血卟啉单甲醚对鸡冠皮肤光动力学效应的研究

目的　本文采用组织形态学观察方法 ,比较血卟啉单甲醚 (ＨＭＭＥ)与ＨｐＤ对鸡冠表皮层、真皮浅层毛细血管网和真皮深层组织的光敏损伤特点及影响因素。材料与方法　成年莱亨鸡 2 58只 ,静脉注射ＨＭＭＥ或ＨｐＤ 1～ 2 0ｍｇ ｋｇ ,于给药后即刻～ 4小时对鸡冠进行激光照射 ,波长为 4 88.0～ 514.5ｎｍ、510 .6ｎｍ、578.2ｎｍ或 6 2 7.8ｎｍ ,功率密度为 50～ 150ｍＷ ｃｍ2 ,能量密度为 30～ 2 70Ｊ ｃｍ2 ,于照射后即刻、1、3、7、14和 2 8天取材 ,进行大体、光镜和透射电镜观察。结果　ＰＤＴ作用区的红色鸡冠完全变白 ,乳头层毛细血…     

血啉甲醚在动脉组织的吸收分布特性

本研究观察血啉甲醚（ＨＭＭＥ）在血管平滑肌细胞（ＳＣＭ）、血管内皮细胞（ＥＣ）和动脉组织中的分布特点,旨在为建立防治血管成形术后再狭窄的光动力学疗法提供实验依据。将体外培养的ＥＣ和ＳＭＣ接种于２４忆培养板中,分组,培养液中加入ＨＭＭＥ,浓度为２０、４０、６０、８０、１００μｇ／ｍｌ,孵育１５、３０、６０、１２０、１８０、２４０ｍｉｎ后,采用荧光摄象分析法测定细胞内ＨＭＭＥ含量。以ＨＭＭＥ的孵育浓度     

血啉甲醚体外光敏效应观察

本文用化学发光法检测ＨＭＭＥ的’Ｏ２和ＲＯＳ产量,并与ＨｐＤ相比较,同时观察ＨＭＭＥ光敏效应与浓度、激光照射功率密度、照射时间、激光波长的关系。结果显示：ＨＭＭＥ浓度在２．５－４０μｇ／ｍｌ范围内,其光敏效应随浓度的增加而呈线形上升,以后便略下降;５７８．２ｎｍ激光以１０ｍＷ／ｃｍ＾２照射２．５μｇ／ｍｌ,ＨＭＭＥ的’Ｏ２和ＲＯＳ产量是ＨｐＤ的８倍;ＨＭＭＥ光敏效应与激光照射的功率密度密切相关。各     

血卟啉单甲醚在A549肺癌细胞内亚细胞分布的动态变化

目的:探讨血卟啉单甲醚(Hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)在A549肺癌细胞内亚细胞分布的动态变化。方法:传代培养A549肺癌细胞,分别与光敏剂HMME孵育2 h和12 h。应用由荧光显微镜及电感耦合器材(Charge-coupled device,CCD)组成的高分辨率荧光显微成像系统,结合荧光探针标记技术,采用细胞器-细胞荧光强度比值法研究HMME在不同时间的亚细胞分布情况。结果:在2 h和12 h两个孵育时间点高尔基体的平均荧光强度比值(J1/J2)值都最高;随着孵育时间延长,A549细胞的四种细胞器J1/J2值都升高且溶酶体幅度最大。结论:孵育时间是影响HMME亚细胞分布的一个重要因素。随着孵育时间的延长,A549肺癌细胞各细胞器吸收HMME能力逐渐增强,尤以溶酶体显著。     

荧光探针在光动力疗法亚细胞损伤位点研究中的应用

目的：应用荧光探针在光动力疗法研究中检测亚细胞损伤位点。方法：传代培养鼠肺毛细血管内皮细胞,将血卟啉单甲醚(HMME)与内皮细胞共同孵育24小时后,加入线粒体探针Bhodamine-123、内质网探针DioC6(3)和溶酶体探针Lucifer yellow分别对细胞器染色。首先采用激光共聚焦显微镜对光敏剂进行亚细胞定位。应用荧光显微镜汞灯照射激发光敏剂的光动力效应,加入ROS探针H2DCF-DA检测产生的单线态氧。分别在激发前后采集Pdloclamine-123、Lucifer yellow和DioC6(3)的荧光图像。结果：线粒体探针Phodamine-123的荧光图像在光动力损伤前后差异显著,原有形态特点发生明显改变;Phodamine-123在光动力损伤后再分布于细胞核区。结论：血卟啉单甲醚介导的光动力效应导致亚细胞水平多位点损伤,线粒体和核膜可能是PDT敏感位点;荧光探针标记检测光动力损伤亚细胞位点方法简便可靠。     

