人主动脉硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对培养的人血管壁细胞生长的作用

通过培养的人主动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）及脐静脉内皮细胞（ｈＵＶＥＣ）,应用３Ｈ－ＴｄＲ参入、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析、逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（ＨＳＰＧ）对ｈＡＳＭＣ和ｈＵＶＥＣＤＮＡ合成的作用及对血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）、ＰＤＧＦ受体、转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、内皮素－１（ＥＴ－１）或碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达和肾素－血管紧张系统（ＲＡＳ）的影响,结果显示,ＨＳＰＧ明显抑制培养的ｈＡＳＭＣ基础的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：１０３８５±３２６３ｖｓ,２５５４１±６４２１,Ｐ＜０．０１）及外源性ＰＤＧＦ诱导的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：９８７８±１９４７ｖｓ．１３４８１±４４ｌ０,Ｐ＜０．０５）;抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－Ｂｐ和ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,提高ＰＤＧＦａ和β受体ｍＲＮＡ的表达;显著降低ｈＡＳＭＣ培养液中血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的浓度和血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的活性,推测ＨＳＰＧ抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－β及ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,降低ＡＣＥ活性及ＡｎｇⅡ浓度是其抑制ｈＡＳＭＣ增殖的重要机     

表皮生长因子对离体大鼠肺动脉及肺动脉平滑肌细胞作用的研究

本研究着重探讨表皮生长因子（ＥＧＦ）对大鼠肺动脉的收缩作用及对肺动脉平滑肌细胞分裂增殖的影响。浓度为１×１０－９－１×１０－７ｍｏｌ／Ｌ的ＥＧＦ可引起大鼠肺动脉剂量依赖性收缩（ｒ＝０．９６８,Ｐ＜０,００１）,其Ｅｍａｘ为１００．６ｍｇ,ＥＣ５０为１１．９６ｎｍｏｌ／Ｌ。在同时存在０．５％胎牛血清（ＦＣＳ）时,ＥＧＦ能促进平滑肌细胞的３Ｈ－ＴｄＲ参入率,该作用与剂量呈正相关（ｒ＝０．８２３,Ｐ＜０．０５）,其ＥＣ５０为６．５×１Ｏ－１２ｍｏｌ／Ｌ。１×１０－９ｍｏｌ／Ｌ的ＥＧＦ＋０．５％ＦＣＳ能产生与１０％ＦＣＳ相当的促细胞分裂增殖能力（在培养的第１,３,５,７天,二者促分裂增殖能力相差不明显,Ｐ均＞０．０５,第９天时,前者大于后者,Ｐ＜０．０５）。１×１０－９ｍｏｌ／ＬＥＧＦ单独存在时对平滑肌细胞未显示出明显的致分裂活性。上述作用提示ＥＣＦ在某些肺血管病变如缺氧性肺动脉高压中可能有一定意义。     

内皮素—1对大鼠排卵前卵泡颗粒细胞产生孕酮的影响

本文用离体细胞体外孵育法研究了内皮素－１（ＥＴ）对大鼠排卵前卵泡颗粒细胞孕酮生成的影响及其作用机理。结果发现,ＥＴ能显著抑制ｈＣＧ刺激下的孕酮产生,抑制作用在浓度为１０－８ｍｏｌ／Ｌ时,即有显著意义（Ｐ＜０．０５,ｎ＝６）,至１０－７ｍｏｌ／Ｌ时则有非常显著的意义（Ｐ＜０．０１,ｎ＝６）;不同浓度ＥＴ（１０－７—１０－７ｍｏｌ／Ｌ）,对颗粒细胞基础孕酮的产生无明显影响。进一步研究表明,ＥＴ对ｈＣＧ刺激下孕酮生成的抑制作用,在用免抗人内皮素抗血清（ＥＴ－Ａ）１：１０００及ｃＡＭＰ后能明显被逆转。实验中还观察到,ＥＴ使颗粒细胞ＬＨ／ｈＣＧ受体数下降,亲和力降低。本文结果提示,ＥＴ可能为卵巢内的一种局部调节肽,通过作用于ＥＴ受体,干扰ＬＨ／ｈＣＧ受体功能和ｃＡＭＰ生成而抑制颗粒细胞孕酮的产生。     

