采用细胞微管吸吮系统对细胞粘附性的单细胞定量测定

应用细胞微管吸吮技术,建立了对细胞间粘附力的单细胞定量测量方法,以细胞间的临界分离应力（Ｓｃ）表示细胞的粘附能力．实验结果显示静息中性粒细胞和血管内皮细胞间的Ｓｃ为０．２７±０．０３（１０４ｄｙｎ／ｃｍ２）,激活中性粒细胞粘附性迅速升高,３０ｍｉｎ内达峰值１．５６±０．０８（１０４ｄｙｎ／ｃｍ２）,继续延长激活时间,未能引起其粘附性的进一步升高．     

脑动脉粥样硬化患者红细胞膜粘弹性与宏观血液流变学相关性的初步研究

本文采用微管吸吮技术研究了脑动脉粥样硬化患者与正常健康人红细胞在吸进微管的变形过程,采用二维Ｋｅｌｉｖｉｎ模型拟合实验结果,定量地比较患者与正常人红细胞膜的粘弹性,并采用新定义的对数还原复粘度法运用Ｌｏｗｓｈｅａｒ３０等仪器对患者与正常人宏观血液流变学参量之间相关性进行了研究,结果表明：脑动脉粥样硬化患者红细胞弹性系数（（５．７４±１．７７）×１０－３ｄｙｎ／ｃｍ）略高于正常人（（５．３６±０５６）×１０－３ｄｙｎ／ｃｍ）,而粘性系数（（４．１１±１．６８）×１０－４ｄｙｎ·ｓ／ｃｍ）明显高于正常（（１．９１±０．９６）×１０－４ｄｙｎ·ｓ／ｃｍ）,全血粘度及对数还原粘弹性Ｌ１及Ｌ２在由低到高各剪切率下,患者明显高于正常人。红细胞粘滞性增大,变形能力降低,这正是宏观血液流变学指标增高主要原因之一,也可能是造成患者脑硬塞的主要原因。     

脑动脉粥样硬化患者红细胞膜粘弹性与宏观血液流变学相关性的初步研究

本文采用微管吸吮技术研究了脑动脉粥样硬化患者与正常健康人红细胞在吸进微管的变形过程,采用二维Ｋｅｌｉｖｉｎ模型拟合实验结果,定量地比较患者与正常人红细胞膜的粘弹性,并采用新定义的对数还原复粘度法运用Ｌｏｗｓｈｅａｒ３０等仪器对患者与正常人宏观血液流变学参量之间相关性进行了研究,结果表明：脑动脉粥样硬化患者红细胞弹性系数（（５．７４±１．７７）×１０－３ｄｙｎ／ｃｍ）略高于正常人（（５．３６±０５６）×１０－３ｄｙｎ／ｃｍ）,而粘性系数（（４．１１±１．６８）×１０－４ｄｙｎ·ｓ／ｃｍ）明显高于正常（（１．９１±０．９６）×１０－４ｄｙｎ·ｓ／ｃｍ）,全血粘度及对数还原粘弹性Ｌ１及Ｌ２在由低到高各剪切率下,患者明显高于正常人。红细胞粘滞性增大,变形能力降低,这正是宏观血液流变学指标增高主要原因之一,也可能是造成患者脑硬塞的主要原因。     

槲皮素对培养内皮细胞释放前列环素的影响

应用放射免疫分析方法,研究了槲皮专对体外培养的人脐静脉内皮细胞释放前列环素的影响。实验表明：活化血小板与内皮细胞共同孵育１０,３０和１２０ｍｉｎ后,内皮细胞条件培养液中６一酮一ＰＧＦ１ｍ量显著增加（ｐ＜０．０ｌ）。槲皮素１,５和２０ＩＬｌｎｏｌ。－１与内皮细胞预孵１０ｍｉｎ,可抑制活化血小板引起的内皮细胞６一酮一ＰＧＦ１ｍ的大量释放。对于正常的内皮细胞,树皮素则增加６一酮一ＰＧＦ１ａ的基础释放量。     

