四眼斑水龟卵泡和卵的超声波扫描研究

使用超声波技术检测了6只雌性四眼斑水龟的卵黄卵泡(包括生长卵泡和排卵前卵泡)、闭锁卵泡和输卵管卵的大小和数量.结果 表明:四眼斑水龟卵巢卵黄卵泡数目和大小呈明显的周期性变化,检测到的卵黄卵泡长径范围为4～24 mm(n=186).8月份卵泡数目开始增多,卵泡长径逐渐增大,至12月份排卵前期卵泡数量达最大值,卵巢发育成熟.排卵前期卵泡长径范围为19～24 mm(n=56),最大排卵前期卵泡出现于12月.排卵时间是1月至3月.闭锁卵泡长径范围在10～20 mm(n=14)之间,仅在10月至次年3月能检测到少数的闭锁卵泡.     

卵泡颗粒细胞凋亡相关蛋白的研究进展

哺乳动物的卵巢中存在大量卵泡。大多数卵泡在发育过程中发生闭锁而消失,只有少数可以发育到成熟而排卵。卵泡是由卵母细胞与其周围的颗粒细胞构成的。卵泡颗粒细胞的凋亡是卵泡闭锁的主要原因。颗粒细胞凋亡相关蛋白通过参与凋亡通路及凋亡信号转导调节凋亡。本文就哺乳动物卵泡颗粒细胞凋亡相关蛋白的研究进展进行综述。     

乌梢蛇精巢显微结构的年周期变化

用光镜观察了乌梢蛇(Zaocys dhumnades)精巢显微结构的年周期变化,并结合精巢重量、精巢体积及精巢系数的年周期变化探讨了其生殖规律。结果表明,乌梢蛇精巢重量、精巢体积、精巢系数、曲细精管直径、生精上皮厚度及组成均具有明显的季节性变化。据此将乌梢蛇精巢的年周期活动划分为6个时期,其精子发生属于非连续型,生殖周期的类型属于交配后型。用精巢系数的年周期变化作为参数来判定精子发生进程是可靠的。     

成体雌性小熊猫卵巢组织学观察

2000 年至2009 年,12 只固定于10% 福尔马林中非生殖系统疾病死亡的小熊猫卵巢组织,按常规组织学技术制作组织切片,HE 染色,光学显微镜观察。结果:(1)不同发情时期卵巢均有原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡分布。发情期的卵巢未观察到典型的成熟卵泡和卵母细胞; (2)原始卵泡数量较少,初级卵泡数量较多,多数初级卵泡和大多数的次级卵泡都处在闭锁状态;(3)卵泡腔出现之前,卵母细胞的直径和卵泡直径同时增长;卵泡腔出现之后,卵母细胞直径增长较慢,卵泡直径增长较快; (4)不同发情时期的小熊猫卵巢均存在大量的间质腺细胞;(5)妊娠小熊猫和发情间期无妊娠小熊猫的卵巢均有发育正常的黄体;(6)卵泡细胞发育呈低柱状至柱状时出现透明带。结论:(1) 卵泡闭锁主要发生在初级卵泡阶段,仅少数卵泡能发育至次级卵泡;(2)卵母细胞和卵泡生长呈双相生长的趋势; (3) 不同发情时期的小熊猫卵巢间质腺都发达; (4)发情排卵后,非妊娠黄体与妊娠黄体维持的时间相似,证实了小熊猫存在假孕现象。     

乌梢蛇卵泡不同发育期颗粒细胞的显微结构变化

采用光学显微镜主要观察了乌梢蛇(Zaocys dhumnades)卵泡发育过程中颗粒细胞的显微结构变化.结果表明,乌梢蛇的滤泡前体细胞在形态、大小与嗜色性上均与生殖基的表面上皮相似;在原始卵泡期,卵母细胞周围的滤泡前体细胞围绕成一圈;在颗粒层细胞期的时期I至时期Ⅲ,颗粒细胞分化为由小细胞、梨形细胞与中间型细胞构成的异型颗粒细胞;在时期Ⅳ,这些异型颗粒细胞又转变成为只有小细胞的同型颗粒细胞.乌梢蛇卵泡颗粒细胞来源于生殖基的表面上皮,其发育特征是首先由同型发育成为异型,再由异型转变为同型颗粒细胞,具有同源异型的特征.     