EDRF对PE引起的大鼠主动脉缩血管效应的作用

本文研究ＥＤＲＦ（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ－ｄｅｒｉｖｅｄｒｅｌａｘｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＥＤＲＦ）对ＰＥ（ｐｈｅｎｙｌｅｐｈｒｉｎｅ）引起的大鼠主动脉收缩反应的影响。内皮完整和去内皮的大鼠主动脉环悬挂于器官浴槽中,测定血管的张力和收缩速度的变化。所有的实验在消炎痛（ｉｎｄｏｍｅｔｈａｃｉｎ,１０μｍｏｌ／Ｌ）存在下进行。用美兰（ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｂｌｕｅ,ＭＢ,１０μｍｏｌ／Ｌ）或左旋硝基精氨酸（ＮＧ－ｎｉｔｒｏ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ,Ｌ－ＮＮＡ,３０μｍｏｌ／Ｌ）处理内皮完整的大鼠主动脉环,ＰＥ的剂量－收缩张力曲线明显左移,ＥＣ３０值均降低５倍,最大反应比率分别为１．６±０．４和１．６±０．５。在去内皮的大鼠主动脉环中,经ＭＢ和Ｌ－ＮＮＡ处理后,仍可见ＥＣ３０下降３倍,最大反应比率均为１．０±０．２。后者可能与血管平滑肌产生少量ＥＤＲＦ有关。我们的结果提示ＰＥ对血管的收缩反应也受血管内皮和平滑肌产生的ＥＤＲＦ的调控     

褪黑素对大鼠海马神经元谷氨酸所致毒性的拮抗作用

在大鼠海马脑片上电刺激Ｓｃｈａｆｆｅｒ 侧支纤维, 胞外记录ＣＡ１ 区锥体细胞层诱发群体锋电位（ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｓｐｉｋｅ,ＰＳ） , 观察灌流谷氨酸（Ｇｌｕ） 和褪黑素（ＭＥＬ） 对ＰＳ的影响。结果显示：５－０ ｍｍｏｌ／Ｌ浓度的Ｇｌｕ 可使ＰＳ值下降至对照值的４－１ ％ ; ＭＥＬ（０－４ 、０－５ 和０－６ μｍｏｌ／Ｌ） 与５－０ ｍｍｏｌ／ＬＧｌｕ 混合给药,ＰＳ值分别变化为对照值的１４－７ ％ 、１０５－２％ 、２４－３ ％ ; ＭＥＬ（０－５ μｍｏｌ／Ｌ） 、Ｇｌｕ （５－０ ｍｍｏｌ／Ｌ） , 与赛庚啶（ＣＤＰ,０－５ μｍｏｌ／Ｌ） 混合给药,ＰＳ值下降至０ 。上述结果提示,５－０ ｍｍｏｌ／Ｌ浓度的Ｇｌｕ 有神经毒性作用, 但可为ＭＥＬ拮抗, 这可能由５ＨＴ受体所介导。     

几种扩血管多肽对bFGF促血管平滑肌细胞增殖作用的影响

目的和方法：研究肾上腺髓质素（Ａｄｍ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）及Ｃ－型心房利太（ＣＮＰ）对碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）促血管平滑细胞（ＶＳＭＣ）增殖作用的影响及其机制。结果：孵育２４ｈ后,ｂＦＧＦ刺激ＶＳＭＣ增殖较对照组增加２．１倍（Ｐ〈０．０１）,细胞内蛋白磷酸化程度增加１．４倍（Ｐ〈０．０１）,ＰＫＣ及ＭＡＰＫ活性分别增加１．５和２．５倍（Ｐ〈０．０１０;Ａｄｍ．ＣＧＲＰｔ ＣＮＰ     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠肾小球系膜细胞原癌基因c-fos和c-myc表达的影响

