AgNORs染色在病原菌检测中的特殊应用

ＡｇＮＯＲｓ染色在病原菌检测中的特殊应用胥维勇,杨红,李科,杨群（四川省人民医院病理科．成都６１００７２）核仁组成区嗜银蛋白ＡｇＮＯＲｓ染色法是近年来广泛采用的银浸润染色技术,它在判断细胞增殖状态,区别良恶性肿瘤研究时有一定意义［１］。我们应用ＡｇＮ...     

核仁组成区相关嗜银蛋白染色革新法

核仁组成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）银染技术已广泛用以研究细胞生长活性,根据ＡｇＮＯＲ数目多少来判定肿瘤的良恶性和对肿瘤进行鉴别诊断。然而ＡｇＮＯＲ技术至今还存在背景非特异性银颗粒沉积问题而影响结果判定。本研究发现影响背景染色结果的主要因素是明胶的质量,采用Ｆａｒｍｅｒ’ｓ液可以清除背景染色,运用微波炉染色不仅可以缩短染色时间而且可以减少银用量。     

乳腺癌AgNOR计数与癌胚抗原的免疫组化研究

应用核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）技术及癌胚抗原（ＣＥＡ）免疫组化染色对９８例乳腺良、恶性病变进行对比研究。结果表明：ＡｇＮＯＲ计数与肿瘤增殖活跃程度及生物学行为是一致的。乳腺癌中ＡｇＮＯＲ计数显著高于良性病变（Ｐ＜０．０１）。浸润癌ＡｇＮＯＲ计数比其他类型乳腺癌高。ＣＥＡ染色在乳腺良性病变中基本阴性,恶性病变中阳性率８０．８％。乳腺癌中ＡｇＮＯＲ计数与ＣＥＡ分布之间呈线性相关（ｒ＝０．８２,Ｐ＜０．０５）。ＣＥＡ阳性乳腺癌组与ＣＥＡ阴性组ＡｇＮＯＲ计数差异显著（Ｐ＜０．０５）。提示：ＡｇＮＯＲ定量研究和ＣＥＡ分布在乳腺良、恶性病变的鉴别及肿瘤恶性程度的研究中具有相似的参考价值。     

肿瘤核仁形成区形态定量诊断的误差及规范化分析

本文采用包括自动图象分析技术在内的ＡｇＮＯＲ形态定量学方法,以大肠肿瘤为模型,进行了ＡｇＮＯＲ定量形态学研究的误差分析,以探讨肿瘤ＡｇＮＯＲ定量诊断规范化的可能。结果表明,染色条件、视场目标选择和细胞计数量是引起ＡｇＮＯＲ定量诊断的主要误差;恒定染色环境,正确选择欲测细胞及测定足够量的细胞是使ＡｇＮＯＲ形态定量诊断规范化的途径。     

介绍一种新方法AgNOR—微波技术在角结膜上皮肿瘤中应用

介绍一种新方法ＡｇＮＯＲ—微波技术在角结膜上皮肿瘤中应用邢惠清丁华野田玉旺郭山春黄晓南李颖北京军区总医院病理科,北京１００７００核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）染色,目前正广泛应用于肿瘤的诊断中。本文采用微波辐射和增加分化液的新染色方法,对４５例角结...     

物理、化学复合作用所致人胚肺细胞AgNORs形态计量学改变

物理、化学复合作用所致人胚肺细胞ＡｇＮＯＲｓ形态计量学改变樊飞跃,曹珍山,杨素霞,李煜,周淑珍,涂开成,刘国廉（北京放射医学研究所北京１００８５０）细胞核内核仁组成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲＳ）颗粒数量及大小等形态计量学参数的测定和分析,已在临床和实...     

AgNORs异型颗粒在乳腺癌细胞核中的观察分析

本文报道了核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）在乳腺癌细胞核中的一组异型颗粒——字母样结构“ＣＥＩＪＲＳＴＵＲＹＸ”等,乳腺良性病变无此结构。研究结果表明,字母样结构在浸润性导管癌中多见,在乳头状癌中未见。结合乳腺癌的临床分期分析,临床分期越高,有字母样结构的乳腺癌所占比分也越高。同时,有字母样结构的乳腺癌组其ＡｇＮＯＲｓ含量和颗粒形态的异型性均明显高于无字母样结构的乳腺癌组。在讨论中认为,ＡｇＮＯＲｓ字母样结构对鉴别诊断乳腺癌可能有一定的形态学参考价值     