竹红菌素B的两种剂型用于鲜红斑痣光动力治疗的动物实验研究

目的:观察竹红菌素B的脂肪乳剂型和脂质体剂型对鲜红斑痣动物模型的光动力作用是否有差异,并观察其光动力效应及副作用。方法:莱亨鸡32只,分为对照组;HMME组;脂质体0.5 mg/kg组和1.0 mg/kg组;脂肪乳0.5 mg/kg组和1.0 mg/kg组。莱亨鸡静脉注入光敏剂后,立即用532 nm的激光照射鸡冠直径1 cm的圆形区域,激光剂量为功率密度100 mW/cm2,能量密度120 J/cm2。PDT后每天进行观察照像,14 d后取材进行病理观察。结果:HMME组6例皆为中度改变,真皮浅层血管网明显减少,结痂轻。脂肪乳0.5 mg/kg组6例中5例为重度改变、1例为中度改变,脂质体0.5 mg/kg组6例皆为重度改变,病理见表皮增生,真皮浅层血管少,结中等厚度的黒痂。脂肪乳1.0 mg/kg组6例皆为极重度,脂质体1.0 mg/kg组5例为极重度改变、1例为重度改变,病理为痂下坏死灶,部分修复的表皮增生,真皮浅层几乎无血管,结黑色厚痂。结论:HB的脂肪乳剂型和脂质体剂型对鸡冠的光动力效应基本一致,都具有较好的血管破坏作用,但对正常表皮和真皮的损伤较重。     

低功率激光外照射治疗炎症性疾病

低功率激光外照射治疗炎症性疾病,在临床已广泛应用,并取得较好的效果,本文主要其激光对炎症的作用机制从四个方面作一总结概述。     

竹红菌乙素对脉络膜毛细血管光动力效应的初步观察

目的：观察竹红菌乙素．光动力治疗(HB-PDT)对青紫蓝兔脉络膜毛细血管的生物学效应的特点,探讨HB-PUF治疗脉络膜新生血管以及绿光作为PUF治疗的光源的研究前景。方法：使用光纤连接532nm激光器和裂隙灯显微镜,选用青紫兰兔2．5k～3．5kg,全麻生效后,耳缘静脉内注射HB1．0mg／kg,532nm光线作为光源激发光敏剂,眼底光斑功率密度300mW/cm^2,能量密度30J/cm^2,注射药物后立刻照光,光斑直径2000μm,6例,于PDT后1d．7d、28d观察视网膜,荧光眼底造影、光学显微镜和电子显微镜观察照光部位视网膜和脉络膜的生物学效应。结果：PDT后1d,照光区域脉络膜毛细血管管腔内形成光动力血栓,视网膜的损伤以外层为主,内层没有明显改变。第7d脉络膜毛细血管内皮细胞损伤加重,脉络膜大血管无明显改变,第28d后在原来毛细血管的部位出现纤维组织,玻璃膜增厚;照光区域的RPE细胞出现修复、增殖。结论：PDT后第1d至第7d靶组织的生物学效应和非靶组织的非选择性开始出现并不断增强,第28d后逐渐以纤维组织恢复。HB-PDT治疗AMD或其它以脉络膜新生血管为特点的眼底疾病,有进一步研究价值。     

超高灵敏度荧光显微成像技术对光敏剂细胞内分布的初步研究

目的：探讨应用基于ICCD的超高灵敏度荧光显微成像系统研究光敏剂细胞内分布的可行性。方法：传代培养内皮细胞、食管癌细胞和肺癌细胞,将不同浓度血卟啉单甲醚(HMME)与细胞共同孵育不同时间。采用荧光显微镜及ICCD组成的荧光显微成像系统采集不同浓度及不同孵育时间条件下HMME的荧光图像,并采用计算机图像处理技术进行图像增强、滤波后计算其细胞浆与细胞核的平均荧光强度比值。同时应用激光共聚焦显微镜图像采集进行对比。结果：HMME浓度为5μg／ml时,荧光显微镜采集到HMME的荧光图像;HMME浓度升高到160μg／ml,激光共聚焦显微镜获得HMME的荧光图像。两组图像的特点都为胞浆中荧光强度较高,细胞核区荧光较弱;细胞浆与细胞核的比值约为2～3：1。结论：荧光显微镜和ICCD采集细胞内光敏剂的荧光图像灵敏度高,方法可靠、实用。HMME较多分布在细胞质中,细胞核吸收较少。     

光动力疗法诱导增生滑膜细胞凋亡的初步研究

目的：观察光动力疗法（PDT）诱导类风湿性关节炎（RA）动物模型的增生滑膜细胞的凋亡情况。方法：兔AIA模型在关节类出现第七天进行PDT治疗,随机治疗一侧膝关节,另一侧作自身对照,免耳静脉注入HMME10mg/Kg,20分钟后,膝关节用金蒸气激光照射,激光波长627.8nm,功率密度100mW/cm^2,能量密度100J/cm^2,24小时后取膝关节滑膜作病理检查,并用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）原位检测凋亡结论。结果：PDT治疗组凋亡阳性细胞较对照组明显增多,图像分析结果单位视野内阳性细胞数和面密度PDT治疗组高于对照组,统计学检验差异有显著性,凋亡细胞核直径PDT治疗组较小,与对照组相比,统计学检验差异有显著性。结论：PDT有可能通过诱发滑膜细胞的凋亡,使增生的滑膜细胞减少。