原位核酸杂交检测宫颈癌中金黄色葡萄球菌L型DNA

应用病原微生物培养、改良革兰氏染色、免疫组化染色及原位核酸杂交等方法,对５０例宫颈癌和３３例慢性宫颈炎进行了研究。结果发现宫颈癌病原微生物培养细菌及其Ｌ型阳性感染率为５８％（２９／５０例）,以金黄色葡萄球菌（金葡菌）及其Ｌ型多见（１３／２９例）;宫颈癌和慢性宫颈炎组织切片革兰氏染色,细菌Ｌ型检出率分别为６６％和４５．５％;免疫组化染色（ＡＢＣ法）金葡菌Ｌ型抗原阳性率各为６８％和４８．５％。Ｌ型主要分布于癌间质、癌巢及宫颈上皮下结缔组织内。１２例宫颈癌金葡菌Ｌ型ＤＮＡ探针原位杂交显示,１０／１２例癌细胞核内有金葡菌Ｌ型ＤＮＡ杂交阳性信号,表明金葡菌Ｌ型ＤＮＡ已进入宫颈癌细胞内,可能会在基因水平上影响宫颈上皮恶变,提示宫颈癌发生与金葡菌Ｌ型感染关系密切,值得进一步研究。     

应用分离培养与免疫组化检测子宫颈癌中的细菌L型

本文应用微生物培养、革兰氏染色、免疫组化技术对５０侧宫颈癌进行了研究。结果发现,宫颈癌细菌及Ｌ型培养阳性率为５８％,以金黄色葡萄球菌（金葡菌）及其Ｌ型为主（２６％）,革兰氏染色Ｌ型检出率为６６／,免疫组化Ｌ型抗原阳性率为６８％,Ｌ型主要分布于间质和癌细胞内。提示Ｌ型感染与宫颈癌可能有一定关系     

多聚酶链反应检测宫颈HPV感染及分型的研究

本文应用ＰＣＲ技术检测２ｌ２例临床宫颈标本的ＨＰＶ－６、ｌｌ、１６、１８型特异性核酸序列。结果发现ＨＰＶ－ＤＮＡ的阳性率：宫颈癌组为６２．５％（２５／４０）．慢性宫颈炎为５７％（８１／１４２）,正常宫颈对照组为２０％（６／３０）,Ｐ＜０．００１,提示ＨＰＶ的感染与宫颈炎、宫颈癌有关。同时分型结果显示：ＨＰＶ－６、１６、１８型与宫颈炎相关,１６型与宫颈癌密切相关,且ＨＰＶ不同型别的混合感染在宫颈中普遍存在（３１．３％）。成年女性各年龄组间ＨＰＶ的感染率并无明显差异（Ｐ＞０．０５）。     

细菌L型与人乳头状瘤病毒致凹空细胞的比较

应用组织切片革兰染色和免疫组织化学染色等方法,对２４０例有凹空细胞的标本（鳞状细胞乳头状瘤３６例．尖锐湿疣６１例,喉癌８５例,子宫颈鳞癌５８例）进行人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）和细菌Ｌ型检测,比较两者在组织中的检出阳性率、分布及组织病理学表现。结果发现,凹空细胞中ＨＰＶ—Ａｇ检出阳性率（７２．１％）与金葡菌ＣｏｗａｎＩ株Ｌ型－Ａｇ检出阳性率（６５．０％）无显著性差异（Ｐ＞０．０５）;革兰染色有６５．４％的凹空细胞检出Ｌ型菌,ＨＰＶ－Ａｇ与Ｌ型－Ａｇ在组织中的分布和组织病理学表现基本一致。表明细菌Ｌ型与病毒具有相似的病理致病特征。细菌Ｌ型感染是引发上述病变及凹空细胞的重要原因之一。     

慢性扁桃体炎、咽炎与细菌L型的关系及慢性咽炎发生原因的探讨

应用病原微生物培养、组织切片革兰氏染色Ｌ型检查和Ｌ型抗体免疫组化染色的方法,对１７５例标本（慢性扁桃体炎１１１例、慢性咽炎６４例）进行细菌Ｌ型检测。结果显示,培养的１１４例标本中有８６例培养出细菌Ｌ型,其阳性率为７５．４％;组织切片革兰氏染色有１４６例（８３．４％）查见细菌Ｌ型,两者阳性率之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）;免疫组化染色金葡菌ＣｏｗａｎⅠ株Ｌ型抗休标记阳性率为５８．３％。提示,细菌Ｌ型感染与慢性扁桃体炎、慢性咽炎关系密切。并认为,细菌Ｌ型感染是扁桃体切除后发生慢性咽炎的原因之一。     

