用绒毛组织微核评价母亲因素对人胚的致突变性

对507对欲作人工流产的夫妇进行断面调查及绒毛组织微核的测定,以探讨父母吸烟、饮酒及采取避孕措施等因素对子代的致突变性。结果显示:微核的发生率与母亲年龄、孕次、孕龄、既往流产史等自身的因素无关;各种避孕措施及少量饮酒均不具有诱发绒毛微核细胞率增加的作用。然而,男方吸烟、女方被动吸烟其微核细胞率为0.7645±0.0561‰高于饮酒组(0.5667±0.2004‰)和非吸烟对照组(05522±0.0616‰),与对照组有显著性统计学意义(P<0.05)。男方配偶吸烟兼饮酒者其微核发生率最高(0.7944±0.0754‰),说明吸烟与饮酒对诱发绒毛微核的产生有协同作用的趋势。本文并对男方吸烟和/或女方被动吸烟可诱发胚胎绒毛组织细胞DNA和/或纺锤体装置的损伤,进行了探讨,提出应引起人们的高度重视,并建议利用人类绒毛组织微核测定法作为监测环境致突变因子对人类下一代影响的方法。     

表面活性剂、酸雨和Cd^2＋复合污染对蚕豆胚根细胞核的毒性

用蚕豆根尖微核技术研究了Cd^2+单因子以及与表面活性剂、模拟酸雨复合污染时对植物细胞的毒性作用。结果表明,Cd^2+浓度在0～10．0mg·L^-1范围内,对蚕豆胚根细胞微核的形成有强烈的诱导作用,Cd^2+浓度6．0mg·L^-1时的细胞微核率为13．85‰,对照组的微核率为4．53‰,此时污染影响指数(PI)为3．06;当环境中存在表面活性剂LAS1．0mg·L^-1或pH值降到4．5和3．5时,同-Cd^2+浓度下,蚕豆根尖细胞微核率、PI降低,同时伴有核变形,细胞中颗粒物增多,胚根组织不容易分散等症状,根的生长受到抑制,说明表面活性剂、酸雨对Cd^2+的毒性有协同作用。pH3．5的酸雨环境中Cd^2+对蚕豆细胞的损伤程度比pH4．5酸雨环境高,在检测高浓度、强毒性污染物的致突变效应时,应作至少3个稀释倍数,找出蚕豆根尖细胞最高微核率及PI。     

蚕豆根尖细胞微核技术检测合成氨工业水的遗传毒性

目的:探讨了合成氨工业水处理前后对蚕豆根尖细胞微核率的影响。方法:选取某化工厂生产流程中3个有代表性的水样,同时以蒸馏水(CK)为阴性对照,以不同浓度(0.5、5、50、500μg/L)的环磷酰胺处理为阳性对照,共5个处理组水平,蚕豆根尖细胞微核试验测定其MCN‰。结果:洗煤气水、洗甲醇水可诱导蚕豆根尖细胞产生较高的MCN‰与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.01),并分别相当于50μg/L和5μg/L环磷酰胺的致突变效应。经处理后的生化出水致突变性显著降低。结论:合成氨工业水具有较强的致突变性,蚕豆根尖细胞微核技术可作为合成氨工业水的遗传毒性检测。     

表面活性剂、酸雨和Cd2+复合污染对蚕豆胚根细胞核的毒性

用蚕豆根尖微核技术研究了Cd²⁺单因子以及与表面活性剂、模拟酸雨复合污染时对植物细胞的毒性作用.结果表明,Cd²⁺浓度在0～10.0mg·L^-1范围内,对蚕豆胚根细胞微核的形成有强烈的诱导作用,Cd²⁺浓度6.0mg·L^-1时的细胞微核率为13.85‰,对照组的微核率为4.53‰,此时污染影响指数(PI)为3.06;当环境中存在表面活性剂LAS1.0mg·L^-1或pH值降到4.5和3.5时,同一Cd²⁺浓度下,蚕豆根尖细胞微核率、PI降低,同时伴有核变形,细胞中颗粒物增多,胚根组织不容易分散等症状,根的生长受到抑制,说明表面活性剂、酸雨对Cd²⁺的毒性有协同作用.pH3.5的酸雨环境中Cd²⁺对蚕豆细胞的损伤程度比pH4.5酸雨环境高.在检测高浓度、强毒性污染物的致突变效应时,应作至少3个稀释倍数,找出蚕豆根尖细胞最高微核率及PI.     