在建立大鼠肾小球系膜细胞（ＭＣ）体外培养方法的基础上,通过３Ｈ－ＴｄＲ参入实验,ＲＮＡ印迹分析和斑点杂交观察ｂＦＧＦ对ＭＣＤＮＡ合成及原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达的影响．结果表明,ｂＦＧＦ作用于ＭＣ１８ｈ,ＭＣ的３Ｈ－ＴｄＲ参入率明显增加（Ｐ＜０．０５）,２４ｈ达到高峰（Ｐ＜０．０１）;ｂＦＧＦ显著诱导原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达,其表达活性分别于３０ｍｉｎ和１ｈ达到高峰．提示ｂＦＧＦ是ＭＣ的强效丝裂原,其对ＭＣＤＮＡ合成的促进作用与诱导原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达有关．     

钙通道阻滞剂对肾上腺素能受体激动剂促血管平滑肌细胞增值的抑制

本工作观察到１０－６—１０－５ｍｏｌ／Ｌ去甲肾上腺素（ＮＥ）和１０－７—１０－５ｍｏｌ／Ｌ异丙基肾上腺素（ＩＳＯ）可明显促进离体培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的增殖和ＤＮＡ的合成,并呈剂量依赖效应,该效应可为相应的受体阻断剂ｐｈｅｎｔｏｌａｍｉｎｅ（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）和ｐｒｏｐｔａｎｏｌｏｌ（１０－５ｍｏｌ／Ｌ）所抑制;ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）和ｖｅｒａｒｏｍｉｌ（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）分别与同样浓度的ＮＥ同时加入细胞培养液中,其细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ掺入率分别较单用ＮＥ时显著降低（Ｐ＜０．０１）,ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ与ｖｅｒａｐａｍｉｌ亦明显抑制ＩＳＯ促ＶＳＭＣ增殖的作用。     

丝瓜籽中蛋白质生物合成抑制蛋白的分离、纯化及性质研究

丝瓜（Ｌｕｆｆａｃｙｌｉｎｄｒｉｃａ）种籽,经捣碎、抽提、硫酸铵分级沉淀,ＣＭ－５２离子交换层析,Ｓｅｐｈａｃｒｙ１Ｓ－１００分子筛,阳离子交换ＦＰＬＣ等步骤,分离到两种单链蛋白质生物合成抑制蛋白：Ｌｕｆｆｉｎ－Ａ和Ｌｕｆｆｉｎ－Ｂ。它们都是等电点接近１０的碱性蛋白,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定分子量分别约为２７ｋｄ和２８ｋｄ,氨基酸组成分析表明两者具很大同源性,但免疫双扩散及ＥＬＩＳＡ检测证明两者的免疫原性有差异。Ｌｕｆｆｉｎｓ对兔网织红细胞裂解液的蛋白质生物合成有强烈的抑制作用,ＩＣ５０分别为１．４×１０－１１ｍｏｌ／Ｌ和２．０×１０－１１ｍｏｌ／Ｌ,比ＴＣＳ的２．９×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ低得多。因而,Ｌｕｆｆｉｎｓ很有可能成为肿瘤导向药物的高效＂弹头＂。     

钙调素拮抗剂对人肺癌细胞增殖抑制及与cAMP信号系统相关性之初探

对钙调素（ＣａＭ）拮抗剂—三氟拉嗪（ｔｒｉｆｌｕｏｐｅｒａｚｉｎｅ,ＴＦＰ）在人肺癌细胞ＰＬＡ８０１的增殖抑制中的作用和ＣａＭ与ｃＡＭＰ信号系统水平的变化进行了研究．用５、１０、１５和２０μｍｏｌ／ＬＴＦＰ处理人肺癌细胞时观察到ＴＦＰ在抑制细胞内ＣａＭ活性的同时,抑制了细胞的增殖．药物处理的细胞在软琼脂中形成的集落数减少且明显小于对照组细胞．使用流式细胞光度术分析细胞周期的结果表明：１０μｍｏｌ／ＬＴＦＰ处理抑制了Ｇ１期细胞向Ｓ期的转移．当用１０μｍｏｌ／ＬＴＦＰ作用细胞５ｍｉｎ时,细胞内ｃＡＭＰ水平达到正常水平的１．８倍,直到３ｈ仍明显高于正常水平．同时,ｃＡＭＰ依赖的ＰＫＡ的活性在加药后１５ｍｉｎ上升到正常水平的２．８倍,直到加药３ｈ．活性仍保持较高水平,结果表明：钙调素功能的抑制,提高了ＰＬＡ－８０１细胞内ｃＡＭＰ系统的水平,Ｃａ２＋－ＣａＭ和ｃＡＭＰ－ＰＫＡ两个信号系统的协调作用,抑制了细胞的增殖     

