芽孢杆菌E2菌株纤维素酶性质的研究

芽孢杆菌Ｅ２菌在５５℃下生长良好,在培养液中能大量积累胞外纤维素酶（１９０ｍｕ／ｍＬ培养液）,所产生的纤维素普单一的羧甲基纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）。羧甲基纤维素钠（ＣＭＣＮａ）为其专一性底物。该酶作用的ｐＨ为４．５－８．０;最适ｐＨ为６．５－７．０;在ｐＨ４．０－８．０范围内较稳定,酶作用的最适温度为５５℃;在６０℃处理１０,３０,６０,９０以及１２０分钟后,残余酶活分别为９５％,８０．３％,４０     

中温碱性脂肪酶的研究：Ⅲ.扩展青霉PF868变株碱性脂肪酶的纯化及其…

扩展青霉ＰＦ８６８变株发酵液经硫酸铵盐析和Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－２００及Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱层析纯化,获得纯化倍数为３２．４的酶粉。该酶分子量为２３４４２Ｄａｌ,酶学特性表明：该酶的最适作用温度为３２℃,５０℃保温３０ｍｉｎ仍保留５０％酶活性,最适ｐＨ为９．０,作用ｐＨ稳定范围在７．０－１０．０之间,Ｃａ＾２＋和Ｍｇ＾２＋对酶有激活作用,Ｆｅ＾２＋,Ｃｕ＾２＋和Ｍｎ＾２＋酶活力有抑制作用。     

耐碱性真菌纤维素酶生产菌的筛选及酶学性质的初步研究

从造纸厂碱性土样中分离到２４株能够产生纤维素酶的真菌,经过摇瓶昨筛,选出一株耐碱性纤维素酶产生菌Ｓ６０７。经过鉴定。该菌株为黑色葡萄装穗霉（Ｓｔａｃｈｙ－ｂｏｔｒｙｓ ａｔｒａ）。通过对其粗酶液的性质进行测定,该菌所产纤维素酶粗酶液中的ＦＰＡ、ＣＭＣａｓｅ和β－葡萄糖苷酶的最适ｐＨ分别为６．０,６．０和６．５,其中内切酶在ｐＨ９．０时仍能保持最高酶活力的５０％以上,实验表明该菌株所产纤维素酶具有较     

芽孢杆菌A-30产碱性β-1,4-聚糖酶固体发酵研究

筛选得到一株高产β－１,４－聚糖酶的耐碱性芽孢杆菌Ａ－３０,其固体发酵（Ｓｏｌｉｄ ｓｔａｔｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ＳＳＦ）时最适培养条件：起始ｐＨ为８．０、培养温度为３２℃、１０％（ｖ／ｗ）接种量,含水量为６６．６％（ｖ／ｗ）,以０．５％的ＮａＮＯ３为无机氮源,发酵９６ｈ,木聚糖酶活可达６４５７ＩＵ／ｇ（Ｄｒｙｂａｃｔｅｒｉａｌ ｂｒａｎ）,纤维素酶活（ＣＭＣａｓｅ）可以达到１８．６６ＩＵ     

芽孢杆菌A-30产碱性β-1,4-聚糖酶固体发酵研究

筛选得到一株高产β－１,４－聚糖酶的耐碱性芽孢杆菌Ａ－３０,其固体发酵（Ｓｏｌｉｄ ｓｔａｔｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＳＳＦ）时最适培养条件：起始ｐＨ为８．０、培养温度３２℃、１０％（ｖ／ｗ）接种量,含水量为６６．６％（ｖ／ｗ）,以０．５％的ＮａＮＯ_３为无机氮源,发酵９６ｈ,木聚糖酶活可达６４５７ＩＵ／ｇ（Ｄｒｙ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｂｒａｎ）,纤维素酶活（ＣＭＣａｓｅ）可以达到１８．６６ＩＵ／ｇ。氮源组成、温度、ｐＨ及发酵时间等对Ａ－３０所产木聚糖酶和纤维素酶比例有较大影响。葡萄糖对Ａ－３０的阻遏效     

枯草杆菌（Bacillus subtilis）产果胶酶的研究：Ⅰ.菌种选育,鉴定 …

分离到１株高产果胶酶菌株，经形态，生理以及生化指标鉴定，确认为枯草杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）并命名为枯草杆菌１８。发酵液用９０％硫酸铵沉淀，透析后的粗酶经ＣＭ－５２柱层析，收集酶峰，再过ＳｈｅｐｈａｄｅｘＧ－１００得到部分纯化酶。该酶最适ＰＨ９．０，在ＰＨ９－１１稳定，最适反应温度６０℃，５０℃加热５０ｍｉｎ保存６０％酶活，６０℃加热５０ｍｉｎ酶活则保存１０％，酶的等电点（ｐＩ）４     

