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目的:建立一种适用于大量制备的,安全、高效的血红蛋白纯化方法。方法: 将压积红细胞装入透析袋,以含有还原剂的Tris缓冲液透析破碎,破碎的上清经两级硫酸铵沉淀后透析至上样缓冲体系,离心后取上清即得血红蛋白提取液;红细胞提取液通过阴离子交换柱层析进一步分离,计算回收率。纯化产物浓缩后以SDS-PAGE及HPLC鉴定纯度,进行紫外-可见光谱扫描并以ABL800血气分析仪分析血气指标,以鲎试剂测定内毒素含量,以磷测定法测定脂质含量。结果: 血红蛋白提取液中脂质去除率98%,容易通过0.45μm滤膜;经阴离子交换层析纯化的血红蛋白经SDS-PAGE(银染法)及WB分析没有杂蛋白条带,HPLC分析纯度>99%、总回收率>85%;内毒素含量<2 EU,高铁血红蛋白含量<5%。结论: 该血红蛋白纯化方法安全高效、成本低廉、易于放大生产,具有较好的应用前景。 相似文献
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茼蒿总黄酮提取及对羟自由基清除作用 总被引:9,自引:0,他引:9
采用超声波乙醇浸提法从茼蒿中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用分光光度法测定含量,用茼蒿总黄酮对羟自由基清除作用进行试验。测得样品中总黄酮的含量C=0.169 0 mg/mL,回收率为101.3%,其纯度和产率均较高。该方法采用全物理过程,无任何污染,是提取茼蒿黄酮类物质的有效途径。茼蒿总黄酮提取液对Fenton体系产生的.OH自由基有很好的清除作用。 相似文献
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麦冬根中总RNA的快速提取 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:从富含多糖、多酚的麦冬根部组织中快速提取总RNA。方法:采用改进的苯酚法,提取液的配制为5%SDS、1mol/LNaAc(pH4.1)、20%HAC、0.1%PVP。结果:采用该方法提取的麦冬总RNA纯度高、完整性好,电泳条带清晰。通过琼脂糖凝胶电泳与紫外吸光度测定产量与纯度,麦冬根部组织总RNA的吸光值D260nm/D280nm值大于1.8,D260nm/D230nm值大于2.0,麦冬块根与不定根RNA的平均产量分别为79.716和76.144μg/g(鲜重)。结论:用本方法提取的RNA可用于后继的抑制消减杂交试验。 相似文献
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高速逆流色谱法分离制备丹酚酸B 总被引:15,自引:0,他引:15
采用高速逆流色谱法分离纯化丹参水溶性成分丹酚酸类物质,制备丹酚酸B化学对照品。分离采用的溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-水-甲醇(1.5:5:5:1.5),上相做固定相,下相做流动相,流速为1.7 mL/min,仪器转速850 rpm,进样量80 mg,纯度用HPLC方法测定。结果表明:一次分离可制备63.4 mg丹酚酸B,其纯度为98.6%。该方法操作简单,可作为高纯度丹酚酸B化学对照品的制备分离方法。 相似文献
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从银杏(Ginkgo biloba L.)的根、茎、叶中共分离得到18株内生真菌,用显色反应、薄层层析(TLC)及紫外-可见分光光度法对发酵提取液进行分析并筛选得到一株产黄酮类物质的内生真菌(编号ROOT3.1),经形态学和分子生物学初步鉴定其为镰孢属黄色镰孢菌(Fusarium culmorum).对此菌株发酵液中的黄酮含量进行了测定,其含量为0.017 2 mg·mL-1. 相似文献
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絮凝-膜法制备皂荚皂苷工艺研究 总被引:1,自引:0,他引:1
对皂荚种皮皂苷进行水法提取,采用阳离子瓜尔胶对提取液进行絮凝,再通过超滤、纳滤进行分离,制备获得的皂苷纯度为87.3%.研究认为,提取液中的皂苷与多糖、蛋白等杂质结合紧密,而阳离子瓜儿胶对杂质具有良好的选择性,因而絮凝处理是保证膜法分离过程的关键,其二者联用显示出良好的应用前景. 相似文献
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目的,以猪肺为原料,提取能把游离的L-脯氨酸羟化脯氨酸的羟基化酶。方法:把新鲜猪肺在提取液中低温高速匀浆,然后用4000r/min离心分离20min,取上清液进一步用8000r/min高速离心后,分别用盐析和有机溶剂的方法提取羟基化酶;结果;不同的方法都得到棕色的固体。经电泳测定该固体纯度高,溶于水中后能把游离的L-脯氨酸羟化为L-羟脯氨酸。测定其分子量约为66.000;等电点约为4。结论:所采用的提取工艺流程具有简单,效率高和实用的特点,且猪肺便宜,易得,适合较大规模的制备。 相似文献
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测定荔枝核中的游离氨基酸 总被引:2,自引:1,他引:1
