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麂属动物陈旧皮张标本的DNA提取及PCR扩增 总被引:19,自引:0,他引:19
本实验用改进的方法从保存于标本馆的动物皮张标本中提取DNA,所得DNA片段的分子量从100bp到1kb以上。利用线粒体DNA细胞色素b通用引物和PCR技术,从小麂、印度麂、贡山麂、费氏麂、黑麂DNA中扩增出307bp的细胞色素b特异片段。用28种限制性内切酶对从新鲜血样和从陈旧皮张标本中所得扩增片段进行酶切分析,发现只有4个酶在这个片段上有切点,其中HaeⅢ和HapⅡ的识别位点在各种麂中有所不同。 相似文献
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联会复合体的研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
联会复合体(SC)是性细胞减数分裂前期Ⅰ所特有的结构。其功能主要与同源染色体的配对、重组有关。已清楚,SC是由DNA和蛋白质组成的复合体,它的形成始于细线期,完成于粗线期,它的装配和形成的每一步都是由蛋白质的合成推进。在SC中已鉴定的蛋白组分有肌动蛋白、拓扑异构酶Ⅱ和一些分子量为26-190kDa的多肽。利用单抗已筛选到了某些编码SC蛋白的基因。并在重组节中证明有DNA存在。在昆虫中SC的中心区为 相似文献
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碳离子诱导的DNA双链断裂 总被引:8,自引:2,他引:6
DNA双链断裂(DSBs)是电离辐射诱导的最重要的原发损伤,研究DSBs有利于揭示细胞辐射敏感性的机理。用倒转脉冲场凝胶电泳结合荧光扫描进行DNA定量研究75MeV/u12C6+对小鼠B16黑色素瘤细胞DSBs的诱导,结果表明:DSBs产额约为0.74DSBs/100Mbp/Gy;DNA片段分布在两个区域。大片段区分子量约为1.4Mbp~3.2Mbp,分子量小于1.2Mbp的为小片段区;并且随着剂量的增加,大片段区DNA含量逐渐下降,而小片段区的DNA含量显著增加。表明B16DNA分子上可能存在对重离子较为敏感的位点。 相似文献
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《氨基酸和生物资源》1994,(1)
低分子量DNA标准品:φ×174DNA的HaeⅢ片段及123BpDNA梯子的比较PaulaOstrovskydeSpicerstanleyMaloy著李络红译/申宗侯校φ×174DNA的HaeⅢ片段是一种通用于计算低分子量DNA分子大小的标准品。例如... 相似文献
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ING1抑癌基因 总被引:1,自引:0,他引:1
吴玉水 《国外医学:分子生物学分册》2000,22(2):76-81
采用cDNA消减杂交和体内选择技术,Garkartsev等分离了一个新的肿瘤抑制基因-ING1。该基因定位于人类染色体13p33-34,其cDNA长约2kb;编码了一种分子量为33kD的核蛋白-p33^ING1。研究发现,p33^ING1的过表达可有效抑制细胞生长,促进无生长因子条件下的细胞凋亡。 相似文献
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从印度木薯花叶病毒(ICMV)侵染的植物中纯化特异的核酸,经RNAase,DNAasc,Nucle-aseSl,ExonucleaseⅢ和EcoRI酶切,Southern和Dotblots杂交证实,在感病的植株中,存在两种形式的病毒核酸:环状双链DNA和环状单链DNA,后者可能是病毒DNA的(-)链,环状双链DNA经限制性内切酶作用可得2.7kb的线性双链DNA纯化的病毒核酸含DNA1和DNA2两个分子量相近的组份。 相似文献
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CD40配体(CD40L)是TNF超家族成员,表达于人活化的CD4^+T细胞表面,与存在于B细胞、抗原递呈细胞表面的相就受体CD40分子相互作用,促发并调节机体的体液免疫和细胞免疫应答。用PCR法从CD40L全长cDNA质粒中扩增CD40L胞外段编码cDNA,即可溶性CD40L(sCD40L)编码cDNA,并克隆入pSK质粒;cDNA序列经测序证实后与pPICZαA质粒重组构建成pPICZαA-s 相似文献
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端粒是真核细胞染色体末端的重复DNA序列 ,其生物学功能是防止染色体DNA降解、末端融合、非正常重组和染色体的缺失[1] .由于存在“末端复制问题” ,随着老化人体细胞端粒重复序列长度不断缩短 ,但在生殖细胞中由于端粒酶的存在 ,端粒序列并不缩短 .端粒酶是由蛋白质和RNA构成的核蛋白 ,是依赖RNA的DNA聚合酶 ,在DNA3’端合成端粒重复序列[2 ] .研究表明 ,在 85 %~ 95 %的人肿瘤细胞中可以检测到端粒酶的活性[3 ,4 ] ,而在正常体细胞中除生殖细胞和造血干细胞等极少数细胞中存在端粒酶活性外 ,均检测不到端粒酶活性 ,这… 相似文献
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牵牛属生殖细胞和精细胞中细胞器DNA的研究 总被引:1,自引:1,他引:0
