以表位模拟肽为亲和靶标的肉毒毒素受体结合抑制剂的筛选及鉴定

以设计合成的A型肉毒毒素表位模拟肽为亲和靶标,对噬菌体随机肽库进行筛选,寻找能与A型肉毒毒素表位模拟肽特异结合并能拮抗毒素毒性效应的分子,通过ELISA鉴定阳性克隆,并对鉴定的阳性克隆进行特异性分析及DNA测序。氨基酸序列同源性分析发现,针对P4、P5表位模拟肽获得了两条特异的结合序列,并通过动物保护实验在噬菌体展示肽水平对特异结合分子的毒素毒性拮抗效应进行了初步研究,初步证明结合肽对A型肉毒毒素有一定的保护作用。     

海洋生物毒素的药物开发前景

本对海洋生物毒素的研究现状及其在神经系统、心血管系统等方面的作用做了简要的综述,并对海洋生物毒素在药物开发中的应用前景及展望予以探讨。     

海洋生物毒素的损伤机制

海洋生物毒素来源于有毒海洋生物，是一类具有高活性的特殊代谢成分。独特新颖的化学结构造就了其对生物体特殊的损伤机制和剧烈的毒性效应。目前，海洋生物毒素损伤机制的研究特别是靶向离子通道方面已经取得了一定的成果，但仍有许多机制尚不清楚。因此，进一步探索海洋生物毒素的损伤机制十分必要，既有助于防治海洋毒素中毒，又有望将其转化为新型“海洋药物”。本文综述了目前已有报道的海洋生物毒素对生物的损伤机制，包括直接影响细胞膜各类离子通道活性、干扰胞内蛋白磷酸化过程、扰乱线粒体功能、诱发炎症免疫反应，甚至造成细胞死亡等，为后续深入研究海洋生物毒素的其他损伤机制提供参考。     

PCR技术在海洋生物多肽毒素研究中的应用

随着PCR反应技术的不断改进和完善,它们在现代科学研究、生产和生活检测中的应用也越来越广,并且极大程度上促进了基因工程和蛋白质工程的快速发展.就PCR技术在芋螺毒素、海蛇毒素、海葵毒素及水母毒素等海洋生物多肽毒素基因克隆研究中的应用作简要介绍.     

基于特异性生物识别分子的黄曲霉毒素快速分析方法研究进展

黄曲霉毒素是黄曲霉菌和寄生曲霉菌分泌的次级代谢产物,容易污染粮食作物及其制品,主要存在于发霉的粮食、豆类、坚果及与其相关食品中。黄曲霉毒素,具有极强的毒性和致癌性,尤其是黄曲霉毒素B1,是目前已发现的最强的天然致癌物质,严重威胁人类健康。目前食品中黄曲霉毒素的检测以高效液相色谱、液质联用等仪器分析方法为主,然而仪器分析方法具有设备昂贵、操作繁琐、需要专业人员等不足。近年来以特异性生物分子(抗体、重组抗体、适配体等)识别黄曲霉毒素,并结合不同的信号报告分子,建立了一系列黄曲霉毒素分析方法,检测快速、灵敏并易于操作,在食品安全领域广泛应用。着重从黄曲霉毒素的生物识别分子和信号报告分子两方面介绍目前黄曲霉毒素的快速检测手段,并对其进行比较和评价,同时对黄曲霉毒素快速检测方法的发展方向进行展望。     

赤潮藻毒素危害及其检测方法研究进展

近年来,世界各地包括我国部分沿海地区赤潮发生过度频繁,许多赤潮藻毒素不但使其他海洋生物中毒,对人类健康也有潜在的危害,因此对赤潮藻毒素的研究已经成为海洋环境科学研究的重要内容。我们介绍了赤潮藻毒素的危害,并详细综述了赤潮藻毒素检测技术研究进展。     

