胞质分裂阻滞细胞的微核检测及方法学初步研究

培养人体外周血淋巴细胞的微核检测,是近年来常用的体外短期检测方法之一,可用来评价被检理化因子对人体细胞的遗传毒性,及监测环境、职业接触等有害因子对人类的潜在致癌作用。为了进一步提高该方法的敏感性,根据微核起源于染色体断片与落后染色体的观     

一种快速简便的完整淋巴细胞微核制片法

微核测定是常用的短期测试法之一,可用来评价各种理化因子的诱变和潜在的致癌效应。为了发展人类细胞的检测系统,Heddle等首先研究了辐射对体外培养人外周血淋巴细胞微核的影响,由于采用染色体制片技术,故细胞膜破裂,精确计数微核有困难,后来一些作者采用改变低渗液或培养物直接推片等方     

人体末梢血微核测试法的研究

微核测试法(micronucleus test)是常用的遗传毒理学方法之一。近年来,被广泛用来评价各种理化因子的致癌、致突变效应、监察环境污染等,而且比较迅速而敏感(Wild,1978:Adler,1980;Tate et al.,1980;Heddle,1973;Schmid,1977)。以往常用的实验材料是某些动植物的组织(Heddle,1973;Schmid,1977;山东海洋学院遗传教研组,1981)。较近,有作者报导了人体静脉血和骨髓细胞微核法(Jensen,1977;Countryman,1976;云南省动物研究所二室辐射细胞组、上海市工业卫生研究所三室血液组,1978),我们首先简报了1滴人手指血的微核测试法(薛开先等,1982)。     

微核形成与细胞周期关系的初步研究Ⅰ.人体全血辐射处理后不同放置和培养时间对微核率的影响

本报告应用γ-射线诱发微核、放射性自显影等技术分析细胞周期,研究淋巴细胞微核形成与细胞周期间的定量关系。主要结果如下:(1)经400rad照射的静脉血,在室温下放置1.5小时,或在37℃下放置5小时,此时淋巴细胞属G_0期。和照射前相比,两组微核率均显著增加(P<0.01)。(2)照射静脉血经pHA刺激培养23—24小时收获细胞,此时转化淋巴细胞应属G_1期,分别计数转化和未转化(G_0期)淋巴细胞微核,与照射前未培养淋巴细胞相比有显著增加(P<0.01)。(3)400rad照射静脉血培养72小时后,淋巴细胞微核较培养前增加14.5倍。根据放射性自显影等细胞周期分析结果表明,微核在细胞周期各阶段均可形成。     

小鼠尾血淋巴细胞微核制片法

小鼠骨髓细胞微核测试法建立以来,获得了广泛的应用,可评价各种理化因子的致癌、致突变效应,并可了解对生殖细胞的遗传效应。制备小鼠骨髓细胞微核片,程序较复杂,且需处死动物,所以实验必须采用组间设计,显然没有采用自身对照、系统观察为合理和节约实验动物。我们采用肝素抗凝,甲基纤维素(下简称甲纤)促红细胞凝集,建立了仅需     

Co_Y一线照射离体人血诱发的琳巴细胞微核与剂量的关系

微核测定法是细胞遗传学的方法之一, Matte：等Iill首先用啮齿类动物骨髓细胞微核率 来测定疑有诱变活力的化合物,并称之为微核 侧定法。Heddle^[8]推荐使用这种简便而迅速的 方法来衡量染色体损伤。目前,该方法已广泛 用于评价理化因子诱变活力的研究上。辐射诱 发微核这一问题已有不少报道,都证明淋巴细 胞微核率和辐射剂量有密切关系^[1,2]。有的工 作还证明动物的整体照射和离体实验的效应是 一致的。这就提示了一种可能：用离体照射人 血所得到微核率的剂量效应曲线来估计事故条 件下人员所受的剂量。本实验的目的是建立 淋巴细胞微核率与辐射剂量之间关系的刻度 曲线,作为估计事故受照人员剂量的参考指 标。     

人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备失败可能原因分析

在开设人类外周血淋巴细胞培养实验中 ,我们采用的实验方法是 :将教师事先配制好的经试培无菌后的 ,含 2 0 %小牛血清的 RPMI1 64 0培养液分装到 2 5m L圆形培养瓶中 ,每瓶 5m L ,每个学生一瓶。实验从抽血→接种→培养→加秋水仙素→收集细胞制片→核型分析等步骤均由学生自己完成。实验的具体操作方法是 :每个实验班 ( 2 0人 )由两个学生 (男女各 1名 )自愿献血 ,静脉取血 4 m L,肝素抗凝 ,每个学生在超净工作台内向培养液内加入一定量血液 ,然后将培养瓶放进 3 7℃恒温箱中培养 72 h,在收集细胞制备染色体之前的 2～ 3h,向培养瓶中加…     