采用氨基酸自动分析仪测定荔枝核水提取液、醇提取液样品。在醇提取液中游离氨基酸的含量高于水提取液,在两种提取液中共检出了21种游离氨基酸(其中4种为未知氨基酸,6种必需氨基酸);已知游离氨基酸的质量分数为307μg.kg-1(醇提取液)和269μg.kg-1(水提取液),总游离氨基酸的质量分数为500μg.kg-1,必需氨基酸的量占总游离氨基酸量的44%。结论:荔枝核中的游离氨基酸具有利用价值。 相似文献
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视网膜神经节细胞的纯化和体外存活 总被引:1,自引:0,他引:1
我们用特异性抗体Thy1.1结合尼龙筛方法分离和纯化新生大鼠视网膜神经节细胞,比较顶盖提取液对这些纯化细胞的作用。预先以快蓝(fast blue,FB)逆行标记的视网膜细胞悬液,接种在包被了Thy1.1抗体的培养皿上30分钟,冲洗未粘附的细胞,显微镜下计数粘附细胞中FB标记的视网膜神经节细胞纯度的百分比,最高为95%。用孔径15μm尼龙筛方法分离的纯度仅为60±5%。上述两种方法纯化的视网膜神经节细胞,仅在有顶盖提取液存在时,细胞存活并生长活跃,胞体大且有突起伸出。MTT微量比色法测定培养24小时纯化细胞存活的光密度(OD)值,显示以Thy1.1特异性抗体纯化的细胞,其OD值比值(+Te/-Te)是12.3(0.111/0.009);以尼龙筛纯化的OD值比值(+Te/-Te)是6.4(0.102/0.016);未经纯化的OD值比值(+Te/-Te)是3.8(0.095/0.025)。在上述三组中,加Te与无Te细胞生存的OD值比较,相差均非常显著(P<0.01)。结论:在纯化的视网膜神经节细胞的培养中,由于排除了其他细胞所引起的非特异性反应,神经节细胞能够更直接地反映顶盖提取液的生物效应;视网膜神经节细胞纯度越高,其作用越显著。 相似文献
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膜技术纯化菊花总黄酮的工艺研究 总被引:2,自引:0,他引:2
研究膜分离技术分离纯化菊花黄酮的工艺,以菊花总黄酮纯度和操作过程稳定性为评价指标,采用膜分离技术对菊花提取液进行处理,对膜的规格、溶液温度、操作压力和操作时间进行了优选。结果表明:选择孔径0.5μm无机陶瓷膜,在溶液温度50℃、操作压力0.25 MPa条件下,微滤180 min能达到较好地除杂和澄清的效果;选择截留分子量为8×103的超滤膜,在溶液温度40℃、操作压力1.6 MPa条件下,超滤120 min,总黄酮纯度为19.81%。采用膜技术纯化菊花总黄酮的工艺操作简单,纯化效果高。 相似文献
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目的:研究红果龙葵茎、叶的水和乙醇提取液对常见微生物的抑菌作用。方法:制备红果龙葵茎和叶的水和乙醇提取液,用平板打孔法测定抑菌圈的方法,测定提取液对5种细菌的抑菌作用。结果和结论:红果龙葵茎和叶的水提取液和乙醇提取液对5种细菌有明显的抑制作用,乙醇提取液对5种细菌的抑菌作用强于水提取液;各提取液都显示出最低抑菌浓度和最低杀菌浓度。 相似文献
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文章采用碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定土壤提取液中的总氮,并与连续流动分析法、TOC/TN分析法进行了对比。结果表明,对于不同提取剂浸提的土壤溶液中的总氮,三种方法测定结果一致性良好,不存在显著性差异(P0.05),测定结果准确可靠。 相似文献
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在这篇论文中,引用了在不同生长期内马铃薯块茎提取液水解作用与磷酸化作用以及合成酶与磷酸葡萄糖变位酶活性的研究材料。用马铃薯块茎製备提取液,在两个时期来研究该提取液:第一次是在七月,即马铃薯开花的时候,那时马铃薯具有小的块茎;第二次是在收穫之後,与测定磷酸化酶和磷酸葡萄糖变位酶的活性的同时,测定块茎中澱粉含量,而且在提取液中测定还原性物质的含量。试验是用三个马铃薯品种进行的,即“劳尔赫”、“普列斯库里斯基”和“十月儿童”。对块茎提取液磷酸解作用的研究表明:块茎提 相似文献
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目的了解中药野菊花和山楂核提取液对宫颈常见病原体大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的抑菌效果,比较野菊花和山楂核提取液抑菌作用的效果。方法采用二倍稀释法药敏试验测定抑菌浓度(MIC)。结果野菊花、山楂核提取液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌有不同程度的抑菌效果,三种菌的总抑菌效果差异具有统计学意义(χ2=21.781,P=0.00000.05),四种浓度药物的实验,两两比较后得出山楂核提取液的抑菌效果更好,抑菌率明显高于野菊花组,差异有统计学意义(χ2=8.6660,P=0.00300.05)。结论野菊花、山楂核提取液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌有不同程度的抑菌效果,山楂核提取液的抑菌效果更好。 相似文献