内毒素血症大鼠肠系膜微循环中血管内皮细胞与白细胞的粘附性变化

本实验采用中文吖啶橙荧光标记技术,结合微循环观察用显微超高速摄录像装置,观察了内毒素对微血管内白细胞与微静脉血管内皮细胞的粘附性的影响。结果表明,内毒素对大鼠的血压、微血管口径和微动脉血流速度影响不大,微静脉血流速度在滴注内毒素后４５和６０ｍｉｎ下降了１６．６７％和１７．９５％（Ｐ＜０．０５）;但内毒素能迅速改变微静脉内的白细胞流态,明显增加附壁滚动的白细胞数和粘附白细胞密度指数,经测量同一微静脉内的白细胞和红细胞流速,求得白细胞与微静脉内皮细胞之间的破裂力在５ｍｉｎ和１５ｍｉｎ时下降了２５．９６％和４２．８８％（Ｐ＜０．０１）,下降趋势持续整个实验过程;说明内毒素能明显地增加白细胞与微静脉血管内皮细胞之间的粘附力。由此提示,研究白细胞与微静脉血管内皮细胞之间粘附力增强机制及寻找其抑制因素对改善微循环紊乱、抢救休克具有重要的临床意义。     

剪切应力对毛细血管内皮细胞代谢的影响

建立的平行平板流动腔装置适用于研究血管内皮细胞代谢对剪切流场的响应。将培养的人胚肾小球血管单层内皮细胞置于剪应力分别为５×１０－５Ｎ／ｃｍ２,１×１０－４Ｎ／ｃｍ２和１．５×１０－４Ｎ／ｃｍ２的定常层流中剪切２５小时,样品中的内皮素分泌量用放射免疫法测定。结果表明,剪应力水平对内皮细胞内皮素的代谢活动有显著影响。与静态培养对照,低水平的剪应力（５×１０－５Ｎ／ｃｍ２、１×１０－４Ｎ／ｃｍ２）促进内皮素的分泌,而较高水平的剪应力（１．５×１０－４Ｎ／ｃｍ２）抑制内皮素的分泌;剪应力对内皮素累积含量的影响比之分泌速率更大     

热性发热兔血浆脂多糖（LPS）浓度与生理反应的变化

在干球温度４２℃、湿球温度３５℃、相对湿度６０％条件下,测定了２４只热暴露兔［分为肛温维持４３℃（Ⅰ）组和肛温持续上升（Ⅱ）组］的心率、平均动脉压、呼吸频率、肛温及血浆ＬＰＳ浓度等指标。结果显示：（１）Ⅰ、Ⅱ组当Ｔｒ升达４３℃,热暴露时间分别为１００ｍｉｎ、６０ｍｉｎ时,血浆ＬＰＳ浓度分别为０．１９５ｎｇ／ｍｌ、０．１８０ｎｇ／ｍｌ,与实验前比,Ｐ＜０．０５。两组临死前,热暴露时间分别为２２０ｍｉｎ、１２０ｍｉｎ（Ⅱ组Ｔｒ４４．１５℃）时,其血浆ＬＰＳ浓度分别为０．２８５ｎｇ／ｍｌ、０．２４９ｎｇ／ｍｌ,Ｐ＜０．０１;（２）Ｔｒ４３℃和临死前两阶段ＬＰＳ的上升速率,Ⅰ组分别为０．０００６６ｎｇ／ｍｉｎ和０．０００６７ｎｇ／ｍｉｎ,Ⅱ组分别为０．０００８３ｎｇ／ｍｉｎ和０．００１１３ｎｇ／ｍｉｎ;（３）动物受热过程,Ｔｒ升至４３℃时,ＨＲ和ＭＡＰ达峰值水平,而呼吸频率则开始下降。本文结果提示,ＬＰＳ在中暑的病理生理学过程中可能是一个值得重视的因素     

剪切应力对毛细血管内皮细胞代谢的影响

建立的平行平板流协腔装置适用于研究血管内皮细胞代谢对剪切流场的响应。将培养的人胚肾小球血管单层内皮细胞置于剪应力分别为５＊１０＾－５Ｎ／ｃｍ＾２,１＊１０＾－４Ｎ／ｃｍ＾２和１．５＊１０＾－４Ｎ／ｃｍ＾２的定常层流中剪切２５小时。     

