细菌L型感染荷瘤小鼠肿瘤组织中癌基因蛋白的表达

本文探讨了金葡菌Ｌ型和结核菌Ｌ型感染荷瘤小鼠癌基因Ｐ２１、Ｐ５３及Ｃ－ｅｒｂＢ－２产物的表达。结果发现感染小鼠上述癌基因产物水平较对照组小鼠明显升高（０．０１＜Ｐ＜０．０５）;实验组ＰＣＮＡ阳性细胞指数高于对照组（Ｐ＜０．０５）;荷瘤感染小鼠存活期缩短,自发性肿瘤增多（Ｐ＜０．０５）。提示细菌Ｌ型感染与肿瘤的发生、发展有关。     

PCNA和BCG在膀胱肿瘤及炎症中的表达

应用抗酸（ＩＫ）染色和结核菌抗体（ＢＣＧ）、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）免疫组化染色方法,对１１９例膀胱肿瘤及炎症进行了检测。结果显示：ＩＫ抗酸染色、ＢＣＧ免疫组化染色阳性率分别为：膀胱癌为３５２、３６７％;乳头状瘤为４０％、４４％;慢性炎为４２３％、５０％。ＰＣＮＡ阳性细胞指数膀胱癌与粘膜慢性炎比较差异非常显著（Ｐ＜０００１）;乳头状瘤与慢性炎比较差异显著（Ｐ＜００５）。提示结核菌Ｌ型感染与肿瘤的发生和发展可能有关     

肺活检材料的4种肿瘤标记物表达及与肺癌预后的关系

应用增殖细胞核抗原 （ＰＣＮＡ）、ｒａｓ－ Ｐ２１、Ｐ５３ 单克隆抗体和ＣｅｒｂＢ２ 多克隆抗体, 对７１ 例肺癌的纤支镜活检标本和１０ 例正常肺组织进行免疫组织化学染色研究。结果发现： １０ 例正常肺组织均为阴性表达。７１ 例肺癌中, 上述４ 种抗体的阳性表达率分别为： ７０４２％ 、８０２８％ 、５６３４％ 和８１６９％ 。除ＣｅｒｂＢ２ 与肺癌分型相关外, 均与肺癌分型、分化及ＴＮＭ 分期无关。但与预后均呈负相关。结果表明： 上述４ 种抗体是有效的、可作为判断肺癌预后的肿瘤标记物     

ras和c-erbB癌基因在特发性肺间质纤维化中的表达

采用原位分子杂交技术和免疫组织化学方法,对８例临床与肺组织学确诊的特发性肺间质纤维化（ＩＰＦ）病人的肺活检组织及７例正常肺组织进行了ｒａｓ和ｃ－ｅｒｂＢ癌基因及其产物的检测。结果：ｒａｓ癌基因产物Ｐ２１在６／８例ＩＰＦ肺组织中呈阳性反应;５／８例ＩＰＦ肺组织ｃ－ｅｒｂＢ－２显免疫阳性反应,而在７例正常肺组织Ｐ２１及ｃ－ｅｒｂＢ－２均无明显表达,原位杂交结果显示ＩＰＦ肺组织没有明显ｒａｓ和ｃ－ｅｒｂＢ癌基因的ＤＮＡ扩增提示ＩＰＦ的病变过程与ｒａｓ和ｃ－ｅｒｂＢ癌蛋白表达增强有关     

前列腺增生症中抗酸菌L型检出及其意义

本文用ＩＫ抗酸染色和免疫组化染色等方法对４９例前列腺增生症进行了研究。结果发现：４９例前列腺增生症中,３０例（６１２％）抗酸菌Ｌ型阳性,其中前列腺增生症Ｉ型中抗酸菌Ｌ型检出率最高（８３３％）;６０％抗酸菌Ｌ型主要分布于前列腺上皮细胞浆内,其中４３３％腺上皮细胞呈空泡样变性,颇似凹空样细胞;抗酸菌Ｌ型阳性病例中前列腺间质内炎细胞浸润明显高于Ｌ型阴性病例,Ｐ＜００２５。提示抗酸菌Ｌ型感染不仅是引起前列腺间质炎症反应的重要原因,炎症过程中可产生的活性物质可能也是导致前列腺增生不可忽视的原因之一。     

乳腺癌c－erb B－2表达与细胞形态定量及DNA含量的关系

应用免疫组织化学及图像分析技术对５０例乳腺癌的ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因表达与细胞形态定量及ＤＮＡ含量的关系进行了分析。结果显示：（１）ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性乳腺癌细胞平均ＤＮＡ含量及倍体数明显高于ｃ－ｅｒｂＢ－２阴性者,且以非二倍体细胞为主;（２）ｃ－ｅｒｂＢ－２阴性乳腺癌细胞平均核面积（ＮＡ）、核周长、核直径及核浆比例均大于ｃ－ｅｒｂＢ－２阴性者。术后５年内死亡的ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性乳腺癌细胞ＮＡ值最大,ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性且有淋巴结转移者细胞ＮＡ值亦较大,核形状因子偏离“１”更远。表明ｃ－ｅｒｂＢ－２表达与乳腺癌细胞的分裂及分化关系密切。     