甲酸棉酚使用者的姐妹染色单体互换和微核的检测

对12名正常男子和11名口服甲酸棉酚的男子外周血淋巴细胞培养后进行SCE分析,以及12名正常对照男子和13名口服甲酸棉酚男子的徽核测定表明:(1)试验组SCE平均值为3.56±0.14/细胞,SCE范围为0—14/细胞,对照组SCE平均值为4.26±0.13/细胞,SCE范围为0—13/细胞,两者间差别在统计学上无显著意义(P>0.05);(2)试验组的平均徽核率为0.36‰,与对照组0.24‰比较,两组间未发现有显著差异。表明甲酸棉酚不引起服药者淋巴细胞SCE和微核率的增加。     

N_1N'—二甲基甲酰胺对小鼠骨髓多染性红细胞微核出现率的效应

本研究采用微核测定方法来评价N,N′—二甲基甲酰胺(N,N′—Dimethyl formamide简称DMF)对小鼠骨髓多染性红细胞微核出现率的致突变效应。处理结果表明:单次注射不同剂量的DMF,其中1.0mg/kg(体重)剂量组的多染性红细胞微核出现率有明显的上升趋势(4.077‰),当剂量增加到6.0mg/kg时,多染性红细胞微核出现最高峰,微核率为4.374‰,表明该剂量使微核显著增高;随着剂量的继续增加微核出现率反而随之下降。 多次连续注射(每隔24小时注射一次)DMF1.0mg/kg微核出现率为5.204‰,比单次注射相同剂量的微核率高,说明药物有积累的遗传毒理作用。     

补骨脂抑制人工关节假体周围骨溶解的研究*

摘要目的：探讨中药补骨脂对人工关节置换术后假体周围骨溶解,假体无菌性松动的核因子资B受体活化因子配体- 核因子资B 受体活化因子受体- 骨保护素(RANKL-RANK-OPG)信号通路的作用。方法：取24 只200± 5 g雌性SD大鼠,随机分为A、B、C 组,均注射钛颗粒溶液建立骨溶解模型,术后A 组采用中药补骨脂水溶液腹腔注射,B 组采用外源性OPG 腹腔注射作为阳性对 照,C 组采用生理盐水腹腔注射作为阴性对照。给药4 周后,通过免疫组化及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组动物体内 RANKL/RANK的表达水平变化。结果：用药4 周后,3 组12 只大鼠背部气囊均为厚壁囊腔,骨溶解模型成功建立,免疫组化及 RT-PCR 检测RANKL/RANK 均呈阳性表达。免疫组化RANKL平均光密度(AOD)值A组(0.168± 0.017)、B 组(0.147± 0.009)明显 低于C 组(0.314± 0.011),差异有统计学意义(P＜0.05);A 组、B组之间比较无明显差异。RANK AOD值测定A组(0.172± 0.015)、 B 组(0.193± 0.045)明显低于C 组(0.342± 0.007),差异有统计学意义(P＜0.05);A 组、B 组之间比较无明显差异。RT-PCR 检测 RANKL相对量A 组(0.575± 0.143)、B 组(0.543± 0.174)明显低于C 组(0.951± 0.362),差异有统计学意义(P＜0.05);A 组、B 组之 间比较无明显差异。RANK 相对量A 组(0.433± 0.025)、B组(0.611± 0.209)明显低于C 组(0.871± 0.211),差异有统计学意义(P＜ 0.05);A 组、B 组之间比较无明显差异。结论：中药补骨脂对人工关节置换术后假体周围骨溶解,假体无菌性松动具有抑制作用。     

污水和污水土地处理系统中各种水质对华西蟾蜍蝌蚪红细胞微核率的影响

本文使用蝌蚪红细胞微核率作为指示器研究明通河污水和用污水土地处理系统处理后水质的致突变性。蝌蚪在各种水样品中暴露7天。采心脏血制片。在对照组中,微核率分别为4.40‰和4.68‰。1/4明通河污水组诱发蝌蚪的微核率是17.01‰。同对照组相比有明显的差异。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇抑制体外培养人外周血单个核细胞低分子量蛋白酶体-2表达

