一种安全高效的血红蛋白纯化方法

目的:建立一种适用于大量制备的,安全、高效的血红蛋白纯化方法。方法: 将压积红细胞装入透析袋,以含有还原剂的Tris缓冲液透析破碎,破碎的上清经两级硫酸铵沉淀后透析至上样缓冲体系,离心后取上清即得血红蛋白提取液;红细胞提取液通过阴离子交换柱层析进一步分离,计算回收率。纯化产物浓缩后以SDS-PAGE及HPLC鉴定纯度,进行紫外-可见光谱扫描并以ABL800血气分析仪分析血气指标,以鲎试剂测定内毒素含量,以磷测定法测定脂质含量。结果: 血红蛋白提取液中脂质去除率98%,容易通过0.45μm滤膜;经阴离子交换层析纯化的血红蛋白经SDS-PAGE(银染法)及WB分析没有杂蛋白条带,HPLC分析纯度>99%、总回收率>85%;内毒素含量<2 EU,高铁血红蛋白含量<5%。结论: 该血红蛋白纯化方法安全高效、成本低廉、易于放大生产,具有较好的应用前景。     

甾体-卟啉化学的研究——Ⅰ.雌甾-卟啉化合物的合成及炔雌醇-卟啉生理活性的研究

本文合成了8个新的雌甾-卟啉化合物。首次对炔雌醇-卟啉的生理活性进行了初步研究。     

雌甾—金属卟啉的合成及其催化性质的研究

合成了雌酚酮—卟啉及其钴络合物,研究了其催化氧化异丙苯的动力学,用Lineweave-Burk法求得动力学参数V_(max)=5.506×10~(-3),K_m=6.081×10~(-2)和K_2=25.37。     

GnRH类似物对培养的大鼠胃平滑肌细胞蛋白激酶C活性的影响

研究GnRH类似物阿拉瑞林（Alarelin)对大鼠胃平滑肌细胞蛋白酶C（PKC）活性的影响,采用放射性同位素法测定PKC的活性,发现：（1）阿拉瑞林可使培养的大鼠胃平滑肌细胞中PKC活性明显升高,3min时达高峰,10min后作用显著降低,且成剂量依赖性。当阿拉瑞林为10^-5mol/L时,PKC活性最高,10^-9mol/L时其对PCK的作用基本消失;（2）当用佛波醇酯（phorbol 12 myristate 13-acetate,PMA)短期作用激活PKC后,再加入阿拉瑞林,仍可使PKC活性略有升高,但无显著性差异;当用PMA长期持续作用耗PKC后,再加入阿拉瑞林作用3min,它不能激活PKC,与单纯的阿拉瑞林作用3min组相比差异显著;（3）在无外Ca^2 时,阿拉瑞林也可使PKC活性升高,但不如单独用阿拉瑞林作用3min组的高。因此PKC活性的增高,并不完全依赖细胞外Ca^2 ,它可以动员胞内Ca^2 的释放激活PKC,说明GnRH类似物可使胃平滑肌细胞中PKC活性增加,PKC参与阿拉瑞林对胃平滑肌细胞调控的信号转导过程。     

一种后生元工艺优化及抑菌特性的研究CSCD

目的 优化后生元的制备工艺,分析后生元发酵液中有机酸成分,探究其抑菌特性。方法 通过单因素和响应面试验法对后生元的制备进行优化,应用高效液相色谱仪分析后生元的有机酸成分,利用牛津杯琼脂扩散法探究后生元抑菌特性。结果 后生元制备工艺选择发酵时间20 h、发酵温度37℃和初始pH值6.2为最优条件,发酵上清液pH值为3.4。后生元发酵上清液中的有机酸中总量为4 974.68 mg/L,苹果酸含量(2 783.55 mg/L)占比最高。后生元经过稀释溶解处理后,对阴道加德纳菌、白色念珠菌、大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌均呈现抑制作用。结论 后生元具有明显的抑菌作用,有望用于抑菌作用产品的开发,为致病菌引起的疾病防治药物的筛选提供了新方向。