内皮素对失血性休克鼠脑微循环的影响及尼莫地平、川芎嗪的治疗作用

利用大鼠颅骨开窗观察软脑膜微循环的方法研究了内皮素（ＥＴ－１）１０－１０－１０－７ｍｏｌ／Ｌ对软脑膜微循环的影响以及失血性休克时软脑膜对ＥＴ－１的反应性。并用１０－７ｍｏｌ／Ｌ造成失血性休克后脑血管痉挛的模型,观察尼莫地平、川芎嗪、６５４－２对内皮素引起血管痉挛的治疗作用。１０－９、１０－８和１０－７ｍｏｌ／Ｌ３种浓度ＥＴ－１可使软脑膜小动脉、细动脉强烈收缩,收缩率分别为２７．７％、４６．８％、７８．５％,其收缩强度与ＥＴ－１的浓度有关。对静脉的作用不明显。１０－１０ｍｏｌ／ＬＥＴ－１可使细动脉轻度扩张。出血性休克时,软脑膜血流明显减慢,小动脉、细动脉管径对ＥＴ－１的收缩作用更敏感,脑组织血流明显减少。尼莫地平具有较好的拮抗ＥＴ－１引起软脑膜动脉的收缩和改善局部微循环的作用。川芎嗪也能拮抗ＥＴ－１引起软脑膜动脉的收缩,但作用较尼莫地平弱。６５４－２不能缓解ＥＴ－１对软脑膜动脉的收缩作用。     

锂和三尖杉酯碱对HL—60细胞增殖,分化和c—myc表达的影响

本研究利用细胞培养技术观察了氯化锂和三尖杉酯碱（ＨＴ）对ＨＬ－６０细胞增殖的影响,不同浓度的氯化锂对ＨＬ－６０细胞的集落形成和３Ｈ－ＴｄＲ参入均呈剂量依赖式抑制;三尖杉酯碱亦有类似的作用。在培养体系中加氯化锂和三尖杉酯碱时,对ＨＬ－６０细胞数及集落形成抑制作用与单用二者相比较有明显增加。用ＮＢＴ还原试验,氯化锂和三尖杉酯碱均促进ＨＬ－６０细胞的分化,小剂量氯化锂还能加强三尖杉酯碱对ＨＬ－６０细胞诱导分化作用。从氯化锂和三尖杉酯碱处理的ＨＬ－６０细胞中提取总ＲＮＡ,应用ＲＴ／ＰＣＲ检测ｃ－ｍｙｃ的表达,结果表明经氯化锂和三尖杉酯碱处理的ＨＬ－６０细胞ｃ－ｍｙｃ表达均降低,与未处理的ＨＬ－６０细胞ｃ－ｍｙｃ比较,说明氯化锂和三尖杉酯碱均能抑制ｃ－ｍｙｃ的表达,提示ｃ－ｍｙｃ很可能在白血病细胞增殖、分化中起调控作用。     

一氧化氮抑制内皮素促血管平滑肌细胞增殖作用的信号转导途径

培养的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）分别以内皮素（ＥＴ－１）、一氧化氮（ＮＯ）前体Ｌ－Ａｒｇ和ＮＯ供体ＳＩＮ－１刺激,或用ＥＴ－１＋Ｌ－Ａｒｇ、ＥＴ－１＋ＳＩＮ－１联合刺激,测ＶＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性的改变,以研究ＮＯ抑制ＥＴ－１促ＶＳＭＣ增殖作用的信号转导途径。结果表明：（１）ＥＴ－１ １０＾－８ｍｏｌ／Ｌ单独刺激,＾３Ｈ－     