快中子照射诱发人淋巴细胞微核的剂量效应以及微核和染色体畸变的关系

中子主要由核反应产生,用放射源和一定 的靶物质,借助于（a"n）或（Y "n）反应,就能 射出中子。加速器中用高能粒子打击靶或反应 堆中的裂变过程都能产生中子流。尤其是近代 医学上中子治癌机的应用和核武器的发展,人 们接触中子的机会就逐渐增多。如果这些场合 安全防护或操作程序出了故障,就有产生过量 照射的危险。所以研究反映中子损伤效应的生 物学指标是必要的。中子以穿透力强为其特 点,它对外周血液尤其是淋巴细胞的辐射效应 是显著的。我们过去的工作已证明,人体接受 分次局部61C0照射后,用直接浓缩法发现外 周血淋巴细胞微核率增高和染色体畸变率有一 定相关^[1]。用X线照射诱发人淋巴细胞微核, 其剂量效应亦呈线性关系^[2]。为评价微核测定 在辐射损伤中的意义和提供实验依据,本实验 采用氖一氖中子发生器照射健康人离体血1),经 过培养诱发淋巴细胞微核,观察剂量效应以及 微核和染色体畸变之间的关系。     

雷公藤多甙诱发人外周血Go期淋巴细胞微核及核损伤的观察

本实验应用不同剂量的雷公藤多甙处理人外周血Ｇｏ期淋巴细胞,放置１８小时后,直接观察微核率及核损伤的变化。结果显示,雷公藤多甙对人外周血Ｇｏ期淋巴细胞微核率,核变形率和核碎裂率均无明显的影响,亦无明显的剂量依赖性增加。因此,作者认为,雷公藤多甙是一种对人类无潜在遗传毒性的药物,临床上可以安全作用,另一方面,本实验方法比传统的微核测试法更为直接,简便,敏感,有望成为一种简便实用检测化学诱变剂的诱变作用     

应用原位杂交技术检测X射线诱发的特定染色体的微核率

为了研究X射线与X染色体的微校率之间的关系．本实验利用原位杂交技术同时检测了经X射线诱发人双核淋巴细胞的7号和X染色体的微核率。结果发现：经2．5Gy的X射线照射后．X和7号染色体的微核率男性分别为3．4％和7．1％;女性分别为6．6％和6．0％。X和7号染色体微核率的实验观察值与理论预期值之间在统计学上无显著性差异。实验结果提示：X射线并不特异性引起X染色体的微核率增高。     

健康人及超量电子束照射病员淋巴细胞核异常的检测

本文报告了213例健康人不同年龄组的各种淋巴细胞损伤指标： 核变形、微核、核裂解、核固缩与核空泡等的自然发生率,并检测了21例受超量电子束照射的病人的核异常改变。作者认为,与常用的微核测试法相比,核异常检测在不增加工作量的情况下,可更敏感地反映遗传毒理因子对人体细胞不同程度的损伤,可用于受辐射污染人群的监察及体外评价其遗传毒理效应。     

对于“肝癌患者外周血淋巴细胞微核出现率的观察”一文的两点意见

对《肝癌患者外周血淋巴细胞微核出现率的观察》(实验生物学报第13卷第4期421页),有两点不同看法: 1.文中认为许多资料都曾指出微核不见于正常人,其根据不足。据笔者所知,绝大多数作者都认为正常人外周血淋巴细胞可以见到微核。在普通血片上直接观察,平均微核率自     

无机砷的细胞遗传效应研究

应用外周血淋巴细胞姐妹染色单体互换(SCE)和微核(MN)检测,以评价化学毒物对职业接触者染色体损害方面的研究已日益受到重视。砷的细胞遗传毒理研究多为离体动物试验,为了探讨砷对人类的遗传效应,我们在对砷作业者进行职业性体检的基础上,应用上述两     

丝裂霉素C诱发大鼠外周血G0期淋巴细胞核损伤指标的比较观察

本文用不同剂量的MMC处理大鼠外周血,放置18小时后直接制备淋巴细胞血涂片,进行观察。实验结果表明,MMC可诱发G_(?)期淋巴细胞的核损伤。本实验对各种核损伤指标进行了比较研究,发现微核、核变形和核碎裂等指标与MMC剂量间有很好的相关性。作者认为,大鼠外周血G_(?)期淋巴细胞核异常测试法比传统的微核测试法更敏感、合理,在致突变试验中可作为初筛的体外短期测试法,值得进一步研究。     