血管紧张素Ⅱ对大鼠心肌肌浆网Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase基因转录调节的影响

观察血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）对心肌肌浆网Ｃａ２＋,Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ基因（ＳＥＲＣＡ２ａ）转录调节的影响,评价ＤＭＰ８１１对此效应的干预作用．６周龄雄性ＳＤ大鼠随机分为３组,每组６只．组１：生理盐水输注;组２：ＡｎｇⅡ输注＋ＤＭＰ８１１管饲（３ｍｇ·ｄ－１·ｋｇ－１）;组３：ＡｎｇⅡ输注（２００ｎｇ·ｍｉｎ－１·ｋｇ－１．１周后称其体重,取心脏并称重,提取心脏总ＲＮＡ后采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ的方法检测ＳＥＲ－ＣＡ２ａ的转录水平,采用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＡｎｇⅡ１型受体（ＡＴ１）ｍＲＮＡ水平．实验后,组３心重（ＣＷ）、心重／体重（Ｃ／Ｂ）、ＡＴ１受体转录水平均高于组１（分别增加４．７±０．４％,４．９±０．９％和２４．７±３．５％;Ｐ＜０．０１）,而ＳＥＲＣＡ２ａ基因转录水平显著低于组１（降低２０．１±３．０％,Ｐ＜０．０１）,并且ＳＥＲＣＡ２ａｍＲＮＡ水平与ＡＴ１受体ｍＲＮＡ水平呈负相关（ｒ＝－０．７４,Ｐ＜０．０１）．ＡｎｇⅡ导致的上述改变能被ＤＭＰ８１１完全阻断．ＡｎｇⅡ通过其Ⅰ型受体的介导,诱导了ＳＥＲＣＡ２ａ的转录下调     

弱激光对脂质体介导的血管平滑肌细胞基因转染的影响

本研究采用阳离子脂质体介导外源基因转染体外培养的兔血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）,在基因转染过程中给予激光照射,用细胞化学染色方法测定基因转染阳性率。结果显示：用５１０．６ｎｍ激光于基因转染前,以功率密度１ｍｗ／ｃｍ２,能量密度２、４、６Ｊ／ｃｍ２和５ｍＷ／ｃｍ２,４、６Ｊ／ｃｍ２;及１０ｍＷ／ｃｍ２,２Ｊ／ｃｍ２进行照射均能显著提高基因转染率（ｐ＜０．０５）;于基因转染后即刻以功率密度１ｍＷ／ｃｍ２、能量密度２Ｊ／ｃｍ２和５ｍＷ／ｃｍ２、６Ｊ／ｃｍ２照射也能提高基因转染率（ｐ＜０．０５）。而用６２７．８ｎｍ激光照射对基因转染率无显著影响     

青年男性高原移居者最大摄氧量计算公式的推导

最大摄氧量（Ｖｏ２ｍａｘ）是评价人体体力的重要指标,其测定方法分直接法和间接法两种。目前所推导的间接计算公式都是在平原、或是在进入高原初期推导的,不适用于高原习服人群。本研究采用逐步回归的方法,推导出移居高原７－２７个月、不同高度的青年男性Ｖｏ２ｍａｘ间接计算公式。在海拔３６８０ｍ地区,Ｖｏ２ｍａｘ（Ｌ／ｍｉｎ）＝１．１５３１＋０．００７３２７身高（ｃｍ）＋０．０１６１３体重（ｋｇ）－０．００５８８３晨脉（ｂ／ｍｉｎ）－０．００４５３４运动心率（６０Ｗ,６／ｍｉｎ）,Ｒ＝０．７４５,Ｐ＜０．０１,ＳＳ＝３．７７９９;或Ｖｏ２ｍａｘ（Ｌ／ｍｉｎ）＝１．２１８６＋０．０１９８４体重（ｋｇ）＋０．０７２５９肺活量（Ｌ）－０．００６６５９晨脉（ｂ／ｍｉｎ）,Ｒ＝０．７１３,ｐ＜０．０１,ｓｓ＝３．９６３６。在４３５０ｍ地区,Ｖｏ２．ｍａｘ（Ｌ／ｍｉｎ）＝０．４９１７＋０．０１６８７体重（ｋｇ）＋０．１１０９肺活量（Ｌ）＋０．００１９８３屏气时间（Ｓ）,Ｒ＝０．７８１,Ｐ＜０．０１,ＳＳ＝２．１３５６。计算值与实测值比较,变异系数在１３％以内,结果准确可靠,适用于青年男性高原习服移居者。     