结核菌L型在肺癌发病中的作用初探

为探讨结核菌Ｌ型在肺癌发生中的作用,对８４５例纤维支气管镜刷检涂片行抗酸染色,并进行结核菌及其Ｌ型的液体培养,发现肺癌组Ｌ型检出率高于对照组（Ｐ＜００５）;但与结核组间无明显差异（Ｐ＞００５）,肺癌组细菌型检出率显著低于结核组（Ｐ＜００５）,但与对照组间无明显差异（Ｐ＞００５）;在肺癌组中,腺癌的结核菌Ｌ型检出率分别较其它类型癌高（Ｐ＜００５）,但各类癌间的结核菌细菌型检出率无明显差异（Ｐ＞００５）。结果提示,结核菌尤其Ｌ型与肺癌特别是肺腺癌的发生可能有一定的关系。     

乳腺癌HSV—1,HSV—2与c—erbB—2的免疫组化研究

采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法检测５２例手术切除乳腺癌组织ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２表达情况。结果发现癌组织中ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性３４例（６５．４％）;ＨＳＶ－１阳性３８例（７３．１％）;ＨＳＶ－２阳性１５例（２８．８％）。癌旁组织３２例,阳性分别为３例（９．４％）;１２例（３７．５％）;２例（６．３％）。乳腺癌中ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性率明显高于癌旁组织。乳腺癌及癌旁的ＨＳＶ－１阳性率明显高于ＨＳＶ－２,乳腺癌ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性组中ＨＳＶ－１和ＨＳＶ－２的表达有显著差异,而在阴性组二者无差异,提示乳腺癌的发生可能和ＨＳＶ－１感染密切相关,ｃ－ｅｒｂＢ－２表达也可能和ＨＳＶ－１感染有关。     

c—erbB2对大鼠黄体细胞hCG诱导的孕酮分泌的影响

采用离体细胞体外孵育法,研究反义ｃ－ｅｒｂＢ２寡脱氧核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｃ－ｅｒｂＢ２ ＯＤＮ）对大鼠黄体细胞ｈＣＧ诱导的孕酮分泌的影响,及其与外源性ｃＡＭＰ和Ｃａ＾２＋以及蛋白抑制剂放线菌酮（ＣＹＸ）之间的关系。结果表明,反义ｃ－ｅｒｂＢ２以剂量相关方式抑制黄体细胞ｈＣＧ诱导的孕酮的产生,同时使ｃ－ｅｒｂＢ２蛋白染色阳性的黄体细胞百分数下降,无义ｔａｔ ＯＤＮ没有相应的作用。１０＾－４     

乳腺肿瘤中抗酸菌L型感染的研究

用ＩＫ抗酸染色和卡介苗抗体免疫组化染色等方法对乳腺癌（９７例）,和乳腺纤维腺瘤（２１例）进行了研究。结果发现Ｌ型阳性例数在乳腺癌和乳腺纤维腺瘤间无显著差异（Ｐ〉０．０５）。乳腺癌中抗酸菌Ｌ型主要分布于癌细胞巢及其间质内,常集聚成堆,且该处癌细胞有不同程度变性或坏死。乳腺纤维腺瘤中的抗酸菌Ｌ型主要存在于间质巨噬细胞中。并讨论了抗酸菌Ｌ型感染与乳腺癌发生的可能关系。     

乙型肝炎、肝硬变和肝癌中HBxAg的表达及其在肝癌发生中的作用

对３７９例良、恶性肝组织进行的免疫组织化学研究显示,３３％的慢性迁延性肝炎（６／１８）、７６％的慢性活动性肝炎（２６／３４）、９２％的肝硬变（５７／６２）和９７％的肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）（５８／６０）中有ＨＢｘＡｇ表达,阳性率高于ＨＢｓＡｇ或ＨＢｃＡｇ。癌周肝中的ＨＢｘＡｇ阳性率显著高于非癌周肝。与其它２种ＨＢＶ抗原不同,ＨＢｘＡｇ表达在细胞类型上有较明显的选择性,在肝小多角细胞（ＳＰＬＣ）、小细胞性不典型增生（ＳＣＤ）及ＨＣＣ中较强。与ＩＧＦⅡ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｃ－ｍｙｃ和ＥＧＦ－Ｒ表达进行的对照研究表明ＨＢｘＡｇ与ＩＧＦⅡ和ｃ－ｅｒｂＢ－２这２种ＨＣＣ发生相关基因的表达关系密切。ＰＣＮＡ染色结果显示ＨＢｘＡｇ阳性组织的细胞增殖活性显著高于ＨＢｘＡｇ阴性组织。我们的结果还表明ＨＢｘＡｇ表达与肝细胞不典型增生的发生和进展有关、提出ＨＢＶＸ基因可能通过其表达产物（ＨＢｘＡｇ）首先激活ＩＧＦⅡ、ｃ－ｅｒｂＢ－２基因,继而引起显著的ＳＰＬＣ增生和ＳＣＤ而参与ＨＣＣ发生的．     