粉防己碱抑制血管平滑肌细胞增殖及对HSP70和p53表达的影响

目的：观察粉防己碱（Ｔｅｔ）对ＶＳＭＣ增殖的作用及对热应激蛋白７０ｋｄ（ＨＳＰ７０）及其ｍＲＮＡ和抑癌基因ｐ５３ｍＲＮＡ的影响。方法：用内皮素建立培养的血管平滑肌细胞增殖模型。采用氚－胸腺嘧啶核苷（［３Ｈ］ＴｄＲ）掺入法流式细胞术,Ｗｅｓｔｅｒｎ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交方法。结果：Ｔｅｔ能逆转内皮素所致的［３Ｈ］ＴｄＲ掺入量增多（Ｐ＜０．０１）,阻止血管平滑肌细胞由静止期（Ｇ０／Ｇ１期）进入ＤＮＡ合成期（Ｓ期）和有丝分裂期（Ｇ２／Ｍ期）,并能逆转内皮素引起的ＨＳＰ７０及ｍＲＮＡ表达增强（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）,ｐ５３抑癌基因ｍＲＮＡ表达减弱（Ｐ＜０．０５）。结论：Ｔｅｔ能抑制血管平滑肌细胞增殖,与ＨＳＰ７０及ｐ５３的调控有关     

赖诺普利对血管成形术后平滑肌细胞增殖影响的研究

为研究赖诺普利对血管成形术后平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的影响,用体外血管平滑肌细胞培养及氚标记胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入技术,观察了不同浓度赖诺普利（１～２０μｇ／ｍｌ）对培养的球囊血管成形术后的兔髂动脉ＳＭＣ增殖情况的影响。结果表明：加入赖诺普利后ＳＭＣ对３Ｈ－ＴｄＲ的摄取及细胞计数明显比对照组低（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）,各浓度组均有作用,浓度越高作用越明显。提示赖诺普利可抑制血管成形术后平滑肌细胞的增殖,有预防血管成形术后再狭窄的作用。     

乙酰胆碱对培养T细胞功能的作用

本文研究不同浓度（１０＾－１０－１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ）乙酰胆碱（ＡＣｈ）对离体培养的大鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。实验结果表明：１０＾－９－１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ可显著增强Ｔ细胞由刀豆素Ａ（Ｃ－Ａ）诱导的增殖反应,以１０＾－７－１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时最强。淋巴细胞先用ＡＣｈ刺激１ｈ或者刺激１ｈ后洗弃ＡＣｈ,再用ＣｏｎＡ诱导６ｈ的Ｔ细胞的增殖。１０＾－７－１０－６ｍｏｌ／Ｌ阿托品可阻     

白细胞介素对大鼠离体垂体前叶细胞增殖的影响

本工作采用大鼠垂体前叶（ＡＰ）细胞原代培养方法,以３ＨＴｄＲ掺入率反映细胞增殖水平,研究了ＩＬ１和ＩＬ６对ＡＰ细胞增殖的影响。结果表明：（１）ＩＬ１（１－１００ｎｇ／ｍｌ）促进雄性大鼠和雌性大鼠ＡＰ细胞的增殖。（２）低浓度的ＩＬ６（０．１ｎｇ／ｍｌ）抑制雄性大鼠的ＡＰ细胞的增殖,而较高浓度的ＩＬ６（１－１０ｎｇ／ｍｌ）则表现为刺激作用。（３）ＩＬ６（０．１－１０ｎｇ／ｍｌ）促进雌性大鼠ＡＰ细胞的增殖。上述结果说明ＩＬ１和ＩＬ６除直接调控ＡＰ细胞的分泌外,也参与调节ＡＰ细胞增殖活动。     

肾上腺髓质素对大鼠肠系膜微血管和微淋巴管的作用

应用活体显微电视录象技术,观察上腺髓质素对大鼠肠系膜微血管微淋巴管的作用及其对去甲肾上腺素,内皮素作用的是结果表明,ＡＤＭ直接扩张肠系膜各级微血管和向一淋巴管,拮抗ＮＥ和ＥＴ引起的微血效及微循环血流液态的异常改变。ＡＤＭ的上述作用可被一氧化氮生成抑制剂Ｎ＾９－ｎｉｔｒｏ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ（Ｌ－ＮＮＡ）显著抑制。