Glycine—SDS—PAGE测定小分子多肽分子量

小分子多肽分子量的测定 ,目前多采用Ｔｒｉｃｉｎｅ -ＳＤＳ -ＰＡＧＥ系统[1～ 3 ] ,但系统中的Ｔｒｉｃｉｎｅ价格昂贵 ,加之电泳时间较长 ( 3～ 4ｈ) ,为此 ,作者经过实验摸索 ,建立了Ｇｌｙｃｉｎｅ -ＳＤＳ -ＰＡＧＥ测定小分子多肽的方法。1　材料和方法表 1　制胶配方成分分离胶 (ｍｌ)浓缩胶 (ｍｌ)分离胶单体母液 1 3 3 -浓缩胶单体母液 -0 23 2ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌ 1 3 3 -(ｐＨ8 8)0 5ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌ -0 3 8(ｐＨ6 8)尿素 1 44ｇ -Ｈ2 Ｏ 0 40 910 %ＳＤＳ 40 μｌ 15 μｌ10 %ＡＰＳ 2 5 μｌ 12 μｌＴ…     

牛奶子的组织培养及植株再生

1　植物名称　牛奶子 (Ｅｌａｅａｇｎｕｓｕｍｂｅｌｌａｔａ) ,又称甜枣、羊奶子。2　材料类别　幼苗的下胚轴。3　培养条件　 ( 1 )ＭＳ 6 ＢＡ 1ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) 2 ,4 Ｄ 3 ＩＡＡ 0 .5 ＣＨ 30 0 ;( 2 )ＭＳ 6 ＢＡ2 2 ,4 Ｄ 2 ＮＡＡ 0 .5 ＣＨ 30 0 ;( 3)ＭＳ 6 ＢＡ3 2 .4 Ｄ 1 ＩＢＡ 0 .5 ＣＨ 30 0 ;( 4 )ＭＳ 6 ＢＡ1 .5 ＩＡＡ 0 .5;( 5)ＭＳ 6 ＢＡ 1 .5 ＮＡＡ 0 .5;( 6)ＭＳ 6 ＢＡ 1 .5 ＩＢＡ 0 .5;( 7)ＭＳ 6 ＢＡ 0 .2 ＩＡＡ 0 .5 ＧＡ 0 .5;( 8)ＭＳ 6 ＢＡ 0 .2 ＩＡＡ 0 .1 ＧＡ…     

植物学通报2002年19卷关键词索引总目次(括号内为页码)

数字或英文3’ｃＤＮＡ末端 (5 84)ＡＦＬＰ (4 4 4)ＡＦＬＰ分析 (1 94)ＡＭ菌根 (4 62 )ＡＴＰ酶 (5 88)α 淀粉酶 (63 )ＣＨＳ (2 65 )ＣＯＰ1 (62 0 )ＤＮＡ甲基化 (3 74)Ｆｉｂｅｒ ＦＩＳＨ技术 (3 5 9)ＦＬＣ (4 0 6)ＧＡ12 ＿醛 (1 3 7)ＧＡｓ (63 )ＧＡ信号传导 (1 3 7)Ｈ ＿ＡＴＰａｓｅ (1 84)ＩＴＳ (698)ＭＡＤＳ＿ｂｏｘ基因 (1 5 0 )ｍＲＮＡ (1 0 3 )ＰＬＤ (1 5 6)ＰＣＲ产物克隆测序 (698)ＰＣＲ产物直接测序 (698)ＲＡＰＤ (2 0 1 ) (4 5 2 )ＲＮＡｉ (4 91 )Ｒｉ质粒 (65 0 )ｒｏｌ基因 (65 0 )ＳＳＲ标记 (4 4 )中文一…     

水母雪莲的幼根培养及植株再生

1　植物名称　水母雪莲 (Ｓａｕｓｓｕｒｅａｍｅｄｕｓａ) ,藏药中称为恰羔素巴。2　材料类别　无菌苗的根。3　培养条件　诱导愈伤组织培养基以ＭＳ、Ｃ1 7或Ｗ 1 4为基本培养基 ,附加 2 ,4 Ｄ 1～ 2ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) 肌醇 2 0 0 蔗糖 3% 琼脂 0 .5%。继代培养基为ＭＳ 2 ,4 Ｄ 1 肌醇 2 0 0 ＣＨ 30 0 蔗糖 3%～ 5% 琼脂 0 .5%。分化培养基配方为 1 /2ＭＳ ＫＴ 1 ＣＨ 30 0 肌醇 2 0 0 蔗糖 3% 琼脂0 .5% ,再附加 ( 1 )ＮＡＡ 0 .5 6 ＢＡ 1或 ( 2 )ＮＡＡ1 6 ＢＡ 2。所用培养基的 ｐＨ均调为 5.8。培养温度为…     