胃癌细胞DNA含量、AgNOR计数与其生物学特性关系的研究

本文使用图像分析技术测定了正常胃粘膜、萎缩性胃炎、不典型增生及胃癌共８９例细胞ＤＮＡ相对含量及ＤＮＡ倍体分布;并用银染方法对８９例细胞核仁形成区嗜银蛋白进行定量分析。结果显示：不典型增生往往可观察到与胃癌相似的ＤＮＡ核型即高异倍体的出现,高异倍体的出现可能是重要的癌前标志;在胃粘膜病变中,ＡｇＮＯＲ值随病变异型程度的加重而递增,各组间差异均有非常显著性意义（Ｐ＜０．０１）。早期癌、浸润癌和转移癌间,以及癌转移过程中粘膜层、肌层、淋巴结内癌细胞ＤＮＡ含量无明显差异;ＡｇＮＯＲｓ计数均值差异亦无非常显著性意义（Ｐ＞０．０５）。随癌细胞分化程度升高,ＤＮＡ含量增多及异倍体出现率升高;各期胃癌除粘激腺癌与分化型腺癌差异无显著性意义外,余各型胃癌ＡｇＮＯＲｓ值随分化程度升高而增多,差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。因此,ＤＮＡ含量及倍体分析,ＡｇＮＯＲｓ计数与胃癌的生物学行为密切相关,可作为胃癌早期诊断,癌前病变预测以及组织分级的一种重要指标。     

显示AgNOR的改良染色效应在实验动物肿瘤中的应用

本文报道的ＡｇＮＯＲ组化反应，是我们经过反复实验，得新建立的染色逍度，染色时间和温度的系列程序，其结果表明不所显示ＡｇＮＯＲ成分的对比清晰度较强，而适用于实验动物肿瘤组织的形态学观察，图象分析系统的定量研究和诊断的价值。     

肝素对成纤维细胞促增殖作用的研究

应用核仁组成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）染色和抗Ⅲ型胶原以及抗５－溴脱氧尿苷单抗免疫组化技术,观察了肝素对体外培养的ＮＩＨ／３Ｔ３成纤维细胞增殖的影响,发现：（１）肝素能促使成纤维细胞数量增加,如０．１ｍｇ／Ｌ浓度的肝素在培养第３天成纤维细胞数量相当于对照值的１．３倍;（２）对成纤维细胞ＡｇＮＯＲｓ的合成显示出明显的促进作用,如０．２ｍｇ／Ｌ浓度的肝素培养第３天,其ＡｇＮＯＲｓ数量为对照值的２．７倍;（３）进一步分析肝素对成纤维细胞ＤＮＡ和Ⅲ型胶原合成的影响,结果表明,加入０．２ｍｇ／Ｌ肝素培养第３天,Ｓ期成纤维细胞和Ⅲ型胶原阳性细胞数分别为对照值的２．７倍和１．８倍。上述实验结果为探讨肥大细胞分秘的活性介质参与器官纤维化作用的机理进而采取相应的对抗措施提供了依据     

正常造血细胞的核仁组成区计数定量研究

本文应用银染技术对正常造血细胞的核仁组成区进行了计数定量研究。结果显示,在粒系和红系中,随细胞的成熟,细胞中簇状ＡｇＮＯＲ的数量逐渐减少．而点状ＡｇＮＯＲ数量逐渐增多,无分裂能力的成熟细胞仅有少数点状ＡｇＮＯＲ。淋巴细胞中为一完全集结的银染颗粒,而巨核细胞内为各自分离的点状银染颗粒。本结果为正常造血细胞的核仁组成区提供了基础数值。     

膀胱肿瘤DNA含量、核形态学特点与AgNORs计数的研究

应用图像分析技术对４３例膀胱肿瘤细胞ＤＮＡ含量和核形态参数进行了定量测定,同时进行核仁组成区（ＡｇＮＯＲｓ）计数研究,结果表明：肿瘤细胞的ＤＮＡ含量及干系水平与组织学分级基本一致,ＤＮＡ含量及干系水平越高,则恶性程度越高,ＤＮＡ含量与核面积及核最短直径的变化里正相关性,与ＡｇＮＯＲｓ的计数无明显相关性。这三项检测方法对肿瘤生物学行为判断均有重要的参考价值。     

甲状腺良、恶性病变中增殖细胞核抗原、P_(53)蛋白与AgNOR的检测及相关性研究

本文应用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法及ＡｇＮＯＲ技术对７３例甲状腺良、恶性病变ＰＣ－ＮＡ、Ｐ５３蛋白及ＡｇＮＯＲ进行了检测并对其相关性进行了研究。结果显示①ＰＣＮＡ表达在良、恶性病变中有显著差异（Ｐ＜０．０１）;②ＡｇＮＯＲ颗粒均数及其形态在良、恶性病变中有较显著差异;③ＰＣＮＡ表达与ＡｇＮＯＲ计数呈显著正相关性（Ｐ＜０．０１）;④Ｐ５３蛋白在良、恶性病变中的表达均呈阴性,只是在淋巴结转移灶内呈阳性表达。根据研究我们认为检测甲状腺良、恶性病变中ＰＣＮＡ及ＡｇＮＯＲ颗粒对甲状腺良、恶性病变的鉴别、预后及对临床治疗均有意义     

