微核形成与细胞周期关系的初步研究 Ⅲ.丝裂霉素c诱发人淋巴细胞染色体畸变与不同周期阶段的微核形成

为了研究染色体畸变与微核形成的关系,本实验用不同浓度的丝裂霉素C(MMC,0.025—0.4μg/ml),处理人外周血淋巴细胞,观察中期染色体畸变与不同细胞周期形成的微核间的关系。获得如下主要结果:(1)MMC诱发的染色体畸变细胞率(ACF),未经培养的G_0期淋巴细胞的微核细胞率(NC-MNCF)以及培养的淋巴细胞的微核细胞率(C-MNCF),在一定剂量范围内均呈剂量依赖性增加,并可用幂回归方程描述;(2)微核形成与染色体畸变全然无关的NC-MNCF,和C-MNCF一样,与ACF呈良好的正相关;(3)用胞质分裂阻滞(CB)法,检测MMC诱发的CB-MNCF,较C-MNCF无显著提高,MNCF/ACF的比值较小,并随着MMC剂量增加从0.15左右降到0.03。所有上述结果表明,不能简单理解微核形成与染色体畸变间的关系,在分裂的细胞群体中,中期染色体畸变可能仅是微核形成的一种来源。     

老年人淋巴细胞微核率及其一些影响因素的初步观察

衰老与体细胞突变是密切相关的过程,随 着进人老年期,染色体畸变、微核形成和基因突 变均明显增加［[6,91,另一方面,对于多数肿瘤随 着年龄的增长其发病率亦有增加的趋势,同时 癌变与染色体畸变的关系也很密切[14。微核 测试法是研究染色体畸变及细胞核损伤的简便 而敏感的指标之一[3.71,故本实验应用人体末梢 血微核测试法‘31,在较大样本中观察了老年人 的自发微核率及其影响因素,并与其他年龄组 资料进行比较分析,以期为体细胞遗传结构损 伤与衰老、癌变的关系积累资料。     

微核形成与细胞周期关系的初步研究——Ⅳ.化学诱变剂诱发人淋巴细胞间期各阶段的微核形成

本实验应用具有诱变作用的抗癌药:噻地哌、长春新碱,乙双吗啉等,体内或体外处理诱发人体外周血淋巴细胞微核,通过控制细胞培养时间,放射性自显影及中期细胞阻滞等方法,定量地分析了细胞间期各阶段的微核率(MNF)。本组实验结果表明,间期各阶段均可有不同程度的微核形成,其中最多的是G_1期,其次是G_2期和G_0期。S期细胞的MNF较G_1期有极显著的下降,这提示大部分G_1期的微核细胞不能进入S期,使细胞增殖中止,这可能是抗癌药物杀伤肿瘤细胞的机制之一。     

一种快速简便的完整淋巴细胞微核制片法

微核测定是常用的短期测试法之一,可用来评价各种理化因子的诱变和潜在的致癌效应。为了发展人类细胞的检测系统,Heddle等首先研究了辐射对体外培养人外周血淋巴细胞微核的影响,由于采用染色体制片技术,故细胞膜破裂,精确计数微核有困难,后来一些作者采用改变低渗液或培养物直接推片等方     

人胚细胞提取物抗突变作用的研究

本文应用体外培养人淋巴细胞和小鼠骨髓微核与染色体畸变检测,研究了人胚细胞水提物(胚提物)的遗传毒性和抗突变效应。结果表明,(1)胚提物(3和30μg/ml,下同)可显著抑制培养人淋巴细胞的自发和γ-射线诱发的微核形成;(2)胚提物对培养淋巴细胞的自发染色体畸变无明显影响,但可显著抑制丝裂酶素C(MMC)诱发的染色体畸变; (3)胚提物显著抑制环磷酰胺诱发的小鼠骨髓多染性红细胞微核(PCE-MN)的增加; (4)胚提物的上述抗突变效应呈剂量依赖性增加。因此,作者认为,人胚细胞水提物是一种抗突变剂, 可望用于肿瘤的化学预防,并可用作为肿瘤放疗和化疗的辅助药物,以减少毒付反应和二次肿瘤的发生率。 Abstract:Genetially toxic and antimutagenic effects of the aqueous extracts of human fetal cells(HFCAE) against mutagen-induced chromosomal aberrations and micronucleus formation in human lymphocytes in vitro and bone marrow of mice were studied.HFCAE (3 and 30 μg/ml)significantly inhibited spontaneous and γ-rays-induced micronucleus formation and MMC-induced chromosomal aberrations in human lymphocytes in vitro.HFCAE (3 and 30μg/ml) strongly suppressed also micronucleus formation induced by CP in PCEs of mice.These antimutagenic effects of HFCAE were dose-dependent.Our results suggest that HFCE might be an antimutagen and have potential value in its clinical application.     