MnSOD与CuZnSOD基因转染细胞在电离辐射敏感性中的作用

诱导超氧阴离子（Ｏ２·）的产生是电离辐射损伤细胞和组织的重要机制之一。超氧化物歧化酶ＭｎＳＯＤ和ＣｕＺｎＳＯＤ是细胞内清除Ｏ２·的主要抗氧化酶。本研究将ＭｎＳＯＤ和ＣｕＺｎＳＯＤｃＤＮＡ真核表达载体分别导入ＣＨＯ细胞,以稳定表达这两种酶的ＣＨＯ细胞系为细胞模型,通过分析细胞形态学、线粒体功能和受照射细胞Ｄ０值变化比较研究了ＭｎＳＯＤ和ＣｕＺｎＳＯＤ对细胞辐射敏感性的影响。结果表明,ＭｎＳＯＤ表达的增强能明显降低细胞的辐射敏感性,同时维持线粒体的正常代谢功能,而ＣｕＺｎＳＯＤ则不能。由此提示ＭｎＳＯＤ和ＣｕＺｎＳＯＤ对细胞的辐射敏感性存在着不同的调控机制。     

登革病毒NS3全基因的扩增与克隆

登革热(ＤＦ)、登革出血热及登革休克综合征(ＤＨＦ/ＤＳＳ)是由登革病毒所致的两种不同临床类型的急性传染病,广泛流行于全球热带及亚热带地区。ＤＨＦ/ＤＳＳ以高热、出血、休克、高病死率为主要特征,近年来其发病率有迅速增加的趋势,已成为严重影响人类健康的公共卫生问题。迄今,ＤＨＦ/ＤＳＳ的发病机制仍不清楚,亦无有效的特异性预防方法[1]。登革病毒属于黄病毒科的黄病毒属,有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个血清型,基因组为单股正链ＲＮＡ,全长约11ｋｂ,编码三种结构蛋白和七种非结构蛋白。基因组顺序为5′ＣＰｒＭＥＮＳ1ＮＳ2ａＮＳ2ｂＮＳ3Ｎ…     

膜脂的物理状态对G_s激活AC的影响

用生物膜的拆离与重建方法将从牛脑皮层膜中纯化的激活型ＧＴＰ结合蛋白（Ｇｓ）和腺苷酸环化酶（ＡＣ）在含有不同极性头部或不同脂肪酸侧链的磷脂组成的脂质体上重建形成脂酶体,测定脂酶体中ＡＣ的基础活力及Ｇｓ激活ＡＣ的活力。实验结果表明,磷脂影响ＡＣ的基础活力和Ｇｓ激活ＡＣ活力的顺序依次为：ＰＥ＞ＰＳ＞ＰＣ;含不同脂肪酸侧链的混合磷脂对Ｇｓ的激活活力的影响大于含单一脂肪酸侧链的纯磷脂,如ＰＥＤＰＰＥ,ＰＳＤＰＰＳ,ＰＣＤＰＰＣ。含不同脂肪酸侧链的磷脂影响Ｇｓ的活力的顺序为ＤＬＰＣ＞ＤＭＰＣ＞ＤＰＰＣ。用反映磷脂分子的堆积程度的荧光探剂ＭＣ５４０和脂双层的流动性变化的ＤＰＨ以及专一性标记蛋白质巯基（－ＳＨ）基团的荧光探剂ａｃｒｙｌｏｄａｎ的测定结果表明,不同磷脂影响Ｇｓ的活力的差异主要是由于脂质物理状态的不同所致。     