食管癌患者口腔脱落上皮细胞微核的观察

微核测试法已被广泛用于研究药物、辐射、 环境毒物等对机体的遗传损伤。以往多以外周 血淋巴细胞和骨髓为材料进行研究,由于操作 狡复杂,且取材过程中给受试对象带来痛苦,因 此进行人群普查常常有很多困难。同时,许多 致癌物的诱变性资料多是从细菌、淋巴细胞和 一些非＿L皮细胞系中获得,而致癌物对上皮细 胞的诱变性资料相对较少。近几年来,Stich 等。一‘1对接触致癌物的个体进行了一系列脱落 细胞（包括口腔、膀眺等）微核检测,发现这些个 体的微核出现率明显高于对照组,已有资料报 道食管癌患者外周血淋巴细胞微核出现率明显 高于正常人(1,21,但上皮细胞的微核出现率是否 也高于TL常人,尚未见报道。经过对Stich的 方法稍加改进,我们对食管癌患者的口腔脱落 细胞进行了微核检测     

培养人淋巴细胞分裂阻滞与常规微核测试法的比较研究 Ⅱ.丝裂霉素C的遗传毒性效应

为了确定胞质分裂阻滞微核测试法(CB-MNT)的实用价值,本研究用0.025-0.4μg/mL的丝裂霉素C(MMC)处理培养的人体外周血淋巴细胞,比较CB-与常规(C)-MNT检测遗传毒性的敏感性,结果表明:(1)在整个剂量范围内,两法测得的微核率(MNF)均有良好的剂量效应关系,但CB法测得MNF低于常规法,随剂量增加而加著;CB法测知的最低浓度为0.1μg/ml,常规法为0.025μg/ml,可见常规法的敏感性优于CB法;(2)我们首次比较了CB法与常规法所检测微核的平均体积,发现CB法检测微核的体积接近常规法的3倍,并提出由于微核形成前后,微核间及微核与主核间的融合,导致了微核体积的增大和数量的减少,进而引起了MNF的下降;(3)CB法检测健康人自发MNF明显高于常规法,这可能是CB法检测低剂量诱变剂效应,较常规法不够敏感的重要原因之一。最后作者结合文献讨论了CB-与C-MNT的实用价值。     

人胚绒毛组织微核测定法的建立及其在评价吸烟致突性研究中的应用

目前采用的动物骨髓细胞和人外周血淋巴细胞的快速检测DNA损伤的微核测定法,均不能反映环境因子对人类子代的致突变性。用人胚绒毛组织微核直接检测环境因子的致突变性研究,未见有国内外报道。为此,我们通过对妊娠10周内的507例人工流产的绒毛组织微核测定,显示人胚绒毛组织微核细胞率正常值为0.69±0.74‰(0—4.5‰,每例观察2000个间期细胞);女方不吸烟其丈夫吸烟的被动吸烟组和女方无主被动吸烟组分别为0.753±0.693‰和0.583±0.761‰,二者有显著性统计学意义(P=0.041);男     

~(60)Co-γ-线照射离体人血诱发的淋巴细胞微核与剂量的关系

微核测定法是细胞遗传学的方法之一,Matter等首先用啮齿类动物骨髓细胞微核率来测定疑有诱变活力的化合物,并称之为微核测定法。Heddle推荐使用这种简便而迅速的方法来衡量染色体损伤。目前,该方法已广泛用于评价理化因子诱变活力的研究上。辐射诱     

淋巴细胞微核的一种制片方法

微核测定法是在染色体分析方法的基础上,于本世纪七十年代初开始建立和发展起来的一种细胞遗传学测定方法.这种方法具有快速简便、评价标准客观和易于掌握等优点,目前已广泛应用于评定理化因素诱变活力的监测上.最近,我们用一种改良方法制备微核标本,得到淋巴细胞数量多、细胞保留胞浆、染色清晰的图象.现将此法介绍如下:     

微核形成与细胞周期关系的初步研究Ⅱ.微核形成的放射性自显影和显微形态学研究

本报告应用γ-射线处理、PHA刺激,放射性自显影等方法研究了微核在人淋巴细胞各周期阶段形成的形态学证据。结果表明,经体外照射的人体外周血,在其间期淋巴细胞各阶段:G_0、G_1、S和G_2期,均可有微核形成,并观察到微核形成的中间过程,核变形,核物质膨出并延伸,中间连丝断裂或在细胞质中消失,与主核完全脱离后微核形成。在有丝分裂中,后期细胞也观察到无着丝点染色体断片和落后染色体,它们有可能形成微核。这样看来,细胞周期各阶段均可能形成微核。作者还观察到胞外微核的形成,并认为它的增多可能是一种病理现象。