发情周期不同时期猪卵泡颗粒细胞凋亡的观察

为探讨猪发情周期不同时期卵泡发育和闭锁的规律及机理,本实验通过TUNEL原位标记,H,E．染色以及放射免疫测定等手段研究了猪发情周期不同阶段卵巢表面各类卵泡数量的变化。各类卵泡中颗粒细胞的凋亡比例,闭锁卵泡的形态变化以及发情周期各阶段血清孕酮及雌二醇水平的变化等问题。卵泡的总数在发情间期最多,为26．8个／卵巢,发情期最少,为7．4个／卵巢。小放泡的数量在发情间期最多。为15个／卵巢,在发性期数量最少,为5．7个／卵巢。中等卵泡数量在发情间蜞多,为8．5个／卵巢,在发情后期卵巢中无中等卵泡。大卵泡的数量在发情前期最多,为7．4个／卵巢,在发情后期最少,为0个。小卵泡的颗粒细胞凋亡比例（各时期平均21．03％）显著高于大卵泡,在发情后期显著降低。中等卵泡的颗粒细胞凋亡比例（平均16．6％）在发情前期显著低于其它各期。大卵泡的颗粒细胞凋亡比例（平均11．2％）在发情周期各阶段无显著差异,均显著低于中等卵泡和小卵泡。     

卵母细胞在哺乳动物卵巢排卵过程中的决定性作用

哺乳动物卵巢排卵是一个复杂的调控过程。卵泡成熟破裂后,卵母细胞从卵巢中排出。卵泡细胞感受排卵刺激,并诱导卵母细胞减数分裂的恢复及其随后的释放。卵母细胞及其周围颗粒细胞的旁分泌在对此起关键性作用,其中卵母细胞对其释放具有决定性作用。作者先前已经阐述过颗粒细胞在哺乳动物卵巢排卵过程中的调控作用,该文将从卵母细胞的发育及其调控角度重点阐明其在排卵过程中的决定作用,旨在进一步理解哺乳动物卵巢的排卵过程,同时为不孕不育等卵巢疾病的治疗提供重要的研究方向和理论基础。     

毛脚卵巢的组织学观察

对3例雌性毛脚的卵巢结构进行组织形态学研究。采用常规方法制片,H.E染色。结果显示卵巢分叶呈条索状,卵泡发育中没有出现卵泡腔,卵泡细胞始终为单层,卵泡膜随卵泡发育成熟由单层转变为多层,闭锁卵泡在卵泡发育的各个不同时期都有出现。     

四眼斑水龟雌性生殖器官组织结构的季节变化

应用石蜡常规切片,HE染色,分别在3月（春季）、8月（夏季）、10月（秋季）、1月（冬季）,对24只四眼斑水龟雌性生殖器官组织结构变化进行研究,结果表明：四眼斑水龟雌性生殖器官的形态和结构存在季节性的变化,8月卵泡开始发育,卵巢增重,子宫腺增多;10月卵巢增重达最大,卵泡发育成熟开始排卵,随后形成黄体,进入排卵期。翌年的1～3月卵巢重量减轻,输卵管管腔增大,腺体增多,子宫肌层不断增厚,进入产卵期。     

卵泡发生过程中GDF-9和BMP-15(GDF-9B)的作用

近年来,对卵巢内卵泡发育,即从原始卵泡募集、优势选择、卵泡生长、排卵到黄体形成的调控研究取得了很大的进展.研究表明TGF-β超家族的许多成员在各阶段卵泡发生中起重要的调节作用.TGF-β超家族的两个成员-生长分化因子-9(GDF-9)和骨形态因子-15(BMP-15,或GDF-9B)主要在哺乳动物卵母细胞中表达,对卵泡生长发育起关键作用.本文对GDF-9和BMP-15在卵泡发育过程中的作用进行了综述.     

