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1.
2.
SiRNA抑制柯萨奇B3病毒的复制和表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 研究观察体外合成siRNA对培养HELA细胞中柯萨奇B3病毒(Coxsackievirus B3,CVB3)的影响。方法根据siRNA靶序列设计原则,针对编码CVB3病毒聚合酶、VP1蛋白和5’非编码区基因组,特异性地体外合成三对siRNA,同时合成一对与CVB基因组序列无关的阴性对照siRNA。利用脂质体转染进入Hela细胞,用CVB3感染培养HELA细胞,观察转染后HELA细胞病变;采用RT-PCR技术检测感染CVB3各组的病毒RNA;用免疫荧光技术检测各组CVB3蛋白的表达;并用培养细胞上清液再感染HELA细胞观察病毒滴度。结果针对CVB3病毒聚合酶的siR-NA能有效的抑制病毒的复制和CVB3蛋白的表达,并能抑制病毒的再感染;而针对VP1蛋白和5’非编码区的siRNA能部分抑制病毒的复制和CVB3蛋白的表达。结论我们设计合成针对编码CVB3病毒聚合酶基因组的siRNA能有效抑制CVB3病毒复制和表达。  相似文献   
3.
反义CD151基因转染对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的观察pcDNA3.1真核表达载体介导的反义CD151基因转染对培养的大鼠动脉平滑肌细胞(VSMCs)迁移的影响。方法构建携带全长正义和反义CD151的真核表达载体pcDNA3.1-CD151和pcDNA3.1-anti-CD151重组质粒,转染体外培养的VSMCs,以RT-PCR和Western blot方法检测CD151的表达,用Boyden趋化小室方法观察细胞迁移。结果与载体对照组、脂质体对照组和空白对照组3组均值比较,转染48h后,反义CD151组mRNA表达降低58%,蛋白表达降低51%,正义CD151组的VSMCs CD151mRNA表达增加171%,蛋白表达增加133%;趋化迁移的细胞数,反义CD151组为37.9±6.3,正义CD151组为86.5±12.4;载体对照组、脂质体对照组和空白对照组分别为60.3±7.1、61.8±7.6和67.3±9.6。反义CD151组显著低于其余各组(P<0.01),正义CD151组显著高于其余各组(P<0.01)。结论pcDNA3.1真核表达载体介导的反义CD151转染,通过抑制CD151的表达,能够显著抑制大鼠VSMCs的迁移。  相似文献   
4.
细胞凋亡是一种受基因调控的主动性细胞死亡 ,表现为凋亡信号通路的启动及相关基因的表达。在细胞凋亡的发生过程中 ,有不同的信号转导途径介导和参与 ,而直接启动凋亡的一条最具特征性的途径为死亡受体 (deathreceptor ,DR)信号转导途径。死亡受体为位于细胞膜表面的某种蛋白质 ,能与携带凋亡信号的专一性配体结合并迅速将凋亡信号转导到细胞内而诱导细胞凋亡 ,属于肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactor ,TNF)受体基因超家族成员。这些受体均具有相似的富含半胱氨酸的胞外区 ,而且均存在一个约 80~ 90…  相似文献   
5.
人参皂甙Rg1抗OxLDL诱导内皮细胞凋亡及分子机制   总被引:11,自引:0,他引:11  
目的 探讨人参皂甙Rg1抑制氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,OxLDL)诱导血管内皮细胞凋亡的作用及其相关分子机制。方法 以体外培养的牛主动脉内皮细胞为模型。分别加入OxLDL200μg/ml(OxLDL组)和OxLDL200μg/ml Rg140μg/ml(Rg1组);对照组不加任何诱导物,培养24小时后观察细胞形态变化,DNA电泳,TUNEL染色检测细胞有无凋亡及凋亡的程度,Western blot分析各组内皮细胞型一氧化氮合酶(endothelial Nitric Oxide Synthase,eNOS)的表达水平。结果 (1)对照组和OxLDL组血管内皮细胞凋亡比例分别为8%和41.35%;(2)Rg1组血管内皮细胞凋亡比例为13.29%;(3)OxLDL抑制牛主动脉内皮细胞的eNOS表达水平,此抑制作用具有剂量依赖性。人参皂甙Rg1可使被OxLDL抑制的eNOS表达水平回升。结论 (1)OxLDL能诱导血管内皮细胞凋亡。(2)人参皂甙Rg1能抑制OxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡。(3)此作用可能与上调内皮细胞的eNOS水平,减轻细胞的脂质过氧化损伤有关。  相似文献   
6.