应用变性高效液相色谱技术建立胸苷酸合成酶基因多态检测平台

TS基因5′非翻译区(5′ untranslation region, 5′UTR)增强子区域(TS enhancer region, TSER)存在28 bp的2次(2R)、3次(3R)的串联重复多态, 在3R等位基因第二次重复中还存在一个G→C的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNPs), 同时在3′非翻译区(3′ untranslation region, 3′ UTR)存在6个碱基片段缺失/插入多态。这些多态形式的存在影响了TS基因mRNA的稳定和翻译效率, 并可导致不同TS基因型肿瘤患者对以5-fuorouracil (5-FU)为基础的化疗疗效产生差异。为提高TS基因型临床检测的效率和准确性, 方便、快捷、准确和自动化区分各种纯合及杂合基因型, 设计多重PCR反应, 同时扩增TS基因5′ 和3′ 非翻译区多态所处片段。利用DHPLC技术建立TS基因多态性检测平台, 在非变性条件下, 通过优化DHPLC 洗脱梯度, 同时检测5′ TSER区的串联重复多态和3′ UTR片段长度多态; 在变性条件下, 检测5′ TSER区单核苷酸多态。同时采用PCR-RFLP和DNA 测序方法, 验证DHPLC分析结果。     

培养人淋巴细胞分裂阻滞与常规微核测试法的比较研究 Ⅱ.丝裂霉素C的遗传毒性效应

为了确定胞质分裂阻滞微核测试法(CB-MNT)的实用价值,本研究用0.025-0.4μg/mL的丝裂霉素C(MMC)处理培养的人体外周血淋巴细胞,比较CB-与常规(C)-MNT检测遗传毒性的敏感性,结果表明:(1)在整个剂量范围内,两法测得的微核率(MNF)均有良好的剂量效应关系,但CB法测得MNF低于常规法,随剂量增加而加著;CB法测知的最低浓度为0.1μg/ml,常规法为0.025μg/ml,可见常规法的敏感性优于CB法;(2)我们首次比较了CB法与常规法所检测微核的平均体积,发现CB法检测微核的体积接近常规法的3倍,并提出由于微核形成前后,微核间及微核与主核间的融合,导致了微核体积的增大和数量的减少,进而引起了MNF的下降;(3)CB法检测健康人自发MNF明显高于常规法,这可能是CB法检测低剂量诱变剂效应,较常规法不够敏感的重要原因之一。最后作者结合文献讨论了CB-与C-MNT的实用价值。     

健康人及超量电子束照射病员淋巴细胞核异常的检测

本文报告了213例健康人不同年龄组的各种淋巴细胞损伤指标： 核变形、微核、核裂解、核固缩与核空泡等的自然发生率,并检测了21例受超量电子束照射的病人的核异常改变。作者认为,与常用的微核测试法相比,核异常检测在不增加工作量的情况下,可更敏感地反映遗传毒理因子对人体细胞不同程度的损伤,可用于受辐射污染人群的监察及体外评价其遗传毒理效应。     

食管癌患者放射敏感性与微核指标的研究

应用末梢血微核测试法,采用自身对照,系统地观察了100例食管癌病人在放疗过程中微核率的动态变化,分析了个体放射敏感性,并结合临床疗效进行预测的探讨,获得如下结果:(1)在放疗过程中,随着照射累积剂量的增加,全组平均微核率呈正比例增加,配得直线方程为(?)=0.6390+0.3772D;(2)本组病员对放射线的反应各不相同,大致可分为四种类型,它们的放射敏感性顺序是弱型((?)=0.1838+0.1285D)<一般型((?)=0.3908+0.3413D)<抛物线型((?)=0.8997+0.8408D-0.0846D)<敏感型((?)=10~(-0.0332+0.1730D))。男性病员较女性对射线作用更敏感;(3)放疗效果与微核率的改变无明显相关。