α-芋螺毒素的研究现状

α-芋螺毒素是近年来研究较多的一种海洋生物神经毒素,它特异性竞争结合烟碱型乙酰胆碱受体,化学结构独特。本文介绍了有关α-芋螺毒素的种类、结构特征、生物学活性和制备方法等方面的研究进展,及其在生物化学、生物学以及新药开发等方面的应用前景。     

海洋生物资源开发研究概况与展望

对各类主要的海洋生物资源开发研究作了简洁概述,从海洋生物体内获取的各种活性物质,除可研究海洋药物外,还可开发海洋生物功能性保健品,海洋生物化工产品等;此外,尚可利用其特异的化学结构作为先导物,设计合成治疗疑难病的创新药物。可以预言,２１世纪将是人类研究、开发、利用海洋生物资源的黄金时代     

浅谈PCR技术海洋生物多肽毒素克隆研究中的应用

本文主要结合PCR技术在海洋生物多肽毒素克隆研究中的应用探讨了如何进行PCR技术的教学。     

基于HT-SELEX筛选的节球藻毒素-R适配体的鉴定

节球藻毒素-R（nodularin-R,NOD-R）是具有强烈肝毒性的蓝藻毒素。然而,现有的NOD-R检测技术均存在一定的局限性,亟待开发一种新的检测方法。本文利用指数富集的配基系统进化（systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX）技术结合高通量测序（HT-SELEX）,筛选出NOD-R特异的高亲和力适配体。生物膜干涉（biolayer interferometry,BLI）技术对适配体的鉴定结果表明,适配体H62与NOD-R之间的亲和力最高,达到了168 nM。而且,该适配体不与其他毒素结合,具有较高的特异性。以上结果表明,适配体H62有望作为NOD-R检测新方法——适配体生物传感器的分子识别元件。     

芋螺毒素的翻译后修饰

芋螺毒素是一类由芋螺毒液管分泌的生物活性小肽,能特异地作用于各种离子通道和神经递质受体.芋螺毒素的一个显著特点是具有高度的翻译后修饰,包括Glu的γ羧基化、L型氨基酸到D型氨基酸的异构化、Pro等的羟基化、Trp的溴代等.这些翻译后修饰在提高芋螺毒素分子多样性的同时,也增强了芋螺毒素的功能.现主要针对芋螺毒素中的各种翻译后修饰的发现、分布、功能和参与反应的酶系统进行综述.     

人源抗A型肉毒毒素单链抗体的体外亲和筛选*

以重组制备的A型肉毒毒素保护性抗原为配体,对人源噬菌体免疫抗体文库进行体外定向亲和筛选,获得特异结合子,其中与抗原高亲和力结合的抗体克隆B17基因全长750bp,可编码250个氨基酸,抗体可变区基因同源分析表明,分属VH4和κchainⅡ家族,是一株人源特异单链抗体基因。人源单链抗体B17在大肠杆菌中获得了重组表达,表达产物可以竞争特异肉毒抗毒素马血清与抗原的结合,是国内首次获得的抗A型肉毒毒素保护性抗原的人源单链抗体,可以在肉毒毒素检测和治疗研究中发挥作用。     

人源抗A型肉毒毒素单链抗体的体外亲和筛选

以重组制备的A型肉毒毒素保护性抗原为配体,对人源噬菌体免疫抗体文库进行体外定向亲和筛选,获得特异结合子,其中与抗原高亲和力结合的抗体克隆B17基因全长750bp,可编码250个氨基酸,抗体可变区基因同源分析表明,分属VH4和κ chain Ⅱ家族,是一株人源特异单链抗体基因。人源单链抗体B17在大肠杆菌中获得了重组表达,表达产物可以竞争特异肉毒抗毒素马血清与抗原的结合,是国内首次获得的抗A型肉毒毒素保护性抗原的人源单链抗体,可以在肉毒毒素检测和治疗研究中发挥作用。     