α受体激动对绵羊心肌瞬时性内向离子流的影响

用乙酰毒毛旋花子甙元（ＡＳ）０．０５μｍｏｌ／Ｌ诱发绵羊心浦肯野纤维产生稳定的瞬时性内向离子流（Ｉｔｉ）,用普萘洛尔０．５μｍｏｌ／Ｌ阻断β受体,观察α受体激动剂苯肾上腺素（ＰＥ）０．３,１．０μｍｏｌ／Ｌ对Ｉｔｉ幅值与时程的影响。ＰＥ１．０μｍｏｌ／Ｌ灌流２０,５０ｍｉｎ时Ｉｔｉ幅值分别由对照值１２．８±１．９ｎＡ减小至１０．７±１．２ｎＡ（ｎ＝５,Ｐ＜０．０５）与９．６±１．９ｎＡ（ｎ＝５,Ｐ＜０．０１）;ＩｔｉＤ５０时程分别由对照值１４５±２４．４ｍｓ延长至１８３．３±２８．１ｍｓ（ｎ＝５,Ｐ＜０．０５）与２０７．５±３４．２ｍｓ（ｎ＝５,Ｐ＜０．０１）,ＰＥ对Ｉｔｉ的抑制作用呈剂量依赖性与时间依赖性。Ｉｔｉ到达峰值的时间和回复到基线的时间都延长,提示ＰＥ作用下Ｉｔｉ通道动力学发生了变化。如果在β受体激动剂异丙肾上腺素（ＩＳＯ）１．０μｍｏｌ／Ｌ增强Ｉｔｉ的基础上,ＰＥ１．０μｍｏｌ／Ｌ灌流１０ｍｉｎ,对Ｉｔｉ幅值的抑制及时程的延长作用更显著,Ｉｔｉ幅值由对照值１５．６±３．２ｎＡ减小到１０．３±２．２ｎＡ;ＩｔｉＤ５０由９２．５±１４．３ｍｓ延长到１３２．５±３６．０ｍｓ（ｎ＝５,Ｐ＜０．０１）。     

剪切流场中内皮细胞膜张应力累加效应的实验研究-离体血管段长度与其蛋白质代谢的相关性

用离体血管灌流试验验证冯元桢等关于血管内皮细胞的膜张应力逆血流方向轻加的理论分析。用０．１２Ｎ／ｍ＾２剪应力剪切人脐静脉段内皮细胞２０ｈ后,两种不同长度离体血管的内皮素平均分泌速率无显著差异,但在分泌速率的曲线形态,特征方程和最大分泌速率,最小分泌速率及分泌速率变异系数上差异较大;ＡＴⅡ的平均分泌速率差异彩显著,１１ｃｍ处理比２１ｃｍ处理高６８％。     

血管活性肠肽对清醒大鼠催乳素分泌的影响

在离体研究中发现,血管活性肠肽（ＶＩＰ）对催乳素分泌的促进作用因垂体所取自的动物模型的不同而异。本实验则以不同生理状态的大鼠为动物模型,于清醒自由活动状态下,检验ＶＩＰ的静脉注入对催乳素释放的影响。结果表明,在ＶＩＰ注入后１０ｍｉｎ时,其外周血液的浓度达到最高值（２１３２±２３３）ｎｇ／ｍｌ,并至少持续３０ｍｉｎ。在本实验的所有动物模型中,ＶＩＰ均诱导出了显著的催乳素分泌峰（Ｐ＜００５）,就其提高程度而言,雄性鼠最高（１５８０４±３７０６）ｎｇ／ｍｌ,未经吸吮刺激的哺乳母鼠最低（３１０５±４４２）ｎｇ／ｍｌ,而经过吸吮刺激的哺乳母鼠则居于两者之间（９０１０±３６００）ｎｇ／ｍｌ。ＶＩＰ在不同动物模型中所表现出的这些差异,提示其作用方式和／或作用部位可能受到整个机体内分泌环境和神经刺激的整合。     

特异性血清中白介素1β放射免疫分析的建立及初步应用

人工重组的白细胞介素１β（ＩＬ－１β）多次免疫兔和豚鼠,获取高效价的兔抗ＩＬ－１β抗体。用氯氨Ｔ法制备１２５Ｉ标记ＩＬ１β,经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５纯化。该法测定范围０．０６-４ｎｇ／ｍ ｌ,批内和批间误差分别小于５％ 和１０％ 。正常人血清含量为０．２４±０．０８ｎｇ／ｍ ｌ（ｎ＝１３８）。人粒细胞系ＨＬ６０（１０６）细胞体外培养２４ 小时,不能检出上清液中ＩＬ－１β,钙离子载体Ａ２３１８７和磷脂酶Ａ２ 抑制Ｐ－ＢＰＢ也不能显著提高细胞释放ＩＬ－１β。另外,肝癌甲胎蛋白阳性患者血清中ＩＬ－１β水平同正常人没有显著差异。但是,雄性老龄大鼠血清ＩＬ－１β水平明显高于雌性老龄大鼠（Ｐ＜ ０．０１） 。     