8%—9%和12%—13%低氧气体诱导大鼠左右心室肌自由基增殖

α－苯基－Ｎ－叔丁基甲亚胺－Ｎ－氧化物（ＰＢＮ,α－ｐｈｅｎｙｌ－ｔｅｒｔ－ｂｕｔｙｌｎｉｔｒｏｎｅ）由股静脉注入ＳＤ大鼠体内,鼠暴露于８％－９％Ｏ２（ｉｎＮ２）１５ｍｉｎ,左心肌ＰＢＮ－自旋加合物电子自旋共振（ＥＳＲ,ｅｌｅｃｔｒｏｎｓｐｉｎ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）信号明显增强（与常氧组比,ｎ＝５,Ｐ〈０．０５）。,而右心肌变化不明显（ｎ＝５,Ｐ〉０．０５）。暴露于１２％－１３％Ｏ２（ｉｎＮ２）的     

鼻咽癌细菌L型感染与P^53基因突变的研究

用免疫组化和革兰染色等技术,对６９例鼻咽癌进行细菌Ｌ型和突变型Ｐ５３蛋白检测,并以２０例鼻咽粘膜慢性炎作为对照。结果发现,革兰染色鼻咽癌细菌Ｌ型检出率为７９．７％,与免疫组化Ｌ型抗原表达阳性率（６９．６％）具有一致性（Ｐ＞０．０５）。鼻咽癌Ｐ５３蛋白表达阳性率为６５．２％,与粘膜慢性炎的Ｐ５３蛋白表达（１／２０）有显著性差异（Ｐ＜０．００５）,且Ｌ型阳性病人的Ｐ５３蛋白表达阳性率（７８．２％）明显高于Ｌ型阴性病人（１４．３％）,两者有显著性差异（Ｐ＜０．００５）。结果表明,细菌Ｌ型感染与突变型Ｐ５３蛋白过度表达存在着明显相关性。提示,细菌Ｌ型感染参与了Ｐ５３抑癌基因的失活,基因突变可能是细菌Ｌ型致鼻咽癌作用的机制之一。     

利用恒溶氧．补料分批技术高密度培养大肠杆菌生产重组人骨形成蛋白-2A

对表达人骨形成蛋白２Ａ（ＢＭＰ２Ａ）的重组大肠杆菌ＹＫ５３７／ｐＤＨＢ２ｍ在５００ｍｌ摇瓶中进行了培养条件的摸索实验,继后用５Ｌ自控发酵罐进行分批培养和分批补料培养,以获取ｒｈＢＭＰ２Ａ。两种培养方式结果比较表明,在培养过程中保持３０％～４０％左右的溶解氧和限制性流加葡萄糖可以使ＢＭＰ２Ａ的含量达到２７８ｇ／Ｌ,最终菌体密度为ＯＤ６００５３（相当于干菌２１２ｇ／Ｌ）,重组蛋白的表达量占菌体总蛋白的２５％。该培养技术的关键是：（１）在培养过程中保持适当的溶解氧;（２）限制性流加葡萄糖;（３）４２℃起始诱导的时间控制在对数生长中期,持续表达时间为４ｈ;（４）细菌持续生长的比生长速率控制在０３ｈ１左右。     

点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶在大肠杆菌中的高效表达

采用ＰＣＲ分段克隆法将点状产气单胞菌点状亚种（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｐｕｃｔａｔａ ｓｕｂｓｐ．ｊｐｕｃｔａｔａ）脯氨酰内肽酶（ｐｒｏｌｙｌ ｅｎｄｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ,ａｐＰＥＰ）的编码区基因分成３段扩增并拼接成编码６９０个氨基酸的完整基因ａｐＰＥＰ,将其克隆在表达载体ｐＢＬ和ｐＫＫＨ上,构建成温度和ＩＰＴＧ诱导型高效表达ａｐＰＥＰ的重组大肠杆菌ＢＬ２１／ｐＢＬ－ＰＥＰ和ＢＬ２１／ｐＫＫＨ－ＰＥＰ     

