小经验介绍——微波在蛋白质电泳染色和脱色中的应用

经过实验摸索和实践,我们发现一种利用微波处理在10 min内可使聚丙烯酰胺凝胶染色及脱色完成的方法.a 将电泳后的凝胶(厚度0 75 mm)取出,置于培养皿中用蒸馏水冲去残留缓冲液.b 加入染色液将凝胶完全浸泡其中,放入微波炉内高火档照射20 s,停留1 min,再照射10 s. c 取出染色液(回收还可再用2次),用蒸馏水冲去凝胶上残留染色液.d 加入脱色液,高火档照射20 s,取出脱色液,然后加入新鲜脱色液再照射20 s,重复 5～6次,直至背景清晰透明.     

微波在蛋白质电泳染色和脱色中的应用

经过实验摸索和实践 ,我们发现一种利用微波处理在10ｍｉｎ内可使聚丙烯酰胺凝胶染色及脱色完成的方法 .ａ 将电泳后的凝胶 (厚度 0 75ｍｍ)取出 ,置于培养皿中用蒸馏水冲去残留缓冲液 .ｂ 加入染色液将凝胶完全浸泡其中 ,放入微波炉内高火档照射 2 0ｓ,停留 1ｍｉｎ ,再照射 10ｓ.ｃ 取出染色液 (回收还可再用 2次 ) ,用蒸馏水冲去凝胶上残留染色液 .ｄ 加入脱色液 ,高火档照射 2 0ｓ ,取出脱色液 ,然后加入新鲜脱色液再照射 2 0ｓ,重复5～ 6次 ,直至背景清晰透明 .实践中我们认为应注意以下几点 :ａ 盛试剂的培养皿上面应盖一稍大的培养…     

用于测定小分子多肽的两种电泳方法的比较

对于小分子多肽的分析目前多采用甘油—SDS—PAGE系统,但经实践后发现,此系统电泳时间太长,导致小分子扩散丢失较多,小分子成像不清。后经用尿素代替甘油,同时降低三层胶的浓度,制成15.5%T(C=6%)的分离胶、10%T(C=3%)的间隙胶与4%T(C=3%)的浓缩胶,结果不但节省了电泳时间,且小分子多肽成像清楚。     

凝胶干胶的实验台制作法

目前,制作聚丙烯酰胺凝胶干胶的方法很多,大多数都是将凝胶干燥在玻璃板或凝胶支持膜上制得.下面介绍一种不用玻璃板,只用一张玻璃纸的简单经济、效果也好的凝胶干燥方法.　　1将脱色后背景清楚的凝胶浸泡在20%的甘油中,过夜.　　2将一张长度约为凝胶长度25倍,宽度比凝胶?..     

自制显示系统检测免疫印迹中的目的蛋白

目前蛋白免疫印迹显示系统有显色法和化学发光法,因化学发光法具有灵敏、快速、准确等特点而倍受科研工作者的青睐,但一般商品化的化学发光试剂盒价格颇为昂贵,为此,在参考文献的基础上作了一些改进,将Tris Cl的pH值从7.5提高到11.0,同时提高了对碘苯酚的浓度（从1mmol/L提高到2mmol/L）,得到了自制的化学发光试剂。首先用其检测了大肠杆菌中表达的2种不同分子量的蛋白（gam,13kDa;bet,30kDa）,发现当蛋白上样量为2~20ng时,各蛋白条带均清晰显示。随后的斑点免疫印迹实验表明：自制及进口化学发光试剂在检测酶标二抗效价方面有着同样高的敏感性。     

科技部委托中国科学器材进出口总公司颁发化学试剂特供卡

中国科学器材进出口总公司受科技部委托,承担改善化学试剂市场供应的工作,现正举行为国内著名科学家建立化学试剂特供档案,颁发化学试剂特供卡的活动。到目前为止,按照科技部的要求,已经为中国科学院化学部106位院士和生物学部101位院士,以及中国工程院化工、冶金与材料工...     

Superdex凝胶过滤玻璃柱的简单快速装填法

层析纯化成功与否 ,柱效 (塔板数 )是关键因素 ,好的介质若不配合合理的装柱方法 ,就无法装出理想的柱效 ,发挥不了介质应有的纯化功能 ,造成变相浪费。我们在现有条件基础上 ,经过多次反复实践 ,摸索出一种简单快速而柱效又高的Ｓｕｐｅｒｄｅｘ凝胶过滤柱的装填方法。1　材料与方法1 1　材料 :Ｓｕｐｅｒｄｅｘ　凝胶填料 (ｐｈａｒｍａｃｉａ) ;78ＨＷ -1型恒温磁力搅拌器 (杭州仪表电机厂 ) ;ＸＫ16 /6 0玻璃柱 (上海锦华实验器械厂 ) ;ＨＬ -2型恒流泵 (上海泸西仪器厂 )。1 2　方法1 2 1　将ｘｋ 16 /6 0柱清洗干净 ,倒入约 40ｍｌ双…