特早熟杏的组织培养与快速繁殖

1　植物名称　杏 (Ｐｒｕｎｕｓａｒｍｅｎｉａｃａ)特早熟品种“红荷包”。2　材料类别　盛花后 45ｄ的自然授粉胚、顶芽、带腋芽的茎段。3　培养条件　培养胚的基本培养基 :( 1 )改良ＳＨ ,成分为 :大量元素ＮＨ4ＮＯ361 0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 )、ＫＮＯ32 2 4 0、ＣａＣｌ2 ·2Ｈ2 Ｏ 2 0 0、ＭｇＳＯ4·7Ｈ2 Ｏ40 0、ＫＨ2 ＰＯ435 0 ＭＳ微量元素 ＳＨ的有机物 ＢＡ 1 .0 ＩＡＡ 1 .0 4 %蔗糖。成苗培养基 :( 2 )ＴＭ培养基 0 .0 5 %ＡＣ。诱导分化培养基 :( 3)ＭＳ培养基 ＩＢＡ 0 .0 1 6 ＢＡ 0 .2 5 ;( 4 )ＭＳ培养基 …     

在正常细胞中导入端粒酶可使c-myc过表达,出现癌变危险

人乳腺上皮细胞 (ＨＭＥＣ)在通常情况下可分裂至ＰＤ(群体倍增次数 ) 5 5～ 6 0 ,ＷａｎｇＪ等(2 0 0 0 )将含有人ＴＥＲＴ(端粒酶催化亚单位的ｃＤＮＡ)的逆转录病毒导入ＰＤ40的ＨＭＥＣ ,使其可分裂代数延长到ＰＤ2 5 0。他们在延至ＰＤ1 5 0时用Ｃｒｅ重组酶 (ｒｅｃｏｍｂｉｎａｓｅ)切除基因组中该逆转录病毒重组体 ,且以Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法验证其确已切除后 ,却发现切除外源性ＴＥＲＴ的细胞仍有较高的端粒酶活性 (野生型对照未测出活性 ) ,细胞长势不减 ,至少可再长 2 0ＰＤ。由于ｈＴＥＲＴ基因是ｃ Ｍｙｃ的靶基因 ,ｃ Ｍｙ…     

海藻酸钠/壳聚糖微胶囊固定化大肠杆菌的研究

本文以大肠杆菌ＤＨ5α为模型体系 ,探索了大肠杆菌ＤＨ5α用海藻酸钠 壳聚糖 (ＡＣＡ)微胶囊培养的可行性 ,并观察了微囊化大肠杆菌ＤＨ5α细胞生长与物料渗透性能 ,通过将ＡＣＡ微胶囊移植到实验组小鼠体内 ,考察了ＡＣＡ微胶囊作为口服药物载体的可能性。1　材料和方法1.1　材料壳聚糖 ,本实验室改性所得 ;海藻酸钠 ,ＫｅｌｃｏＤｉｖｏｆＭｅｒ ｃｋＣｏ .Ｉｎｃ .ＵＳＡ ;其它试剂均为国产分析纯。大肠杆菌ＤＨ5α ,长春生物制品所 ;ＬＢ培养基 ,华美生物制品公司提供。昆明系小白鼠 18～ 2 0ｇ ,解放军大连高等医学专科学校实验动物中…     

亚硫酸对玉米和高粱苗的伤害及磷酸缓冲液的防护作用

二氧化硫(ＳＯ2)是我国主要大气污染物,严重影响植物生长和作物产量,因此探讨提高植物抗性,减轻ＳＯ2伤害的有效途径已为国内外诸多学者所关注[1～6]。刘荣坤等[2,7]首次提出用(1/15)ｍｏｌ·Ｌ-1,ｐＨ64的磷酸缓冲液处理小麦苗,可稳定膜结构,减少Ｋ 渗漏,提高ＳＯＤ和ＰＯＤ活性,增强或新增同工酶,对ＳＯ2伤害有一定的防护作用。前述研究主要以小麦为研究材料,对某些木本植物也有一定的作用[8],对其它农作物的适用性还未见报道。ＳＯ2进入植物体内主要是通过亚硫酸(ＨＳＯ-3或ＳＯ2-3)启动自由基进行过氧化伤害[5],而亚硫酸的直接影响与磷…     