OxLDL 与动脉粥样硬化   总被引:4,自引:0,他引:4  
动脉粥样硬化是发生在中等以上动脉壁的慢性炎症 ,它是化学修饰后的脂质、单核细胞来源的巨噬细胞、T细胞以及血管壁多种正常细胞相互作用的结果[1] 。目前研究资料表明经氧化修饰后的低密度脂蛋白 (OxLDL)参与了动脉粥样硬化发生、发展的各个环节。本文就OxLDL致动脉粥样硬化的研究进展做一综述。1.OxLDL的形成和分类天然低密度脂蛋白 (LDL)中含有大量不饱和脂肪酸 ,在自由基或其他氧化剂作用下生成脂类自由基 ,并能产生更多的过氧化脂质引起连锁的自由基链式反应 ,最终生成多种活性醛。这些化学性质活泼的醛和LDL中…  相似文献   
7.
OxLDL诱发大鼠血管内皮细胞凋亡模型的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 建立OxLDL诱发大鼠血管内皮细胞凋亡的模型。方法 SD大鼠尾静脉注射非氧化的LDL ,2 4h后取主动脉血管内皮细胞铺片 ,采用光学显微镜和荧光显微镜进行形态学观察 ,TUNEL法染色计算凋亡细胞比例。结果 ( 1)静脉注射LDL组观察到明显的凋亡形态学改变 ,对照组未见凋亡内皮细胞 ;( 2 )静脉注射LDL ( 4mg/kg、 6mg/kg、8mg/kg)组凋亡细胞比例分别为 8 10 %、 18 92 %、 2 2 0 3 % ,三组间有非常显著性差异 (P <0 0 1)。结论  ( 1)尾静脉注射LDL后 2 4h可引起血管内皮细胞凋亡 ;( 2 )静脉注射LDL引起大鼠血管内皮细胞凋亡呈剂量依赖性  相似文献   
8.
钙与心肌缺血再灌注诱发的心肌细胞凋亡   总被引:4,自引:0,他引:4  
细胞凋亡 ( Apoptosis)是最基本的细胞死亡过程 ,是一种普遍存在的生命现象。细胞凋亡与细胞增殖的动态平衡是多细胞生物维持其结构稳定及内环境动态平衡和生长发育所必有的最基本的生物学现象。不适当的细胞凋亡所致的凋亡失调性疾病( Disease of Disregulated Apoptosis,DDA)正受到人们的关注 [1]。这些疾病包括细胞凋亡减弱性疾病和细胞凋亡增强性疾病 ,前者如肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染及慢性炎症性疾病。后者包括神经元退行性疾病、造血衰竭性疾病、缺血性损伤等。在心血管系统疾病中 ,心肌梗塞、心肌缺血再灌注损伤、心肌炎、…  相似文献   
9.
血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体信号转导途径参与细胞的迁移、增殖、生存,在血管新生和血管保护中具有重要的作用.VEGF受体信号转导途径可能是治疗冠状动脉粥样硬化的理想靶点.本文针对VEGF受体信号转导途径及其与冠心病治疗的研究现状予以综述.  相似文献   
10.
高表达CD151细胞系的构建   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的构建高表达CD151细胞系Tca8113-CD151,为研究CD151在肿瘤细胞迁移及肿瘤转移中的作用和相关机制提供实验模型.方法构建pcDNA3.1-CD151-HA重组体,采用磷酸钙共沉淀法转染Tca8113细胞,经G418筛选抗性克隆.通过RT-PCR和Western blot分别检测这些克隆CD151基因的转录和翻译.结果成功构建真核表达重组体pcDNA3.1-CD151-HA;Tca8113-CD151细胞系在mRNA和蛋白质水平高表达外源CD151.结论构建了稳定高表达CD151的细胞系Tca8113-CD151,为探讨CD151基因在肿瘤转移中的作用及其相关机制奠定了实验基础.  相似文献   
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