神经酰胺：细胞凋亡信号转号的第二信使分子

神经酰胺是细胞凋亡信号调控中的一个第二信使因子,许多应激刺激能激活神经鞘磷脂循环产生神经酰胺诱导多种细胞体系发生凋亡。神经酰胺介导细胞凋亡的机理尚未完全明了,可能是通过多个下游靶分子包括ＣＡＰＫ,ＣＡＫＫ,ＰＫＣ,ＳＡＰＫ／ＪＮＫ,ＣＰＰ３２,Ｂｃｌ－２以及Ｒａｓ－ＲａｃｌＪＮＫ／ｐ３８－Ｋ→ＧＡＤＤ１５３信号传导链等作用于不同的信号转导途径而诱导细胞凋亡的。     

MAPK信号转导通路对炎证反应的调控

丝裂原活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｈｅｎ－ａｃｔｅｖａｔｃｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓａ,ＭＡＰＫ）是生物体内重要的信号转导系统之一,参与介导生长、发育、化裂、分化、死亡以及细胞间的功能同步等多种细胞过程,在哺乳动物细胞中已发现和克隆了ＥＲＫ、ＪＮＫ／ＳＡＰＫ、ｐ３８／ＲＫ、ＥＲＫ５／ＢＭＫ１四个ＭＡＰＫ亚族。这些ＭＡＰＫ能被多种炎性刺激所激活,并对炎症的发生、发展起生重要调控作用。研究感染和炎症反应     

参与细胞凋亡的丝裂原活化蛋白激酶及其作用机制

丝裂原活化蛋白激酶家族（ＭＡＰＫｓ）参与细胞调亡的信号转导过程。在多数细胞中,ＪＮＫ／ＳＡＰＫｓ和ｐ３８诱导细胞调亡,ＥＲＫ促进细胞增殖;但在另一些细胞中则情况相反。ＭＡＰＫｓ途径与死亡受体途径之间存在一定的联系,它们间的交互作用尚待一步研究。     

应激活化的蛋白激酶在神经酰胺介导细胞凋亡中的作用

第二信使神经酰胺激活ＳＡＰ／ＪＮＫ,活化的ＳＡＰＫ／ＪＮＫ导致ＡＰ－１转录因子磷酸化,ＡＰ－１刺激自身表达,增强自身活性,介导细胞凋亡,神经酰胺及其代谢产物鞘氨醇和鞘氨醇－１磷酸酯分别激活ＪＮＫ－ｐ３８路径和ＥＲＫ路径,调节细胞增殖,分化或凋亡。     

p38 MAPK信号传导通路

丝裂原活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｏｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ,ＭＡＰＫ）介导了生长、发育,分裂,死亡,以及细胞间的功能同步等多种细胞生理功能,在哺乳动物细胞中已发现和克隆了ＥＲＫ、ＪＮＫ／ＳＡＰＫ,ＥＲＫ５／ＢＭＫ１和ｐ３８／ＲＫ四个ＭＡＰＫ亚族,这些新的ＭＡＰＫ介导了物理,化学反激,细菌产物,炎性细胞因子等多种刺激引起的细胞反应,ｐ３８亚族至少包括ｐ３８（α）,ｐ３８β,ｐ     

蛋白激酶C的激活转位和它介导的信号通路

蛋白激酶Ｃ是一系列丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶家族,已发现了至少十二种同功酶。在静止细胞中,它主要以非活化形式存在于胞浆中,由受体－Ｇ蛋白耦联的ＰＬＣβ激活便裂细胞膜上的磷脂而释放ＤＡＧ;与ＰＫＣ的结合引起了ＰＫＣ的别构激活;而通过其它信号途径激活的ＰＬＤ水解胞膜的磷脂酰胆碱（ＰＣ）产生的磷脂酸经磷脂酸酯酶产生的ＤＡＧ可能是ＰＫＣ持续激活的必要条件。在体外实验中,ＰＫＣ的持续激活是一些细胞分化所必须的。蛋白激酶Ｃ的激活首先引起了它转位到膜,有时转位到核,并在转位后继续保持磷酸化活性,同时对它的下游底物进行磷酸化导致它们的活化。ＰＫＣ可活化ＲａｆＳｅｒ／Ｔｈｒ蛋白激酶及ＮＦ－ｋＢ,介导细胞对外界的反应,包括对核基因表达的调节,引起细胞生长或分化等。由于Ｒａｆ可与活化的Ｒａｓ—ＧＴＰ结合从而定位到胞膜,说明蛋白激酶Ｃ与Ｒａｓ介导的Ｒａｆ－１／ＭＥＫ／ＭＡＰＫ信号通路间存在着“对话”。     

Gi耦联受体激活丝裂素活化蛋白激酶

Ｇｉ耦联受体激活丝裂素活化蛋白激酶丝裂素活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ,ＭＡＰＫ）是细胞外不同信息分子引起细胞增殖、分化和肥大等生物效应的共同信息传递通路。目前对生长因子和细胞因子等物质激活ＭＡＰＫ的细胞内...     