山葵的离体快速繁殖

1　植物名称　山葵 (Ｅｕｔｒｅｍａｗａｓａｂｉ)日本品种岛根 3号。2　材料类别　无菌萌发的种子苗。3　培养条件　基本培养基为自行设计的“贵山”(代号ＧＳ)配方 [其大量元素组分为 :每Ｌ含(ＮＨ4) 2 ＳＯ40 .32 1 ｇ、ＫＮＯ31 .2 81 ｇ、ＫＨ2 ＰＯ40 .2 0 0ｇ、ＣａＣｌ2 · 2Ｈ2 Ｏ 0 .887ｇ和ＭｇＳＯ4· 7Ｈ2 Ｏ0 .746ｇ ,铁盐、微量元素和维生素组分均与ＭＳ配方相同 ]。种子萌发培养基为 :( 1 )ＧＳ 6 ＢＡ 0 .2ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ;芽增殖培养基为 :( 2 )ＧＳ 6 ＢＡ 0 .4;生根培养基为 :( 3)ＧＳ ＩＢＡ 0 .4。蔗糖…     

丙型肝炎病毒中国株非结构蛋白2~3部分基因cDNA克隆序列分析及表达

丙型肝炎病毒 (ＨｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ,ＨＣＶ)是输血后和许多社区获得性非甲非乙肝炎的主要致病因子。ＨＣＶ为单股正链ＲＮＡ病毒 ,其基因组长约 9.5Ｋｂ ,编码区含一个大开放读码框架 ,编码 30 1 0 30 33氨基酸残基的多蛋白前体 ,经宿主蛋白酶和病毒蛋白酶加工成具有生物学功能的成熟蛋白。ＨＣＶ各区域的分布顺序是 :Ｃ Ｅ1 Ｅ2 ｐ7 ＮＳ2 ＮＳ3 ＮＳ4Ａ ＮＳ4Ｂ ＮＳ5Ａ ＮＳ5Ｂ[1] 。本文我们应用ＲＴ ＰＣＲ方法从ＨＣＶ患者血清中扩增编码病毒蛋白酶的非结构蛋白 (ＮＳ2 ＮＳ3)部分基因 ,对其核苷酸序列进行了分析 ,…     

重组人粒细胞集落刺激因子的纯化

重组人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）在工程菌ｐＣＧ－１／ｒｈＧ－ＣＳＦ／ＤＨ５ａ中以无活性的包涵体形式大量表达。经过菌体破碎分离包涵体、包涵体变性复性后,ｒｈＧ－ＣＳＦ的活性得到恢复。用离子交换和疏水层析纯化了ｒｈＧ－ＣＳＦ,比活性达１．５７×１０８ｕ／ｍｇ,纯度大于９８％。     

一种新型的C型凝集素

美国、荷兰、英国科学家新近鉴定了一种新型的Ｃ型凝集素———树突细胞特异性、胞间粘附分子 (ＩＣＡＭ)可获取的非整联蛋白 (ＤＣ ｓｐｅｃｉｆｉｃＩＣＡＭ ｇｒａｂｂｉｎｇｎｏｎｉｎｔｅｒｇｒｉｎ) ,简称ＤＣ ＳＩＧＮ(ＣＤ2 0 9) ,它在免疫调节及免疫缺陷病毒致病过程中的作用日益受到重视。1 .ＤＣ ＳＩＧＮ的结构[1～ 3]ＤＣ ＳＩＧＮ是一种Ｃ型凝集素 ,为 40 4个氨基酸的Ⅱ型跨膜蛋白 ,分子量为 45775,Ｎ末端 40个氨基酸位于细胞质 ,跨膜结构域(ＴＭ)为 2 1个氨基酸 (Ｇｌｙ40 ～Ｓｅｒ6 1位个氨基酸残基 ) ,Ｃ末端 3 4 2个氨基…     

丙型肝炎病毒Core与NS3基因的不同融合方式及其表达

丙型肝炎病毒(简称ＨＣＶ)是危害人类健康的传染性疾病,预防该病的传播主要借助于ＨＣＶ血清学诊断来筛选献血员和检测临床标本。从国内外已分离到的ＨＣＶ株得知,ＨＣＶ核心蛋白(Ｃｏｒｅ)和非结构蛋白ＮＳ3含有较强的优势抗原表位,其相应的抗体出现早,阳性率高,已成为目前第二、第三代ＨＣＶ免疫诊断试剂的重要成份[1,2]。通常Ｃｏｒｅ蛋白和ＮＳ3蛋白分别用基因工程方法表达,然后作为固定化抗原,检测人体内ＨＣＶ的抗体。我们对Ｃｏｒｅ和ＮＳ3的两种不同组合方式及其表达的研究,对于发展新的ＨＣＶ诊断试剂很有帮助,现将结果报道如下。1…     