探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对人外周血单个核细胞参与抗原呈递的低分子量蛋白酶体-2(LMP-2)表达的影响。采用流式细胞术(FCM)和半定量RT-PCR方法从蛋白质和mRNA水平分析了不同剂量DON对体外培养人外周血单个核细胞LMP-2分子表达的影响及其量效关系。FCM定量检测结果表明,不同浓度DON处理均可一定程度抑制人外周血单个核细胞LMP-2的表达,50ng/mlDON组、100ng/mlDON组、1000ng/mlDON组和2000ng/mlDON组LMP-2平均荧光强度分别为6.99±0.72、6.21±0.55、5.34±0.56和5.03±0.43,在50～2000ng/mL范围内随着DON浓度增加,外周血单个核细胞LMP-2表达降低,与DON浓度呈显著负相关(r=0.824,P<0.01)。半定量RT-PCR结果显示,不同浓度DON处理均可抑制人外周血单个核细胞LMP-2mRNA表达。DON在蛋白质和mRNA水平可剂量依赖地抑制体外培养的人外周血单个核细胞LMP-2的表达。     

自然流产患者绒毛和蜕膜中ZEB1 的差异性表达及意义*

摘要目的：检测锌指结合蛋白（zinc finger E-box-binding protein ,ZEB1）在自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的差异性表达。方法： 选取2010 年3 月到2011 年3 月在我院妇产科门诊进行人工流产的患者,分为正常人工流产（对照组50 例）和自然流产（实验组 50 例）两组,两组年龄和孕周间差异无统计学意义（P＞0.05）。用荧光实时定量PCR（qRT-PCR）技术检测在绒毛和蜕膜组织中 ZEB1 mRNA的表达量。结果：自然流产患者绒毛（0.835± 0.047）中ZEB1的表达量低于对照组（1.942± 0.095）,自然流产患者蜕 膜（0.65± 0.058）中ZEB1 的表达量低于对照组（1.13± 0.084）,差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论：绒毛及蜕膜组织中ZEB1 的 异常表达可能参与自然流产的发生发展过程。     

人体末梢血微核测试法的研究

微核测试法(micronucleus test)是常用的遗传毒理学方法之一。近年来,被广泛用来评价各种理化因子的致癌、致突变效应、监察环境污染等,而且比较迅速而敏感(Wild,1978:Adler,1980;Tate et al.,1980;Heddle,1973;Schmid,1977)。以往常用的实验材料是某些动植物的组织(Heddle,1973;Schmid,1977;山东海洋学院遗传教研组,1981)。较近,有作者报导了人体静脉血和骨髓细胞微核法(Jensen,1977;Countryman,1976;云南省动物研究所二室辐射细胞组、上海市工业卫生研究所三室血液组,1978),我们首先简报了1滴人手指血的微核测试法(薛开先等,1982)。     

文蛤肉水解液的致突变性

目的评价文蛤肉水解液的致突变性,为文蛤的开发利用提供实验数据。方法采用Ames试验、小鼠嗜多染红细胞骨髓微核试验和CHL细胞体外染色体畸变试验3项致突变性试验,检测文蛤肉水解液有无致突变作用。结果 Ames试验中文蛤肉水解液各剂量组回变菌落数均在正常范围内,均未超过自发回变菌落数的2倍,在加与不加S9时5株试验菌株结果为阴性。CHL细胞体外染色体畸变试验,文蛤肉水解液各剂量组的染色体畸变率与阴性对照组比较,差异无显著性(P0.05),结果为阴性。小鼠骨髓微核试验,各剂量组的微核率与阴性对照组比较,差异无显著性(P0.05),结果为阴性。结论在本试验条件和范围下,文蛤肉水解液未见潜在的致突变作用。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对人外周血单个核细胞 HLA-I分子表达的影响

研究探讨了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对人外周血单个核细胞HLA-I(human leucocyte cyte antigen I)分子表达影响.采用流式细胞术(FCM)和免疫印迹方法研究了不同剂量DON对体外培养人外周血单个核细胞表面HLA-I分子表达的影响及其量效关系.FCM定量检测结果表明,不同浓度DON处理均可一定程度降低人外周血单个核细胞表面HLA-I分子的表达,DON 50ng/mL、100ng/mL、1000 ng/mL和2000 ng/mL组HLA-I类分子的平均表达量分别为6.92±0.68、6.64±0.69、5.95±0.48和5.48±0.77,在50～2000ng/mL范围内随着DON浓度增加,外周血单个核细胞HLA-I分子表达降低,两者呈显著负相关(r=0.737,P＜0.01).Western印迹结果显示,大剂量DON(1000ng/mL和2000ng/mL)组人外周血单个核细胞HLA-I分子表达明显减弱.研究结果表明脱氧雪腐镰刀菌烯醇可剂量依赖地抑制体外培养的人外周血单个核细胞HLA-I分子的表达.     

