减少趋势会随林木砍伐和火烧强度的增加而加剧。地表枯枝落叶层与杂草密度也会影响子实体的产生,其中枯枝落叶层的厚度与云南松外生菌根菌子实体的发生呈负相关性,而被紫茎泽兰覆盖的云南松林地内也很少会发现相应的子实体。     

早期真菌与本土和外来松的菌根合成

为探讨早期真菌与本土和外来松树的共生特性,选用3种早期外生菌根真菌(环褐乳牛肝菌Suillus luteus、虎皮乳牛肝菌S. phylopictus和酒红蜡蘑Laccaria vinaceoavellanea)接种2种本地松(云南松Pinus yunnanensis、华山松P. armandii)和2种外来松(P. greggii、P. maximartinensis),并对接种后的侵染率、菌根特征和松苗株高等进行测量和分析,结果显示：6个月后,2种乳牛肝菌与4种松均能形成菌根,华山松与2种乳牛肝菌的亲和性最好,酒红蜡蘑仅能与2种外来松P. greggii和P. maximartinensis形成菌根,且菌根合成成功率仅为14.3%。此次合成的10种菌根组合均为首次报道,其中同一种真菌与不同松形成的菌根在形态和解剖特征上较为接近。3种真菌对宿主生长的促进作用因树种而异,整体上外来松苗的生长速率要快于本土松苗;华山松苗虽然菌根感染率最高,但生长效应却均不明显。研究认为：孢子接种对乳牛肝菌、蜡蘑等早期真菌的菌根合成研究是一种经济有效的手段;外生菌根真菌可能对外来树种具有更为重要的作用,与本土树种相比,外来树种与外生菌根真菌在能否形成菌根、菌根形成时间以及对宿主的生长效应等方面存在差异,需要开展进一步深入的相关研究。