宫颈癌病变组织人乳头瘤病毒感染率的免疫细胞化学与DNA杂交的比较观察

近年来人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）被认为与宫颈癌的发生有密切关系。该实验报道了用分子杂交技术（在严格条件下）检测了宫颈活检组织：慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤（ＣＩＮ）、宫颈癌和宫颈正常组织中１６型乳头瘤病毒（ＨＰＶ－１６）ＤＮＡ的阳性率,并将其与用免疫细胞化学方法（ＰＡＰ）所得结果进行了比较。结果显示１３％（２／１５）的慢性宫颈炎、１７％（２／１２）的ＣＩＮ、５６％（５１／９１）的宫颈癌含有ＨＰＶ－１６ＤＮＡ,而正常组织为阴性;ＨＰＶ属抗原仅见于３５％（６／１７）的ＣＩＮ,其他受检组织均为阴性。结果提示用ＰＡＰ法检查ＨＰＶ－１６的抗原,所得阳性率不及ＤＮＡ杂交所得阳性率高;但它作为一种简便、快速的方法用于福尔马林固定、石腊切片材料,显示ＨＰＶ属抗原,借以筛选多种不同型的ＨＰＶ对ＣＩＮ或其他组织中ＨＰＶ的增殖性感染有一定的价值。     

50例尖锐湿疣患者HPV DNA的检测

采用地高辛标记的ＨＰＶ６．１１探针,对５０例生殖器尖锐湿疣,１０例慢性宫颈炎组织及１０例女性生殖器正常粘膜进行ＨＰＶ ＤＮＡ检测。结果示尖镜湿疣组织ＨＰＶ阳性率为８８．０％（４４／５０）;慢性宫颈炎为１０％（１／１０）;而正常粘膜组织无一例阳性。尖锐湿疣组织中ＨＰＶ６．１１的检出率分别为７６％（３８／５０）和６０％（３０／５０）。男女患者两型探针检测的总阳性率无显著差异。     

细菌L型与喉癌关系的研究

用组织切片革兰氏染色、免疫组织化学染色等方法,对８５例喉癌重新切片,进行细菌Ｌ型检查,结果发现有６５例革兰氏染色Ｌ型菌阳性,其阳性率为７６．５％。５３例（６４．７％）Ｌ型抗体免疫组化染色和革兰氏染色Ｌ型菌均阳性,两者总符合率为８３．５％。细菌Ｌ型呈多形性,分布于癌巢、癌间质,常聚集成堆,也可呈散在性分布。５８例（６８．２％）癌细胞胞浆内也见到Ｌ型菌。提示细菌Ｌ型感染与喉癌关系密切。     

鼻咽癌细菌L型感染与P^53基因突变的研究

用免疫组化和革兰染色等技术,对６９例鼻咽癌进行细菌Ｌ型和突变型Ｐ５３蛋白检测,并以２０例鼻咽粘膜慢性炎作为对照。结果发现,革兰染色鼻咽癌细菌Ｌ型检出率为７９．７％,与免疫组化Ｌ型抗原表达阳性率（６９．６％）具有一致性（Ｐ＞０．０５）。鼻咽癌Ｐ５３蛋白表达阳性率为６５．２％,与粘膜慢性炎的Ｐ５３蛋白表达（１／２０）有显著性差异（Ｐ＜０．００５）,且Ｌ型阳性病人的Ｐ５３蛋白表达阳性率（７８．２％）明显高于Ｌ型阴性病人（１４．３％）,两者有显著性差异（Ｐ＜０．００５）。结果表明,细菌Ｌ型感染与突变型Ｐ５３蛋白过度表达存在着明显相关性。提示,细菌Ｌ型感染参与了Ｐ５３抑癌基因的失活,基因突变可能是细菌Ｌ型致鼻咽癌作用的机制之一。     

用质量控制狭缝式杂交法（Coslot）检测妇女宫颈上皮中人乳头瘤病毒（HPV）DNA

本文报道一种能对ＨＰＶ进行较为准确分型的刚Ａ杂交程序和方法。它具有如下特点：１．由于简化了实验程序,标本消耗减少。因此该方法尤其适用于小组织活检标本（１－２ｍｇ）中ＤＮＡ同源序列检测;２．敏感性高。由于标本消耗减少,使ＨＰＶ检出率大为提高,与斑点杂交技术相比,敏感性提高１．６倍;３．型别特异性强。由于改变了实验条件及在实验过程中实行严格的质量控制,明显减少了不同ＨＰＶ型别的交叉反应,甚至在部分出现交叉反应的标本中,仍可通过强度对比来最后判定ＨＰＶ感染型别。应用该技术对１４３份宫颈炎标本、１７份宫颈不典型增生标本及２５份宫颈癌标本进行了ＨＰＶ１６型检测,阳性率分别为５０．０５％（７３／１４３）、５７％（２７／４７）及７６％（１９／２５）,并与Ｄｏｔｂｌｏｔ方法进行了比较。该方法在ＨＰＶ感染与宫颈癌关系的分子流行病学研究中具有重要意义和广阔的应用前景。