微核检测技术的应用--中学生物学课外活动的好题材

微核检测技术是一项非常有效而实用的实验技术,常被用于进行环境监测分析。它是一种在世界范围内广泛推广运用的环境致突变性检测技术,同时也是我国水环境生物测试的规范方法,可以用于检测水体的致突变性。在中学生物学的课外活动中,结合绿色奥运等项活动,利用微核检测技术研究各种因素对生物体的影响作用,是一个非常可行而有意义的活动。     

低强度He-Ne激光照射人外周血淋巴细胞两组试验结果的分析

本文采用染色体畸变 (chromosomalaberration CA)试验和微核 (micronucleus)试验两种方法对低强度He Ne激光辐照育龄妇女外周血淋巴细胞。激光能量密度分别为 14.31J cm2 (辐照 5′)、2 8.6 2J cm2 (辐照 10′) ,5 7.2 4J cm2(辐照 2 0′) ,114.5 2J cm2 (辐照 40′)。照射血样后 ,染色体畸变试验检测其淋巴细胞染色体畸变率 ,激光照射及空白对照组 ,血样染色体畸变率分别为 4.2 9‰、3.96‰、3.81、3.5 9‰和 4.19‰ ,X2 检验无显著意义 (P >0 .0 5 )。阳性对照丝裂霉素MMC处理的血样淋巴细胞CA率平均为 14.41‰ ,明显高于激光照射和空白对照组 ,X2 检验有显著差异(P <0 .0 1)。微核试验检测结果 ,微核染色体分别为 1.0 2‰ ,1.17‰ ,1.18‰ ,1.31‰和 1.19‰对照 ,经统计分析激光照射各组与对照组微核率均在 2‰以下 (P >0 .0 5 ) ,属正常人体微核范围内。结果显示两组试验监测诱变均具有一致性。证明He Ne激光辐照人体细胞对染色体无致畸效应。且表明He Ne激光在治疗范围内应用安全、有效、不会对不体造成危害。     

I、Ⅱ型糖尿病和透析患者的肠道内环境与生化指标的比较研究

对Ⅰ、Ⅱ型糖尿病及透析患者的肠道内环境和血液指标进行了比较观察.肠内细菌群的检测采用光冈复合式法;氨和硫化物的测定,采用Terada的方法;吲哚及臭素等的测定方法采用同吉原方法.临床主要生化指标观察方法,采用美国康宁644电解质分析仪和美国RA-1000全自动生化分析仪.随机选取住院的Ⅰ、Ⅱ型糖尿病以及透析患者各10名对肠道内环境以及血离子、肾功能进行检测分析.结果表明(1)肠内细菌群变化Ⅰ型糖尿病患者,双歧杆菌数为7.73±0.44(log CFU/g),占肠内总菌数的百分率为(0.84±0.75)‰.腐败菌数亦为8.14±0.37.Ⅱ型糖尿病患者,双歧杆菌数为7.88±0.34(log CFU/g),占肠内总菌数的百分率为(2.40±3.18)‰.腐败菌数亦为7.99±1.15.透析患者,双歧杆菌数为7.76±0.42(log CFU/g),占肠内总菌数的百分率为(0.78±0.92)‰.腐败菌数亦为8.33±0.50.并检测到绿脓杆菌,其检出率为40%.(2)腐败物质的变化Ⅰ型糖尿病患者粪便中氨为823±67.2(μg/g);硫化物为50.7±16.0;粪便中苯、甲酚、吲哚、粪臭素等的变化,吲哚、粪臭素分别为57.1±12.1、53.5±11.2(μg/g).Ⅱ糖尿病患者粪便中氨为759.9±62.9(μg/g);硫化物为30±8.3.吲哚、粪臭素分别为40.1±9.9、36.5±9.1(μg/g).透析患者粪便中的氨为1 006.6±164.9(μg/g);硫化物为80±9.9.吲哚、粪臭素分别为78.7±9.7、77.9±10.1(μg/g).(3)血清无机离子的检测结果Ⅱ型糖尿病人的肾功、尿素、肌酐,尿素、肌酐、尿酸结果在正常范围内,肾脏无实质性损伤,但结果为正常值的上限,尿素5.24±2.11(mmol/L),肌酐93.8±6.15(μmol/L),尿酸0.27±0.04(mmol/L),有肾损伤的可能.Ⅰ型糖尿病人的肾脏已有轻度的实质性损害,尿素7.75±2.29(mmol/L),肌酐120.1±62.91(μmol/L),尿酸0.29±0.04(mmol/L).透析病人的肾脏已严重实质性损伤,尿素44.2±10.50(mmol/L),肌酐702.32±164.98(μmol/L),尿酸0.43±0.13(mmol/L).     