甲状旁腺素增强成骨样细胞ROS 17/2.8中酪氨酸蛋白磷酸化的研究

为了研究甲状旁腺素（ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｏｎｅ,ＰＴＨ）促成骨样细胞ＲＯＳ１７／２．８增殖分化的信号传递的机理,观察了ＰＴＨ对细胞内酪氨酸蛋白激酶（ｔｙｒｏｓｉｎｅｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅｓ,ＴＰＫ）活性及酪氨酸蛋白磷酸化水平的影响,并检测了ＰＴＨ对ｃ－ｒａｓｍＲＮＡ表达的诱导作用．结果表明,ＰＴＨ可增强细胞内ＴＰＫ活性,提高细胞内酪氨酸蛋白磷酸化水平,以及促进ｃ－ｒａｓｍＲＮＡ的持续表达．这些结果提示,ＰＴＨ促增殖的细胞内信息传递通路与酪氨酸蛋白激酶－ｒａｓ－ＭＡＰＫｉｎａｓｅ通路密切相关,而ＰＫＡ／ＰＫＣ通路的最终效应可能是通过与上述通路的ｃｒｏｓｓｔａｌｋ实现的     

G蛋白偶联受体激活丝裂原活化蛋白激酶的机理

多种Ｇ蛋白偶联受体的均能激活丝裂原活化蛋白激酶。Ｇｉ蛋白偶联受体主要通过其βγ亚基,依赖Ｒａｓ蛋白途径;在大多数哺乳类细胞中Ｇｓ蛋白偶联受体通过ＰＫＡ途径抑制Ｒａｓ依赖的ＭＡＰＫ活化,但在ＣＯＳ－７细胞,Ｇｓ蛋白偶联受体通过ＰＫＡ途径使表达的ＭＡＰＫ活化;Ｇｑ蛋白偶联受体主要通过ＰＫＣ途径依赖或非依赖于Ｒａｓ使ＭＡＰＫ活化。ＭＡＰＫ信号途径中ＥＧＦ受体,酪氨酸激酶及调节蛋白Ｓｈｃ等联级反应蛋白可能     

巨噬细胞免疫调变信号——PKA与PKC对MAPK信号通路的调节

以前的研究工作表明,细菌脂多糖（ＬＰＳ）可以调变抑制性巨噬细胞为增强Ｔ、Ｂ淋巴细胞及ＮＫ细胞活性,同时又能保持或增强其抗肿瘤效应。忆报道了在这一复杂的免疫调变过程中伴随有蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）和促分裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）信号转导通路的激活。为了探索免疫调变过程中其他信号对ＭＡＰＫ通路的影响,以ＬＰＳ调变小鼠腹腔抑制性巨噬细胞为模型,研究了ｃＡＭＰ／ＰＫＡ和佛波酯（ＰＭＡ）／ＰＫＣ信号对ＭＡＰＫ     

细胞信号转导分子在TNF—α诱导c—jun基因表达中的作用

前期研究表明ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）通过磷酸化心肌细胞增强因子２（ｍｙｏｃｙｔｅ ｅｎｈａｎｃｅｒ ｆａｃｔｏｒ２,ＭＥＦ２）转录因子家族成员调节ｃ－Ｊｕｎ蛋白表达。ｃ－ｊｕｎ的启动子区存在ＭＥＦ２位点,ＭＥＦ２转录因子家族成员以同源或异源二聚体形式与其结合。研究了ｐ３８和ＢＭＫ１（ｂｉｇ ＭＡＰ ｋｉｎａｓｅ１）在ＴＮＦ－α诱导ｃ－ｊｕｎ基因表达中的调控作用。ｐ３８上调ＭＥＦ２Ａ的转     