系统感染TMV的番茄叶胞外β-1,3-葡聚糖酶

系统感染ＴＭＶ （ｔｏｂａｃｃｏ ｍ ｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓ）的番茄（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ Ｍｉｌｌ．）叶胞外蛋白提取液经冰冻干燥浓缩、－ ２０℃丙酮沉淀、ＣＭ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ－２５离子交换层析、ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－２５离子交换层析和Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－７５凝胶层析纯化,获得ＰＡＧＥ均一的β－１,３－葡聚糖酶．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ证明,它包含分子量为３６ ｋＤ 和２７ ｋＤ的两个同工酶．以昆布多糖为底物,酶的最适ｐＨ 在４．８—５．２之间,在ｐＨ ４—８稳定;酶的最适温度在３０—４０℃之间,在４０℃保温１ｈ 后酶活性不变;Ｋｍ 值为９．２ ｍ ｇ／ｍ Ｌ．在系统感染ＴＭＶ 的番茄叶胞外蛋白提取液中,有分子量为２２ ｋＤ、２７ ｋＤ和３６ ｋＤ的３个β－１,３－葡聚糖酶同工酶     

急性低氧对大鼠脑组织钙调素含量及其依赖性蛋白激酶Ⅱ活性的影响

本实验观察了活性钙调素（ＣａＭ）含量和ＣａＭ依赖性蛋白激酶Ⅱ（ＣａＭｋｉｎａｓｅⅡ）活性在急性低氧（模拟海拔７０００ｍ,５ｈ）和常氧对照大鼠脑子组织中的变化。用流式产胞仪（ＦＡＣＳ）所测两组动物脑皮层细胞的ＣａＭ,平均荧光强度分别为４０．０±４．９和４６．１±５．８,急性低氧组明显低于常氧对照组（Ｐ＜０．０５）;用同位素液闪计数法所测两组动物皮层脑匀浆提取液中ＣａＭｋｉｎａｓｅⅡ活性,分别为１８４．３±８．１和１９８．８±９．４ｐｍｏｌＰｉ·ｍｉｎ－１·ｍｇ－１ｐｒｏ,急性低氧组明显低于常氧对照组（Ｐ＜０．０１）。结果提示ＣａＭ和ＣａＭｋｉｎａｓｅⅡ对低氧较为敏感,急性低氧时中枢神经细胞结构或功能的紊乱可能与活性ＣａＭ的含量减少和ＣａＭｋｉｎａｓｅⅡ活性能下降有关。     

水稻叶片磷酸烯醇式丙酮酸磷酸酯酶活性及其部分特性

从水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ）叶片分离出对磷酸烯醇式丙酮酸（ＰＥＰ）较专一的ＰＥＰ磷酸酯酶,其Ｋｍ （ＰＥＰ）为０．４２ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ,作用ｐＨ范围较窄,最适ｐＨ ８．７。它在ｐＨ ６．２—９．５ 范围内及４０℃以下较稳定。Ｐｉ对酶活性影响不大,仅在大于５ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ时表现出轻微的抑制作用。Ｍｇ２＋ 对酶活性具激活作用,在Ｍｇ２＋ 存在条件下,ＣａＣｌ２、ＣｏＣｌ２、ＣｕＳＯ４、ＦｅＳＯ４ 和ＺｎＳＯ４ 均表现抑制作用     

地衣芽孢杆菌β－甘露聚糖酶的纯化及酶学性质

地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ＮＫ－２７菌株发酵产生的β－甘露聚糖酶（β－ｍａｎｎａｎａｓｅ）经硫酸铵盐析沉淀,两次ＤＥＡＥ纤维素和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００离子交换柱层析以及制备ＰＡＧＥ筹步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用ＳＤＳ－凝胶电泳测得纯化后的β－甘露聚糖酶分子量为２６ｋＤ,用凝胶聚焦电泳测得等电点ＰＩ为５．０。酶反应的最适ｐＨ为９．０,最后温度为６０℃,稳定ｐＨ为６．０—９．０,稳定温度为４０℃。金属离子中Ｍｇ￣（２＋）、Ｃａ￣（２＋）、Ｆｅ￣（２＋）、Ｎｉ￣（２＋）对该酶有一定的激活作用;而Ｓｎ￣（２＋）、Ｚｎ￣（２＋）、Ａｌ￣（３＋）、Ａｇ￣＋和Ｈｇ￣（２＋）对该酶有强烈的抑制作用。ＮＫ－２７菌株的β－甘露聚糖酶对魔芋葡萄甘露聚糖和角豆胶半乳甘露聚糖的Ｋｍ值分别为７．１４和５．５６ｍｇ·ｍｌ￣（－１）;Ｖ＿（ｍａｘ）分别为２００．５３和１５７．４５μｍｏｌ·ｍｇ￣（－１）·ｍｉｎ￣（－１）。     