用微核试验研究小枣的抗突变作用

目的:应用微核试验(Micronucleus test,MCNT)技术研究小枣汁对环磷酰胺(CP)的抗突变作用的影响.方法:使用蚕豆根尖细胞微核技术进行微核率检测.结果:结果表明,不同浓度的小枣汁对环磷酰胺诱发的蚕豆根尖细胞微核有明显的抑制作用,1号-阳性和阴性对照试验组的微核率分别为52‰、30‰、26‰、16‰、10‰、9‰、70‰、7‰,小枣汁使CP诱发的微核率从52.0±5.3‰降低至9.7±2.5(P<0.001).结论:说明小枣汁对CP诱发的遗传损伤具有明显的修复、保护以及抗突变作用.     

CXCL10和MMP-13在妊娠滋养细胞疾病滋养细胞中的表达及其临床意义

目的检测妊娠滋养细胞疾病滋养细胞中CXCL10和MMP-13表达情况,探讨其在滋养细胞疾病浸润和转移中的作用。方法采用免疫组织化学Powervision法检测40例早孕绒毛,30例葡萄胎,18例葡萄胎恶变(随访发生恶变),35例滋养细胞肿瘤(28例绒癌,7例胎盘部位滋养细胞肿瘤)中CXCL10和MMP-13的表达。结果CXCL10和MMP-13在滋养细胞肿瘤中表达阳性率和免疫反应性强度最高;在葡萄胎恶变组中表达阳性率和免疫反应性强度较高,但是低于在滋养细胞肿瘤中的表达阳性率和免疫反应性强度;在葡萄胎组和早孕绒毛组中表达阳性率和免疫强度较低。CXCL10和MMP-13在滋养细胞肿瘤中的表达,年龄<40岁组中表达低于年龄>40岁组;在临床分期分组(Ⅰ、Ⅱ)中表达低于临床分期分组(Ⅲ、Ⅳ);在FIGO预后评分分组低危组中表达低于高危组。结论CXCL10和MMP-13在早孕绒毛组织中低表达,而在滋养细胞肿瘤中高表达,提示其可能参与滋养细胞疾病的浸润和转移过程,因此联合检测CXCL10和MMP-13的表达可能对葡萄胎恶变的早期诊断以及对滋养细胞肿瘤的预后评估提供依据。     

镰形棘豆正丁醇提取物对小鼠的致突变试验

目的:评价镰形棘豆的正丁醇提取物对小鼠的致突变性.方法:小鼠随机分成6组,设阴性对照组(Ⅰ组)、阳性对照组(Ⅱ组)和4个剂量组(Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组和Ⅵ组),4个剂量组经口给予镰形棘豆正丁醇提取物的剂量分别为800mg/kg、100mg/kg、2000mg/kg、4000mg/kg,于给药后第2d取材观察小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核率,于第35d取材来观察精子畸形率的变化.结果:镰形棘豆正丁醇提取物对小鼠微核细胞的产生及致精子畸形存在剂量-效应关系.Ⅲ组、Ⅳ组与Ⅰ组比较差异不显著(P＞0.05);Ⅴ组、Ⅵ组与Ⅰ组比较均差异显著(P＜0.05).结论:低浓度的镰形棘豆正丁醇提取物对小鼠的骨髓嗜多染红细胞和精子没有致突变作用,而高浓度的对小鼠的骨髓嗜多染红细胞和精子具有致突变作用.     

cGMP能够预防神经元的自发死亡

动物的神经中枢在发育过程中存在神经元的自发死亡现象。例如,在鸡胚发育过程中,其脊髓腰部前角运动细胞外侧柱的细胞数目从胚胎第6天的22838±731个减至胚胎第10天的15018±537个,减少了34%。神经元的死亡或存活与靶组织等许多因素有关。在神经肌肉接头形成过程中,脊髓内cGMP含量增加的现象,引起了人们的兴趣。作者选用5～9天胚龄的鸡胚,每天向已形成血管的绒毛膜尿囊上滴加0.91mg/0.2ml的二丁酰cGMP。在胚龄第10天处死胚胎,经过固定、包埋、染色,连续切片等步骤,计算脊髓腰部外侧柱的细胞数,共19540±516个,仅比第6天下降14%,说明二丁酰cGMP可下降细胞的自发死亡率。用等克分子的8-溴cGMP处理鸡胚,作用大致相同。二丁酰cGMP降低神经元自发死亡率可能是