浙江舟山五种卵生游蛇科动物个体大小、窝卵数和卵大小之间的关系

阐明五种游蛇科动物雌体大小、窝卵数和卵大小之间的关系和雌性繁殖特征的种间差异。５种蛇均产单窝卵,产卵高峰期为６月下旬至７月,窝卵数与雌体大小（ＳＶＬ）呈显著的正相关,相对窝卵重与雌体ＳＶＬ无关,卵理与窝卵数无关。灰鼠蛇卵重与雌体ＳＶＬ呈正相关,赤链蛇、王锦蛇、黑眉锦蛇和乌梢蛇的卵重与雌体ＳＶＬ无关,黑眉锦蛇卵长径与窝卵娄呈负相关,其余４种蛇卵长径与窝卵数无关。５种蛇卵长径与短径无关。黑眉锦蛇卵短径     

中药乌梢蛇的薄层层析鉴别

目的探讨中药乌梢蛇的薄层层析鉴别。方法用薄层层析和紫外分析方法,对中药乌梢蛇的色谱进行分析,以丙酮∶乙醇∶氨水和正丁醇∶乙醇∶氨水２个系统中分别展开后,置紫外２５４ｎｍ下检视。结果能见到清晰、分离效果很好的４个斑点。结论该方法具有对乌梢蛇定性鉴别意义,可作为该药的有效鉴别手段及内在质量控制指标之一。     

乌梢蛇血清的抗出血因子:一个有前途的抗蛇毒药物原料

用柱层析和聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳法,从乌梢蛇血清中分离纯化了一个抗出血因子。用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测得其分子量大约为65 kD;测定了五种蝮亚科蛇毒(尖吻蝮、竹叶青蛇、原矛头蝮、哈扑和短尾蝮)的最小出血剂量和乌梢蛇血清中抗出血因子对这五种蛇毒的抗出血活性;还测定了七种蛇毒(除上述五种毒蛇外,还包括圆斑蝰和银环蛇)的半数致死量,以及抗出血因子对中毒小鼠的治疗作用。结果显示:从乌梢蛇血清中提纯的抗出血因子的抗蛇毒活性,不仅可以抵抗它的捕食者尖吻蝮的蛇毒,而且还可以抵抗具出血活性的其它蛇毒;但它对不具出血活性的银环蛇毒的致死抑制作用不明显。该抗出血因子不仅在体外实验表现出强的中和出血毒素的活性,而且在体内实验中亦表现出对中毒小鼠良好的治疗作用,因而可能成为新的抗蛇毒药物的有前途的原料。乌梢蛇血清对血循毒的中和能力的获得,可能归因于尖吻蝮与乌梢蛇之间捕食与被捕食相互作用的关系。     

快速检测中药材乌梢蛇LAMP方法的建立

乌梢蛇作为一种名贵中药材,市面上伪品较多,干燥熏黑处理后的样品,更是真伪难辨。本研究致力于开发一套基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)为基础的快速筛查乌梢蛇的方法。本研究以乌梢蛇12srRNA基因序列为基础设计并筛选出1套LAMP引物。通过调整反应条件,建立了对乌梢蛇LAMP的检查方法。结果显示,62℃下连续反应15min左右出现典型的"S"型荧光吸收曲线,实现了对乌梢蛇12srRNA基因序列的特异扩增。根据LAMP灵敏度高的特点,本研究简化了DNA的提取方法,缩短了检测的时间。相对于常规的PCR方法,本研究建立的以快速DNA提取为基础的乌梢蛇LAMP快速筛查方法具有简单、快速、灵敏、对设备要求低等特点,适用于对中药材乌梢蛇的快速筛查。     