胆固醇酯转运蛋白转基因动物的研究进展

胆固醇酯转运蛋白 (ＣＥＴＰ)是胆固醇代谢中的一种血浆酶 ,是胆固醇逆向转运系统中的关键蛋白质。ＣＥＴＰ催化血浆脂蛋白之间非极性脂质特别是胆固醇酯 (ＣＥ)的交换和平衡 ,关系到各种脂蛋白的颗粒大小和脂质组成 ,决定高密度脂蛋白 (ＨＤＬ)和低密度脂蛋白 (ＬＤＬ)质和量的变化 ,在胆固醇逆向转运中起关键作用 ,与动脉粥样硬化 (ＡＳ)的发生和发展密切相关。ＣＥＴＰ缺陷患者伴有明显的高α脂蛋白血症 (ＨＡＬＰ)的发现使人们对ＣＥＴＰ在脂代谢中的重要性有了更高认识。人ＣＥＴＰ遗传缺陷表型和ＣＥＴＰ转基因动物研究表明 ,ＣＥＴＰ…     

ACTA BOTANICA SINICA ,Vol.42 CONTENTS

Ｎｏ .1(Ｊａｎ .,2 0 0 1)ＡＲｅｗａｒｄｉｎｇＦｉｆｔｅｅｎＹｅａｒｓ:ＦｒｏｍＳＬＧｔｏＳＣＲ/ＳＰ11ＣＵＩＨａｉ＿Ｙａｎｇ ,ＬＡＩＺｈａｏａｎｄＸＵＥＹｏｎｇ＿Ｂｉａｏ……………………………………………… ( 1)ＴｈｅＳｔｒｕｃｔｕｒａｌＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＮｕｃｌｅｏｌａｒＤＮＡａｎｄＩｔｓＡｒｒａｎｇｅｍｅｎｔｉｎＮｕｃｌｅｏｌｕｓｏｆＡｌｌｉｕｍｃｅｐａＣｅｌｌｓ (ｉｎＥｎｇｌｉｓｈ)ＴＡＯＷｅｉ,ＺＨＡＮＧＬｉ＿Ｙｏｎｇ ,ＨＵＡＮＧＢａｉ＿Ｑｕ ,ＪＩＡＯＭｉｎｇ＿Ｄａ ,ＨＥＭｅｎ…     

小麦根质膜H^＋—ATPase的部分纯化

以小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）根为材料,采用不连续蔗糖密度梯度离心法制备高纯度质膜微囊。质膜经ＴｒｉｔｏｎＸ１００和ＫＣｌ处理后,再用Ｚｗｉｔｅｒｇｅｎｔ３１４增溶Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ,最后用硫酸铵沉淀得到部分纯化的质膜Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ。ＳＤＳＰＡＧＥ结果表明,经过上述步骤纯化,分子量为９４ｋＤ的膜蛋白组分得到富集;与质膜相比,其含量提高１５．７倍。部分纯化的质膜Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ可以水解ＡＴＰ,受Ｋ＋刺激,并被Ｎ,Ｎ′ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｍｉｄｅ（ＤＣＣＤ）抑制;ＡＴＰ水解活力被Ｎａ３ＶＯ４抑制９５％,但不被ＮａＮ３、ＮａＮＯ３和Ｎａ２ＭｏＯ４抑制。     

根据分子连接性指数和基团校正因子预测有机化合物在鱼体中的生物富集因子

研究了２３９种有机化合物的ＢＣＦ预测模型,结果显示根据分子连接性指数（ＭＣＩ）的线性模型不能准确计算及极性化合物的ＢＣＦ,也不适用于超疏水性化合物,在模型中引入基团校正因子后,极性经合物的计算误差明显降低。对数据进行曲线拟合,所得模型的估算精度进一步提高,最终确定以（＾０ｘ＾ｖ）＾２、（＾２ｘ＾ｖ）＾１／２、＾２ｘ、＾３ｘｃ、＾０ｘ＾ｖ及ＯＨ、ＮＨ２、ＮＯ２、ＮＣＯＯ等１０个基团校正团子为参数建立