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视网膜神经节细胞的纯化和体外存活
引用本文:赵丽萍,周明华.视网膜神经节细胞的纯化和体外存活[J].分子细胞生物学报,1991(3).
作者姓名:赵丽萍  周明华
作者单位:第四军医大学组织学与胚胎学教研室,香港大学医学院解剖学系 西安
基金项目:香港大学、医学院、裘槎科研金
摘    要:我们用特异性抗体Thy1.1结合尼龙筛方法分离和纯化新生大鼠视网膜神经节细胞,比较顶盖提取液对这些纯化细胞的作用。预先以快蓝(fast blue,FB)逆行标记的视网膜细胞悬液,接种在包被了Thy1.1抗体的培养皿上30分钟,冲洗未粘附的细胞,显微镜下计数粘附细胞中FB标记的视网膜神经节细胞纯度的百分比,最高为95%。用孔径15μm尼龙筛方法分离的纯度仅为60±5%。上述两种方法纯化的视网膜神经节细胞,仅在有顶盖提取液存在时,细胞存活并生长活跃,胞体大且有突起伸出。MTT微量比色法测定培养24小时纯化细胞存活的光密度(OD)值,显示以Thy1.1特异性抗体纯化的细胞,其OD值比值(+Te/-Te)是12.3(0.111/0.009);以尼龙筛纯化的OD值比值(+Te/-Te)是6.4(0.102/0.016);未经纯化的OD值比值(+Te/-Te)是3.8(0.095/0.025)。在上述三组中,加Te与无Te细胞生存的OD值比较,相差均非常显著(P<0.01)。结论:在纯化的视网膜神经节细胞的培养中,由于排除了其他细胞所引起的非特异性反应,神经节细胞能够更直接地反映顶盖提取液的生物效应;视网膜神经节细胞纯度越高,其作用越显著。

关 键 词:神经细胞纯化  视网膜神经节细胞  顶盖提取液  神经细胞诱向(营养)因子  MTT微量比色法

PURIFICATION AND SURVIVAL OF RETINAL GANGLION CELL
Zhao Li-ping and Zhou Ming-hua.PURIFICATION AND SURVIVAL OF RETINAL GANGLION CELL[J].Journal of Molecular Cell Biology,1991(3).
Authors:Zhao Li-ping and Zhou Ming-hua
Abstract:
Keywords:Neuron purification  Retinal ganglion cell  Tectal extract  Neuronotrophic factor  MTT colorimetric microassay  
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