AgNOR染色对甲状腺良、恶性病变诊断价值的研究

本文应用ＡｇＮＯＲ染色技术对７３例甲状腺良恶性病变石蜡切片核仁组成区变化进行观察,其中包括亚急性甲状腺炎５例、腺瘤２５例、结节性甲状腺肿７例、甲状腺癌３６例,结果表明亚急性甲状腺炎、腺瘤、结节性甲状腺肿,细胞核内的ＡｇＮＯＲ颗粒均数及形态与甲状腺癌的均数及形态比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。我们认为此方法对于区别甲状腺良、恶性病变有一定参考价值。     

达乌尔黄鼠染色体银染核仁组织者分析

达乌尔黄鼠染色体银染核仁组织者分析ＡＮＡＬＹＳＩＳＯＮＣＨＲＯＭＯＳＯＭＥＳＡｇ－ＮＯＲＳＯＦＣＩＴＥＬＬＵＳＤＡＵＲＩＣＵＳＫｅｙｗｏｒｄｓＣｉｌｅｌｌｕｓｄａｕｒｉｃｕｓ;Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ;Ａｇ－ＮＯＲ达乌尔黄鼠（ｃｉｌｅｌｌｕｓｄａｕｒｉｃ...     

鲶鱼染色体的显带研究

对鲶鱼染色进行Ａｇ－ＮＯＲｓ、Ｃ－带，ＣＭＡ３／ＤＡ／ＤＡＰＩ三重荧光染色昨帛 带的研究。结果发现，鲶鱼Ａｇ－ＮＯＲｓ定位在ｍ１ｑ的末端，上有一种特殊的形态和数目多态现象，即染色体上的ＮＯＲｓ发生串联重复。该种鱼只有部分染色体呈现阳性Ｃ带，，所显示的异染色质可分为三类，有丝粒异染色质、端粒异染色质和居间异染色质，其中ｍ１的整佧长臂都被深染，是Ｃ－带染色最深、染色面积最大的区域。ＣＭＡ３染色显示，Ｎ     

银染技术在生殖细胞研究中的应用

新近对传统的银染技术作出改良,以氨银反应观察精子发生及受精过程中碱性蛋白的更替,以Ａｇ－Ａｓ反应观察精子发生过程中ＮＯＲ,嗜银细胞器,细胞骨架及其它嗜银成份的变化以及皮层皮应中嗜银成分的变化。     

肥大细胞在大鼠肝癌发生过程中的作用研究

应用组织化学、免疫组织化学、电子显微镜及形态测量等方法对二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）诱发大鼠肝肿瘤过程中肥大细胞（ＭＣ）对肝细胞生化代谢、细胞核及核仁组成区（ＮＯＲ）的影响等进行了研究。结果显示肝细胞葡萄糖６磷酸酶（Ｇ－６－Ｐａｓｅ）和α－抗胰蛋白酶（α－ＡＴ）在ＭＣ最多与最少组之间的分布无明显差异,而嗜银蛋白颗粒（ＡｇＮＯＲ）计数和纤维中心数密度及核仁面积之比则自第十四周起显示出分布的个体差异,它们在ＭＣ最多组明显低于ＭＣ最少组、本文并对该种差异的意义进行了简要讨论。     

七种鲌亚科鱼Ag-NORs的比较研究

本文研究了红鳍、青稍红、蒙古红、翘嘴红、条、团头鲂和长春鳊等７种亚科鱼类的银染带。结果表明,在中期分裂相中各自的Ａｇ－ＮＯＲｓ数在４～８个之间。综合分析比较国内已发表的鲤科银染资料,得出多数中国鲤科鱼类的Ａｇ－ＮＯＲｓ数为４,位于两对ｓｍ染色体短臂端部。亚科鱼在进化过程中ＮＯＲｓ数目有增加的趋势。     

提高菜心离体植株再生频率的研究

ＡｇＮＯ３与ＡＢＡ 相配合,在离体培养条件下从３个菜心（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｐａｒａｃｈｉｎｅｎｓｉｓＢａｉｌ．）品种（“４９－１９”、“６０Ｄ”和“７０Ｄ”）获得了高频率的植株再生。结果表明：在试验的３种外植体中,子叶－子叶柄再生能力最强。实生苗龄及接种方式影响植株再生频率。ＭＳ附加不同浓度的ＢＡＰ和ＮＡＡ,ＢＡＰ ２ ｍ ｇ／Ｌ与ＮＡＡ １ ｍ ｇ／Ｌ配合效果最好,植株再生频率可达２６．８％ 。培养基中单独添加ＡｇＮＯ３ 或ＡＢＡ 均能促进植株再生,且ＡｇＮＯ３ 作用优于ＡＢＡ。ＡｇＮＯ３（４ ｍ ｇ／Ｌ）和ＡＢＡ（０．５ ｍ ｇ／Ｌ）相配合获得了更高的植株再生频率：“４９－１９”达８９％ ,“６０Ｄ”达８４．３％ ,“７０Ｄ”达８６％ 。组织学研究表明,在本实验条件下菜心离体培养植株再生方式为外植体直接出芽。不定芽起源于子叶柄切口端维管组织的薄壁细胞;由此种细胞分裂形成分生细胞团,继而分化成芽。试管苗移入盆中获得成熟植株