脂多糖对离体培养大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

本研究观察到１０－７～１０－５ｋｇ／Ｌ脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｈａｒｉｄｅ,ＬＰＳ）可显著促进血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的增殖及ＤＮＡ的合成（Ｐ＜００５）。５×１０－４～１０－３ｋｇ／ＬＬＰＳ却抑制ＶＳＭＣ的增殖及ＤＮＡ的合成,降低其活力（Ｐ＜００１）,并呈时间依赖效应。一氧化氮合酶抑制剂ＮＮｉｔｒｏＬＡｒｇｉｎｉｎｅ（ＬＮＮＡ）可拮抗ＬＰＳ的抑制作用。大剂量ＬＰＳ作用组ＶＳＭＣ上清液中一氧化氮（ＮＯ）代谢产物ＮＯ－３和ＮＯ－２的含量与对照组相比显著增加（Ｐ＜００１）,４８ｈ组比２４ｈ组增加９１％,７２ｈ组比４８ｈ组增加４５％;同时,诱导性一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｔｉｖｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ,ｉＮＯＳ）免疫组化染色呈阳性。结果表明,低浓度ＬＰＳ促进ＶＳＭＣ增殖和ＤＮＡ合成,而高浓度ＬＰＳ却明显抑制ＶＳＭＣ增殖和ＤＮＡ合成,降低其活力。这种抑制作用可能与ＬＰＳ诱导ＶＳＭＣ产生的ＮＯ有关。     

抗酸菌L型感染与前列腺癌的关系

应用抗酸（ＩＫ）染色和结核菌抗体（ＢＣＧ）免疫组化染色方法,对３０例前列腺癌及２０例前列腺增生症进行检测。结果显示：ＩＫ抗酸染色和ＢＣＧ免疫组化染色阳性率,前列腺癌分别为４３３％、４６７％;前列腺增生症为４５％、５５％,ＩＫ抗酸染色与ＢＣＧ免疫组化染色结果基本一致,两者符合率为９４％。提示结核菌Ｌ型感染与肿瘤的发生和发展可能有一定的关系     

金黄色葡萄球菌L型和人乳头瘤病毒与宫颈癌关系的研究

应用改良革兰氏染色和免疫组化染色（ＡＢＣ法）,对２７０例宫颈癌和３３例慢性宫颈炎进行了研究。结果发现,宫颈癌革兰氏染色切片中细菌Ｌ型感染率（７５．１％）明显高于慢性宫颈炎（４５．５％）（Ｐ＜０．０５）,金黄色葡萄球菌Ｌ型抗原阳性率（７６．２％）明显高于人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）抗原阳性率（５７．１％）。Ｌ型、ＨＰＶ混合感染率为４２．８％。上述结果表明宫颈癌中金葡菌Ｌ型与ＨＰＶ感染均常见,尤其金葡菌Ｌ型感染更为多见;金葡菌Ｌ型与ＨＰＶ感染的致病特征相似,两者均有不同程度的空泡细胞出现。提示金葡菌Ｌ型感染可能也是宫颈癌的致癌重要因素之一。     

恶性淋巴瘤组织切片中结核菌L型的检出及其意义

本文应用Ｉｎｔｅｎｓｉｆｉｅｄｋｉｎｙｏｕｎ（ＩＫ）改良抗酸染色和结核菌抗休免疫组织化学染色检测了５１例恶性淋巴瘤组织功片内结核菌及其Ｌ型感染率。结果发现５１例恶性淋巴瘤组织功片中,ＩＫ染色阳性２５例（４９％）,免疫组化染色阳性２６例（５０．９％）,并发现结核菌Ｌ型感染与恶性淋巴瘤的疗效有关（Ｐ＜０．０１）。故认为恶性淋巴瘤中,结核菌Ｌ型感染是一个值得进一步研究的课题。     

真养产碱杆菌二级连续培养系统中稀释率对聚β—羟基丁酸合成的影响

在研究真养产碱杆菌ＷＳＨ３一级连续培养动力学的基础上,采用二级连续培养系统对不同稀释率下聚β羟基丁酸的生产进行了研究。结果表明：在一级连续培养系统中,当稀释率为０２１ｈ－１时,细胞干重最大值达２７１ｇ／Ｌ;二级培养系统中,稀释率为０１４ｈ－１时细胞干重最大值为４７６ｇ／Ｌ;在稀释率为０１２ｈ－１时,ＰＨＢ的生产强度达到最大值为２５０ｇ／（Ｌ·ｈ）,但胞内ＰＨＢ含量仅为４７６％;在稀释率为００７５ｈ－１时,产物对基质的转化率达到最大值为０３８ｇ／ｇ,此时ＰＨＢ的生产强度达２１４ｇ／（Ｌ·ｈ）和胞内ＰＨＢ含量±７２１％;随着细胞比生长速率的增长,细胞中ＰＨＢ含量和单位菌体合成ＰＨＢ的量不断下降。