剪切应力下内皮细胞内皮素及其mRNA的表达

应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹方法研究高血压（ＳＨＲ）和正常（ＷＫＹ）大鼠脑微血管培养内皮细胞,在剪切应力０、０．５、１、２Ｐａ作用下２４ｈ后检测内皮素及其基因ｍＲＮＡ表达上的区别。结果表明,在剪切应力０、０．５、１Ｐａ下,ＷＫＹ大鼠的内皮细胞随着剪切应力加大,其内皮素水平及其基因的ｍＲＮＡ的表达均比ＷＫＹ相应组的为高。在剪切应力２Ｐａ时,ＷＫＹ和ＳＨＲ大鼠的内皮细胞内皮素及其基因的ｍＲＮＡ表达水平不同     

丹皮酚对心肌细胞自律性和延迟后除极的影响

目的与方法：采用常规玻璃微电极技术研究丹皮酚对离体心肌细胞自律性（ＡＭ）、延迟后除极（ＤＡＤ） 及触发活动（ＴＡ）的影响。结果：１．８×１０－４ｍｏｌ／Ｌ丹皮酚灌流组,肾上腺素（Ａｄｒ）的阈浓度空白对照组为（１．２８±０．５７）μｍｏｌ／Ｌ,药后为（１．５６±０．５３）μｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝９,Ｐ＞０．０５）;用（１．８×１０－ ３） ｍｏｌ／Ｌ丹皮酚（Ｐａｅ）灌流组,Ａｄｒ 浓度由空白对照组的（１．２２ ±０．６２）μｍｏｌ／Ｌ升高到（６．２２±２．１１）μｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝９,Ｐ＜０．０１）。１．８×１０－３ｍｏｌ／Ｌ的Ｐａｅ 能明显抑制哇巴因（Ｏｕａ）诱发的ＤＡＤ的幅值,当基本刺激周长为５００,４００,３００ 和２００ ｍｓ 时,其ＤＡＤ幅值从（５．５±２．０）ｍＶ,（７．３±２．１）ｍＶ,（８．０ ±２．４）ｍＶ和（９．２±１．９）ｍＶ减小到（３．０±１．１）ｍＶ、（３．６±１．７）ｍＶ,（４．３±２．０） ｍＶ和（５．９ ±１．６） ｍＶ,Ｐ＜０．０１。当基本刺激周长为２００ ｍｓ时,ＴＡ 数目由５．５±１．０ 降至０．７±０．３（Ｐ＜０．０１）。结论：丹皮酚能抑制心肌细胞ＡＭ、ＤＡＤ及ＴＡ,具有抗心律失常作用     

不同剂量的He—Ne激光对Raji细胞膜脂流动性的影响

本文采用荧光偏振法检测了不同剂量的Ｈｅ－Ｎｅ激光照射法对Ｒａｊｉ细胞膜流动性的影响,发现了０．０１Ｊ／ｃｍ＾２和０．５１Ｊ／ｃｍ＾２两剂量可使膜脂微粘度降低（Ｐ〈０．０５）。即其膜脂流动性升高;１．０Ｊ／ｃｍ＾２和２．０Ｊ／ｃｍ＾２的剂量脂微粘度无明显影响,即其膜流动性无明显化（Ｐ〉０．０５）,而６．０２Ｊ／ｃｍ＾２的剂量可使膜微粘度明显上升（Ｐ〈０．０５）。即其膜流动性明显下降。     

磷脂酶A2介导肿瘤坏死因子诱发的中性粒细胞趋化和粘附增强

肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）对外周中性粒细胞（ＰＭＮ）具有重要调节作用。本文采用生化及放射免疫技术,观察体外重组ＴＮＦ对ＰＭＮ趋化、粘附及血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）和前列环素（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ）释放的改变。ＴＮＦ（１００ｍｇ／ｍｌ）处理６０ｍｉｎ后,ＰＭＭ对白细胞趋化因子（ＦＭＬＰ）趋化和玻璃珠粘附性均显著增加,同时伴有ＴＸＢ２释放增多,６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ不变。这提示ＴＮＦ体外促ＰＭＭ趋化和粘     

CO2激光辐射奶山羊精液生物学效应的研究

本研究表明,３．５７Ｊ／ｃｍ＾２和７．４Ｊ／ｃｍ６２激光组可以改善精液品质,提高精子的代谢功能状态,以增强精子活力,认为是最佳剂量;１４．２８Ｊ／ｃｍ６２激光组虽然对精子的代谢,活力有效应,但不能维持,认为是临界剂量;２８．５６Ｊ／ｃｍ＾２激光对精子的损害作用,认为是抑制剂量。