两种蛇消化道5-羟色胺细胞的免疫组织化学定位及比较

应用5－羟色胺特异性抗血清,对眼镜蛇和乌梢蛇消化道含5－HT的内分泌细胞进行了免疫组织化学定位和比较。5－HT细胞的形态在两种蛇中大致相同,消化道各部位都有呈圆形和长梭形（具胞突）的阳性细胞。食道和胃以圆形细胞为主,肠道段则以长梭形细胞为主。眼镜蛇5－HT细胞以十二指肠密度为最高,食道最低;乌梢蛇以幽门部密度为最高,直肠最低。肠道段两者分布特点相同,从十二指肠至直肠分布密度渐疏。本文还对两种蛇5－HT细胞分布型的原因、形态和功能相适应的特点进行了讨论。     

Annual Cyclical Changes in the Histological Features and Surface Ultrastructure in Ovaries of the Freshwater Featherback Notopterus notopterus (Pallas, 1769)

The feather back, Notopterus notopterus is an important food fish. Its ovary is an extremely dynamic organ and the oocytes present an asynchronous development. Variations in ovary weight, GSI, diameter of oocytes were studied in different months of the year in this fish. Different developmental stages of female germ cells were identified on the basis of histological and ultrastructural characteristics in the ovary of N. notopterus (Pallas). In the present investigation the oocyte development of N. notopterus was divided into five stages (oogonia, perinucleolar oocyte, cortical alveolus, yolk granules stage and mature oocyte). The cytophysiological features like vitellogenesis, chorion formation and atresia of some follicles were also studied in the present investigation. The seasonal changes in the ovary have been described according to the variations in gonadosomatic index and the cytological changes of the female germ line cells.     

Correlation of housefly sex pheromone production with ovarian development

Pheromone production in the housefly was monitored during oögenesis and in ovariectomized insects by gas-liquid chromatography (GLC) and radio-GLC. The presence of vitellogenic ovaries was required for the initiation of (Z)-9-tricosene (muscalure), (Z)-9,10-epoxytricosane and (Z)-14-tricosen-10-one synthesis. Methylalkane synthesis was enhanced by developing ovaries. Insects ovariectomized within 12 hr after emergence produced no detectable amounts of (Z)-9-tricosene, C₂₃ epoxide nor C₂₃ ketone and synthesized less methylalkanes than the controls. This effect was reversed by ovary implants. When flies were ovariectomized after oviposition, synthesis of (Z)-9-tricosene, C₂₃ epoxide and C₂₃ ketone continued. Thus, initiation of the synthesis of these C₂₃ pheromone compounds required a vitellogenic ovary, but the ovary was not required to maintain synthesis.     

Variations in protein levels in the hemolymph, hepatopancreas and ovary of Penaeus schmitti during ovarian maturation (Crustacea, Decapoda, Peneidae)

Variations of protein concentrations in the haemolymph, hepatopancreas and ovaries were studied during the ovarian maturation of the shrimp Penaeus schmitti. The main variations observed during this physiological process are the increase of protein and the decrease of water contents in the ovary, more pronounced at the first stages of gonadosomatic index (GSI:0-4). During ovarian maturation, water content of the ovaries and hepatopancreas decrease from 10.7 and 3.9% respectively. In relative values, protein content increases from about 40.0% in the ovary, 47.5% in the haemolymph and 15.4% in the hepatopancreas. In absolute values, the protein concentrations of the hepatopancreas showed no significant variation. In the opposite, ovary protein content is 14.7 fold higher at the end than the early stages of vitellogenesis. Relations between haemolymph, hepatopancreas and ovary with eventual transfers of protein material are discussed.     

纯蛇粉胶囊中乌梢蛇的薄层层析鉴别

目的用薄层层析和紫外分析方法对纯蛇粉胶囊中所含的乌梢蛇成分进行分析鉴别。方法以中药乌梢蛇作为对照品,以硅胶Ｇ铺板,在丙酮、乙醇、氨水和正丁醇、乙醇、氨水２个系统中分别展开,后置于紫外２５４ｎｍ下检视,同法作空白试验。结果在同一薄层色谱中,和对照品相同的位置上,显清晰分离很好的４个斑点,其中２个斑点呈强烈的荧光。空白阴性对照品无此斑点。结论该方法具有定性检查的鉴别意义,为制定纯蛇粉胶囊质量标准提供了实验方法和依据。