蛋白激酶B及其在磷脂酰肌醇3-激酶介导的信号转导中的作用

蛋白激酶Ｂ（ＰＫＢ）是原癌基因ｃ－ａｋｔ的表达产物,它参与由生长因子激活的经磷脂磷肌醇３－激酶（ＰＩ３Ｋ）介导的信号转导过程。与许多蛋白激酶相似,ＰＫＢ分子具有一特殊的ＡＨ／ＰＨ结构域（ＡＨ／ＰＨｄｏｍａｉｎ）,后者能介导信号分子间的相互作用。ＰＫＢ是ＰＩ３Ｋ直接的靶蛋白。ＰＩ３Ｋ产生的脂类第二信使ＰＩ－３,４,Ｐ２和ＰＩ－３,４,５－Ｐ３等均能与ＰＫＢ和磷酸肌醇依赖性蛋白激酶（ＰＤＫ）的ＡＨ／Ｐ     

pp60c-src在血管平滑肌细胞内丝裂原活化蛋白激酶激活中的作用

观察ｐｐ６０ｃ－ｓｒｃ在血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）诱导血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）内丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）激活中的作用,以了解ＡｎｇⅡ促ＶＳＭＣｓ增殖的信号转导过程。将合成的反义ｃ－ｓｒｃ寡脱氧核苷酸（ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅ－ｏｔｉｄｅｓ,ＯＤＮｓ）以脂质体包裹转染培养的大鼠ＶＳＭＣｓ,用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹测得细胞裂解液中ｐｐ６０ｃ－ｓｒｃ含量明显下降,免疫沉淀方法测得ｐｐ６０ｃ－ｓ     

用寡聚核苷酸片段筛选白色念珠菌MAPK的基因家族

促分裂原活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ,ＭＡＰＫ）是一类与哺乳动物ｐ３４＾ＣＤＣ２同源性很高的Ｓｅｒ／Ｔｈｒ蛋白激酶,在多个不同的信号转导途径中起作用。现有的实验语气表明,ＭＡＰＫ很可能在白色念珠菌形态发生中起作用。我们根据白色念念菌的已知的两个ＭＡＰＫ基因;ＣＥＫ１与ＭＫＣ１第Ⅶ亚结构域的核苷酸序列合成卫段２７ｎｔ的寡核苷酸,作为探针来筛选白色念穆     

蛋白激酶C和Na~＋－H~＋交换在ANGⅡ诱发心肌细胞肥大反应中的作用

血管紧张素（ＡＮＧ）Ⅱ在１０－１０－１０－６ｍｏｌ／Ｌ范围内剂量依赖性促进无血清培养新生大鼠心肌细胞蛋白质合成速率。蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（Ｓｔａｕ２ｎｍｏｌ／Ｌ）对心肌细胞基础状态３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ掺入无明显影响，但Ｓｔａｕ预处理３０ｍｉｎ，则可有效阻断ＡＮＧⅡ（１μｍｏｌ／Ｌ）对细胞蛋白质合成的刺激作用；单纯应用ＰＫＣ激活剂ＰＭＡ（１μｍｏｌ／Ｌ）可使心肌细胞蛋白质合成速率增加，与对照组相比，ＰＭＡ组３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ掺入量增加了４１．０４％。细胞Ｎａ＋－Ｈ＋交换抑制剂Ａｍｉｌｏｒｉｄｅ预处理也能阻断ＡＮＧⅡ刺激３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ掺入细胞蛋白质的作用。以上结果提示ＰＫＣ和Ｎａ＋－Ｈ＋交换的激活，可能是ＡＮＧⅡ诱发的心肌细胞肥大反应的重要胞内信息转导机制。本工作还观察到，阻断细胞Ｎａ＋－Ｈ＋交换后并不影响由ＰＫＣ激活导致的蛋白质合成增加，提示可能存在着ＰＫＣ和Ｎａ＋－Ｈ＋交换彼此相对独立地调节心肌细胞生长的途径。     

RSK2偶联丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)转导基因表达信号

ＲＳＫ２偶联丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）转导基因表达信号ＭＡＰＫ途径是介导多种生长因子引起细胞增殖分化的共同通路。当生长因子携带的信息传入细胞膜后,经一系列的磷酸化反应,激活ＭＡＰＫ,活化的ＭＡＰＫ依次从胞浆转位入细胞核,激活（磷酸化）转录因子ＥＬ...     

4α－PDD、PMA对去甲肾上腺素促进大鼠腹腔巨噬细胞Ⅰa抗原表达的影响

本文采用Ｃａ~２＋指示剂的分光光谱法测定巨噬细胞（Ｍφ）内Ｃａ~２＋浓度（［Ｃａ~２＋］ｉ）、ＡＰＡＡＰ桥联酶标法检测Ｍφ膜上Ⅰａ抗原的表达,研究肌醇磷脂代谢中第二信使分子甘油二酯（ＤＧ）在去甲肾上腺素（ＮＥ）促进ＭφⅠａ表达效应中的作用,以进一步探讨ＮＥ效应的跨膜信息传递机制。结果表明：蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂４αＰＤＤ（２５μｇ／ｍｌ）虽不影响ＮＥ（１０￣－８ｍｏｌ／Ｌ）升高Ｍφ［Ｃａ￣２＋］ｉ的效应,却显著减弱了ＮＥ促进ＭφⅠａ抗原表达的效应;而ＰＫＣ激动剂ＰＭＡ（１０ｎｍｏｌ／Ｌ）本身促进ＭφⅠａ抗原表达的作用不明显,也不能进一步增强ＮＥ促进ＭφⅠａ抗原表达的效应。结果提示：ＤＧ激活的ＰＫＣ系统也参与了ＮＥ促进ＭφⅠａ抗原表达的信息传递过程,并与另一第二信使分子肌醇－１,４,５－三磷酸（ＩＰ＿３）介导的Ｃａ￣２＋途径协同发挥作用。     