用DAPI荧光技术观察了大花牵牛( Pharbitis lim bata Lindl.)和圆叶牵牛(P. purpurea(L.) Voight)生殖细胞的细胞质DNA及其在精细胞形成过程中的动态。牵牛属这两个种的生殖细胞均为细长形,具有大量细胞器DNA。刚形成的一对精细胞大多数一端钝,另一端呈尾状。较后期的精细胞多呈凸透镜状。生殖细胞分裂形成的一对精细胞多是同型的,也有的表现为异型。精细胞的核多偏于细胞的一端。在细胞质中有大量细胞器DNA分布。精细胞中的细胞器DNA 荧光点在大小及荧光强度上有所不同,可能代表线粒体和质体这两种不同的细胞器DNA。大花牵牛与圆叶牵牛之间,无论是生殖细胞或精细胞在细胞形状和细胞质DNA 分布状况上基本相似。一个明显的差异是,后者的细胞质DNA 荧光点体积较小和荧光弱。研究表明,精细胞存在具有DNA 的细胞器,为牵牛花细胞质具有双亲遗传或父系遗传的潜能提供了细胞学证据。本文还对研究的两个种的精细胞存在同型和异型的现象,以及精细胞在核质比率上的特点与质体双亲遗传的关系进行了讨论 相似文献
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染色体末端的端粒是由线性DNA分子组成的,通常互相配对的两条DNA单链中,有一条稍长于另一条。稍长的那条链,即端粒的伸出物,造成了细胞的困境,因为细胞是不允许单链DNA存在的。某种用显微镜可见的动物纤毛虫具有结合于端粒伸出物而遮蔽端粒伸出物的蛋白质。哺乳类具有更长的端粒伸出物,但始终尚未找到类似纤毛虫的能遮蔽端粒伸出物的蛋白质。现在,洛克菲勒大学的TitiadeLang及其同事鉴定了两个蛋白质,称为TRF1和TRF2,它们可与哺乳类端粒的DNA双链部分相结合。她们与北卡罗莱纳大学的一直在研究DN… 相似文献
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野生大豆和烟草根尖细胞分化过程中的DNA动态和细胞图像分析 总被引:1,自引:0,他引:1
分别截取野生大豆根尖分生区、伸长区和成熟区细胞,用Hoechst33258对DNA进行专一染邑,通过计算机数字图象处理系统,采用灰度测量法原位测定根尖不同区的DNA含量。同理取烟草根尖不同区细胞,用率尔根反应对DNA进行专一染色,并由与扫描显微光度计相联的数字图象处理系统原位测定备区域中细胞的DNA含量。发现从分生区到成熟区,细胞核DNA含量呈递增趋势。分化的细胞中含量异常增高而不分裂,说明DNA的动态变化与发育和分化存在着某种联系。细胞图象分析的结果表明三个区的细胞面积、最大径、最小径及形态因子也沿分生区到成熟区呈递增趋势。 相似文献
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从河南省西峡晚白垩世的一枚奇特恐龙蛋化石提取DNA,经过^32P同位素标记和电泳分析,发现蛋腔内絮状物样品中有DNA片断存在,其分子量在几十至1000bp之间,且大多在400bp以下,用18SrDNA特异引物和恐龙蛋DNA片断为模板,进行PCR扩增。克隆PCR产物并进行序列分析和同源性比较,发现该序列与鸟类、两栖类、爬行类及人类等18SrDNA有75% ̄81%的同源性,与已知原核生物没有明显同源性 相似文献
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通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从丙肝患者的血清中分离出编码完整HCV核心蛋白(C区)的cDNA片段,并将其克隆到杆状病毒转移质粒中。重组转移质粒DNA与线性的杆状病毒DNA共转染Sf9昆虫细胞,经蚀斑筛选获得了带编码全部核心蛋白基因的重组杆状病毒。重组病毒感染细胞后表达HCV核心蛋白,其分子量的为20kD。免疫印染和酶联免疫实验表明,此重组蛋白能被人HCV阳性血清所识别。动物实验表明此重组蛋白能诱导小鼠产生特异性抗体。 相似文献
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水稻胚乳甲壳素结合蛋白的cDNA克隆杨日耀,王彤宇,唐锡华(中国科学院上海植物生理研究所,上海200032)关键词水稻胚乳甲壳素结合蛋白,cDNA克隆,插入片段,抗体筛选水稻胚乳中存在一种甲壳素结合蛋白,它是一种分子量为20kD的单亚基蛋白质,以等电... 相似文献
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为建立鸭乙型肝炎病毒LJ-76的转染细胞系,将LJ-76病毒DNA插入到pUC19的EcoRⅠ位点上,分离得到含有双拷贝LJ-76DNA的重组质粒.通过磷酸钙沉淀方法,将经CsCl等密度离心纯化的LJ-76DNA双体导入到人肝癌细胞BEL7402中.收集转染细胞的培养液进行蔗糖密度梯度离心,所得沉淀经检测发现含有LJ-76DNA并具有特异性DHBV内源性DNA多聚酶活性;对上述样品通过DotEIA检测DHBV核心抗原及表面抗原结果为阳性.Southernblot分析表明转染细胞内存在病毒DNA复制中间体cccDNA、ssDNA和rcDNA,而cccDNA被认为是复制活动较为活跃的标志.电镜观察转染细胞的上清发现有病毒颗粒的存在. 相似文献
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董关木 《Virologica Sinica》1994,(3)
用多聚酶链反应(PCR)为检测手段,证明了成熟的人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)可携带前病毒DNA;用细胞病毒裂解液处理病毒样品或在病毒样品中只加磷酸盐缓冲液(PBS)代替细胞裂解液,结果发现只有病毒裂解液处理样品后才能检测到特异DNA.完整的病毒颗粒对DNA酶不敏感,而只有在病毒裂解以后才能对DNA酶敏感。当靶细胞膜上的CD_4受体被特异的单克隆抗体覆盖后不能吸附病毒时,DNA也不能被检测到,而且DNA的数员和病毒滴度的高低相一致。这些证据都提示这种和病毒相关的DNA存在于完整的有感染性的成熟病毒颗粒内部。 相似文献