产纤维素酶菌株宇佐美曲霉Y-11产酶条件及酶性质的研究

通过正交试验,对宇佐美曲霉纤维素酶固态发酵条件进行了研究,其较适培养基为：麸皮与稻草配比为２：３,氮源：尿素,含水量：２００％（液固比）,ｐＨ：５．５。２８－３０℃培养７２小时,ＣＭＣ酶活力为５．０５（ｕ／ｍｌ）,滤纸酶活力达到１．０４（ｕ／ｍｌ）。ＣＭＣ酶及滤纸酶最适ｐＨ分别为４．４１、６．０６;最适温度分别为６５℃、５５℃。酶的热稳定性与ｐＨ稳定性较高。     

番茄果实ACC合成酶的性质

测定了经４步纯化,比活性达２００００Ｕ／ｍｇ蛋白质以上的番茄果实伤诱导ＡＣＣ合成酶的一些酶学性质。酶反庆最适ｐＨ值为９．５;酶在ｐＨ８．０下最稳定,ｐＨ７．５－１０短时间处理不会使酶发生不可逆变性;酶在ｐＨ８．０和９．５的Ｋｍ值分别为２３和４０μｍｏｌ／Ｌ;根据酶反应不同时间的产物累积量,得出反应速度随时间的变化符合函数关系式Ｖｔ＝Ｖ０ｅ＾－ｋｔ,并根据此式求出酶的半寿期为１０７ｍｉｎ。     

酸性木聚糖酶产生菌的筛选及产酶条件

从１５０株真菌中筛选到８株产木聚糖酶活力在１００Ｕ／ｍＬ以上的菌株,其中活力最高的为黑曲霉（编号１４９）（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｎｉｇｅｒ）。该菌株产酶较适培养基为：麸皮半纤维素４％,ＮａＮＯ３１％,麸皮１％,用不加（ＮＨ４）２ＳＯ４和尿素的Ｍａｎｄｅｌｓ氏营养盐液配制。２８℃～３０℃振荡培养６０ｈ,酶活力最高可达３７５．２Ｕ／ｍＬ。该酶最适作用ｐＨ为４６,在ｐＨ３～１１之间基本稳定。该菌株发酵液中含有木聚糖酶（相对活力１００）外还有淀粉酶（１８）,甘露聚糖酶（０９８）,β木糖苷酶（０９４）和纤维素酶（０１７）。     

高活力纤维素酶菌株康氏木霉B—7的选育与产酶条件的研究

野生型康氏木霉８５４－Ｂ＿２分别经物理化学诱变因子,ＴＤＰ辐射器和空间微重力辐射等因素的多级处理,得到１株形态发生明显改变的变异株Ｂ—７,其固体培养物的纤维素酶各组分酶活力,如滤纸糖酶活力（ＦＰＡ）为３４ｕ／ｇ,羧甲基纤维素酶活力（ＣＭＣ—ａｓｅ）为２９．０ｕ／ｇ,β－葡萄糖苷酶活力（β－Ｇｌａｓｅ）为２９．０ｕ／ｇ,与８５４－β２相比,分别提高５．９倍,７．６倍和４．２倍。其固体培养的最佳条件是：ｐＨ６．０,２８～３０℃,９６小时,最适培养基成分为：青草粉：麸皮＝７：３,１．５～２．０倍水和（ＮＨ４）２ＳＯ４１．５～２．０％（均以固体料计）。     

微生物生产弹性蛋白酶的研究

从１０个不同省区采集的５００多个土样中,分离得到了多株产弹性蛋白酶的菌株,主要集中在黄杆菌属和色杆菌属中。经过细胞工程技术处理后,黄杆菌属中的Ｆ－１２２菌在摇瓶发酵中的产酶能力达到２４０ｕ／ｍｌ,比出发菌株提高了１．５倍。该酶在Ｔｒｉｓ—ＨＣｌ缓冲液中最适ｐＨ为８．０,最适酶解温度４３℃。在ｐＨ６．０—９．５范围内稳定。ＣｕＳＯ４、ＺｎＳＯ４和ＦｅＳＯ４强烈抑制酶的活性,ＮａＣｌ、ＫＣｌ对酶活影响微弱。６０℃,３０ｍｉｎ酶活完全丧失。     