昆虫对Ｂt毒素的抗性机理研究进展

文中综述了昆虫对苏云杆菌（Ｂt)毒素产生抗性的生化遗传机理及抗性的遗传及交叉抗性情况。昆虫对Ｂt毒素的抗性可能在６个环节发生,其中与毒素特异结合的受体上结合位点的改变及毒素水解过程中的变化是抗性产的两个主要环节。从现有的研究结果来看,实验室及田间抗性昆虫品系对Ｂt毒素产生的抗性主要与昆虫中肠上皮细胞膜上Ｂt毒素特异结合受体的变化有关,深入研究是昆虫对Ｂt毒素的抗性机理,将有助于建立抗性的早期监测技术、抗性治理措施,实施无公害Ｂt农药及转Ｂt基因作物的持续利用。     

海洋生物源杀虫活性物质研究进展

综述了海洋生物源杀虫活性物质的最新研究进展。系统总结了常见海洋生物中活性物质的种类、生物活性、作用方式的特点以及海洋生物活性物质的研究及应用状况。重点评述了海洋毒素、海藻提取物及海洋微生物次生代谢产物等海洋生物源杀虫活性物质的研究概况。介绍了海洋生物活性物质作为杀虫剂研究开发利用的途径 ,展望了其应用前景。     

芋螺毒素的药用价值研发进展

芋螺毒素是一种海洋软体动物芋螺分泌的一类用于自卫和捕食的小肽神经性毒素。芋螺毒素具有很高的药用开发价值和潜力。近年来,具有高度特异性生物活性的芋螺毒素一直广泛应用于研制特异性诊断试剂以及开发疗效特异的新药之中,并作为分子模型用于相关新药的设计。本文对近年来芋螺毒素药用开发研究的最新进展做一综述。     

霍乱和鼠疫病原菌蛋白毒素的分子结构及其功能

<正>细菌毒素的研究始于19世纪末分离出白喉毒素后,其后也分离并研究了其它细菌毒素。经查明大多数细菌毒素为蛋白性,并具有结合部位和活性功能。毒素分子具有结合功能的部分使毒素粘着于特定细胞的相应受体上,然后分子的活性部分施展毒性作用。研究结果指出没有结合部位的毒素分子不能体现生物学作用,尽管分子中仍保持具有活性功能的部位。 由于积累了许多有关细菌毒素的资料,有必要对其系统化和分类。在许多著作中都阐述了一些主要细菌毒素的分类法。Bonventre提出根据毒素分子的结构特点进行分     

鱼毒性赤潮藻类的次生代谢物

本文对近年来引起赤潮,并对其他海洋生物、生态系统造成危害的米氏凯伦藻次生代谢物溶血毒素、活性氧、脂肪酸和细胞毒素等的产生机制与危害方式的研究进展作一介绍。     

A型肉毒神经毒素基因的PCR检测

目的:建立快速筛查A型肉毒毒素的PCR方法。方法:根据GenBank中报道的肉毒毒素基因序列,综合应用多种生物软件分析设计特异的检测引物,从提取的基因组DNA、热裂解产物和菌液等不同形式的模板中扩增大小为457bp的A型肉毒毒素特异基因片段,以肉毒梭菌其他血清型及破伤风梭菌为对照。结果:检测方法无交叉反应,灵敏度可达10pgDNA,3×103个菌。结论:建立的检测方法特异性强、灵敏度高,可以用于A型肉毒毒素基因的快速筛查。     

μ-芋螺毒素——高特异性钠通道阻滞剂

μ-芋螺毒素是一类具有独特药理活性的海洋生物毒素,至今共发现有7种,均为16～22个氨基酸大小的小肽,其分子内部形成3对二硫键。它们高度特异性地阻断电压门控Na 通道,甚至能够区分Na 通道的不同亚型。最近发现的两种μ-芋螺毒素的特异性更强,可以选择性地作用于TTX-R型Na 通道,而对TTX-S型Na 通道几乎无任何影响,这种作用的特点对于研究Na 通道亚型及新药开发具有重要价值。