IL—18信号转导途径研究进展

白细胞介素１８（ＩＬ－１８）是新近发现的细胞因子,其独特的少ＴＡＴＡ型启动子、特殊的ｍＲＮＡ结构及其前体蛋白需ＩＬ－１β转化酶（ＩＣＥ）加工成熟的特点,便得ＩＬ－１８基因可广泛表达于多种类型的细胞,ＩＬ－１８ＩＬ－１８受体结合组成受体复合物,受体复合物信号通过ＩＲＡＫ－ＴＲＡＦ６途径激活ＮＦ－кＢ,及通过酪氨酸蛋白激酶（ＰＴＫ）的ＬＣＫ－ＭＡＰＫ信号途径诱导ＴＨ１细胞产生ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２等细胞     

丝裂素活化蛋白激酶参与内皮素刺激的兔主动脉平滑肌细胞增生

内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ,ＥＴ）是已知的体内活性最强的缩血管物质,其缩血管作用由Ｇ蛋白偶联受体所介导。但ＥＴ强大的促血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增生效应的机理尚未完全阐明。本研究选用培养的兔胸主动脉ＶＳＭＣ,探讨丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）在ＥＴ促细胞增生中的作用。结果表明：ＥＴ－１呈时间和浓度依赖性地促进细胞摄取￣３Ｈ－ＴｄＲ和激活ＭＡＰＫ,此作用可被蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ,ＰＫＣ）抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴＰ）,Ｈ－７和ＥＴ＿Ａ受体拮抗剂ＢＱ１２３所抑制,但不被酪氨酸激酶抑制剂ＨｅｒｂｉｍｙｃｉｎＡ（Ｈｅｒｂ）所抑制,用ＰＫＣ激动剂ＰＭＡ（Ｐｈｏｒｂｏｌｍｙｒｉｓｔａｔｅａｃｅｔａｔｅ）预处理ＶＳＭＣ,使其ＰＫＣ活性下调,可显著减弱ＥＴ－１对ＭＡＰＫ的激活能力。本结果提示：（１）ＭＡＰＫ参与ＥＴ－１所致的ＶＳＭＣ增生;（２）ＥＴ－１促细胞增生与激活ＭＡＰＫ的作用是由ＥＴ＿Ａ受体和ＰＫＣ介导的。     

毛细血管扩张性共济失调突变蛋白在细胞凋亡过程中被Caspase┐3降解

新近的研究揭示：ｃａｓｐａｓｅ蛋白酶在细胞凋亡中起着死亡执行者的重要功能．一些蛋白相继被证明在细胞凋亡中可被ｃａｓｐａｓｅ特异切割,其中参与ＤＮＡ损伤修复过程的聚ＡＤＰ核糖聚合酶（ＰＡＲＰ）以及ＤＮＡ依赖的蛋白激酶（ＤＮＡ－ＰＫ）,在细胞凋亡过程中被ｃａｓｐａｓｅ选择性切割具有特殊的功能意义．为探索与ＤＮＡ－ＰＫ催化亚基有较高同源性,含有ｃａｓｐａｓｅ切割位点,且功能上目前也被认为是感受ＤＮＡ损伤和参与信号传导途径的ＡＴＭ（Ａｔａｘｉａｔｅｌａｎｇ－ｉｅｃｔａｓｉａｍｕｔａｔｅｄ）蛋白,是否在凋亡过程中也可被切割而降解？应用体外转录与翻译系统获得ＡＴＭ蛋白的ＰＩ３Ｋ结构域,同时通过建立无细胞反应体系获得含ｃａｓｐａｓｅ活性的细胞抽提液,将两者在体外共同保温．结果发现：ＡＴＭ蛋白与ｃａｓｐａｓｅ－３能免疫共沉淀,ＡＴＭ蛋白的ＰＩ３Ｋ结构域可被ｃａｓｐａｓｅ－３特异切割,并观察到辐射诱发细胞调亡中ＡＴＭ蛋白的降解．从而进一步证实了ＤＮＡ损伤修复的抑制,促进细胞凋亡的发生．