芽孢杆菌M_(50)产生β甘露聚糖酶的条件研究

从土壤中分离到９ 株产生β甘露聚糖酶的芽孢杆菌（ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ ．） 。Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ ． Ｍ５０２５０ｍ Ｌ三角瓶摇瓶培养试验,以４ ％ 的魔芋粉为碳源,１－０ ％ （ ＮＨ４）２ＳＯ４ 为氮源,０－３５ ％Ｎａ２ＣＯ３ ,３０ ～３４ ℃培养６０ｈ 产酶达到高峰。酶活力为１８０ ～２００ｕ／ｍ Ｌ。１００Ｌ 罐发酵,在３０ ～３２ ℃,１∶０ ．７５ｖｖｍ 通气量,２００ｒ／ｍｉｎ 条件下,发酵液酶活力高达３３０ｕ／ｍ Ｌ。酶的最适反应温度和ｐＨ 分别为５０ ℃和６－０ ,低于５０ ℃,ｐＨ５ ．０ ～７ ．０ 酶稳定。Ｆｅ^３＋ 、Ａｌ^３＋ 、ＥＤＴＡ、Ｈｇ^２＋ 对酶有抑制作用,而Ｂａ^２＋ 、Ｍｎ^２＋ 对酶有激活作用。发酵粗酶液对苎麻精干麻精练,显示对精干麻的半纤维素残胶具有降解作用。     

一株高效脱酚菌麦芽糖假丝酵母10－4的研究

从炼油厂严重污染的污水和土壤中分离筛选到１２株假丝酵母及丝孢酵母,能以苯酚为唯一碳源生长,２８．４０ｈ内降解苯酚可达１２００ｍｇ／Ｌ以上。其中１０－４号菌株降解苯酚浓度最高可达１７００ｍｇ／Ｌ。在含５００ｍｇ／ｌ苯酚及２０ｍｇ／ＬＣＮ－（５０ｍｇ／ＬＫＣＮ）的培养液中,降解苯酚的同时能降解１３．７ｍｇ／Ｌ的ＣＮ^－。鉴定为麦芽糖假丝酵母（Ｃｏｎｄｉｄａｍａｌｔｏｓａ）。其生长的最适ｐＨ范围为６－９,降解苯酚的最适ｐＨ范围为４－９,生长的最适温度为２５－３２℃,降解苯酚的最     

青霉胞外菊粉酶的纯化和性质研究

青霉菌（ＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍＳＰ．９１－４）产生的胞外菊粉酶（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｉｎｕｌｉｎａｓｅ）粗酶液,经硫酸铵沉淀,超滤浓缩,Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－１００凝胶过滤,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｃｅｌ离子交换柱层析等步骤,得到提纯３０倍的酶Ｅ。酶Ｅ反应时最适ｐＨ４．５,最适温度为５０℃,在ｐＨ４．７～７．６范围内,温度５０℃以下酶Ｅ活性稳定;其活性受Ａｇ＾＋,Ｃｕ＾２＋ＰＣＭＢ强烈抑制。采用     

菌根真菌——赭丝膜伞原生质体分离与再生研究

振荡培养４８ｈ的赭丝膜伞（Ｃｏｒｔｉｎａｒｉｕｓｒｕｓｓｕｓ）菌丝体经０．５％巯基乙醇预处理后,离心法收集,以０．６ｍｏｌ／ＬＭｇＳＯ４作高渗稳定剂,ｐＨ５．８,采用纤维素酶,离析酶和浸解酶联合处理,在三个温度（２４℃,３１℃３５℃）下经１１～１６ｈ反应均可获得较高的原生质体产量,最高产量达８×１０＾７个／ｇ鲜重菌丝,分离得到的原生质体表现了快速的再生能力,在ＭＭＮＣ固体培养基上可达到２０％以上的     

抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌的构建：I.抗氧化型碱性蛋白…

枯草芽孢杆菌（ＢａｃｉｌｌｕｓＳｕｂｔｉｌｉｓ）Ｂ１３５工程菌能产生抗氧化型碱性蛋白酶,粗酶经硫酸铵分级沉淀,ＣＭ－５２层析,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００层析,得到凝胶电泳均一样品,比活达到１７００Ｕ／ｍｇ,是粗酶比活的７．６９倍,该酶在６０℃时酶活力是最高,最适ｐＨ为１０．２在５０℃时,温浴１０ｍｉｎ后,酶活降低到原来的５０％,该酶受１ＭＨ２Ｏ３作用２０ｍｉｎ,仍保持９６％的酶活。