稀土元素对谷氨酸发酵的影响

通过对谷氨酸发酵培养基中添加稀土元素的研究,确定了几种能对发酵产酸有提高作用的稀土元素及其浓度,其中La^3 、Ce^4 、Nd^3 离子浓度分别为100mg/L、10mg/L、1mg／L时能提高产酸水平,而Sm^3 、Y^3 离子对发酵基本上没有影响。     

诱导子对藏红花悬浮培养细胞生产藏红花色素的影响

考察壳聚糖（chitosan）、壳寡糖（chitosanoligosaccharides,COS）、茉莉酸甲酯（methyljasmonate,MJ）、水杨酸（salicylicacid,SA）和Cu2＋等诱导子对藏红花悬浮培养细胞生长和藏红花色素合成的影响。结果表明：在实验考察浓度范围内,壳寡糖（1～500mg／L）和较低浓度壳聚糖（≤10mrdL）、MJ（≤10μmol／L）、SA（≤10μμmol／L）和Cu2＋（≤1μmoL／L）对细胞生长无显著影响;较高浓度壳聚糖（≥100mg／L）、MJ（≥100μmol／L）、SA（≥100μmoL／L）和cu“（≥10μmoL／L）显著抑制细胞生长。5种诱导子对藏红花色素合成的诱导效果不同,并且与诱导子作用浓度和添加时间有关。MJ诱导效果最好,在细胞培养第0天添加终浓度100仙moL／LMJ,藏红花色素含量（以1克干细胞计）达到28．57mg,比对照提高177．9％。其次是cu“,在细胞培养第4天添加终浓度500μmoL／LCu2＋,色素含量达到19．82mg,比对照提高108．2％。再次是壳聚糖和壳寡糖,在细胞培养第14天分别添加终质量浓度100mg／L壳聚糖和壳寡糖,色素含量分别达到18．33和17．39mg,比对照提高69．1％和69．0％。最后是SA,在细胞培养第14天添加终浓度10μmoL／LSA,色素含量达到14．65mg,比对照提高45．4％。     

4-PU和6-BA对‘汕油523＇花生上胚轴愈伤组织诱导及不定芽发生的影响

以‘汕油523’花生上胚轴为外植体,研究细胞分裂素4-PU和6-BA对愈伤组织诱导及不定芽发生的效应。结果表明,当MS培养基含有4-PU 0．1mgm和6-BA4mg／L培育20d时,愈伤组织形成率为100％;0．1mg/L4-Pu与适宜浓度的6-BA（1～4mg／L）共同作用,促进上胚轴不定芽发生,不定芽形成与芽伸长的适宜培养基配方分别为MS＋4-PU 0．1mg/L＋6-BA2mg／L和MS＋4-PU0．1mg／L＋6-BA4mg／L;0．5mg／L4-PU对不定芽出芽率、芽数与长度的作用均大于其与不同浓度6-BA混合作用的效果。     

液体悬浮培养促进铁皮石斛原球茎高效诱导、增殖的研究

用正交设计方法对铁皮石斛原球茎具有高效增殖影响的激素（BA,NAA,KT,马铃薯汁）以及配比进行研究,结果表明：以茎段为外植体在培养基Ms＋BA2．0mg／L＋NAA2．0mg／L＋马铃薯汁10％＋糖3％,具有很好的原球茎诱导作用,50d后诱导率达95．20％;原球茎在1／2MS＋BA2．0mg／L＋NAA1．0mg／L＋KT0．5mg／L＋糖3％的培养基上,以液体悬浮培养,原球茎增殖达49．032g／50d。     

尾巨桉胚培养与快速繁殖研究(简报)

尾巨桉种胚在改良H＋2,4-D0．5mg／L＋6-BA0．1mg／L＋蔗糖3％培养基上诱导形成愈伤组织,每个愈伤组织块在改良H＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋蔗糖5％培养基上分化形成芽点,经30d继代培养,产生有效苗30～50株。利用改良MS＋6-BA0．4mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖3％培养基进行壮苗,改良MS＋ABT0．6mg／L＋IBA0．2mg,L＋蔗糖1．5％培养基进行生根诱导．有效成苗率达95％以上。移栽成活率达98％．     

激素种类及其浓度对矮牵牛试管苗增殖及生根率的影响

以MS培养基为基本培养基,以矮牵牛试管苗为材料,并用不同浓度的细胞分裂素6-BA、KT、Ad分别与生长素NAA（0．10mg／L）进行配比试验,并用一定浓度的细胞分裂素6-BA、KT、Ad两两分别组合配比试验,探讨了不同浓度的细胞分裂素对矮牵牛试管苗的影响,以及两类生长素IBA和NAA对生根的影响。结果表明,适合于矮牵牛试管苗增殖的培养基有：（1）MS＋1．60mg／L 6-BA＋0．10mg／LNAA;（2）MS＋0．80mg／L 6-BA＋1．60mg／LKT＋0．10mg／L NAA;（3）MS＋0．80mg／L 6-BA＋0．20mg／LAd＋0．10mg／LNAA;（4）MS＋1．60mg／L KT＋0．20mg／L Ad＋0．10mg／L NAA。适合于矮牵牛试管苗生根的培养基有（1）1／2MS;（2）1／ZMS＋0．20mg／L1BA;（3）1／2MS＋0．20mg／LNAA。     

在林可霉素生物合成过程中铵离子调控作用的酶学研究

在FUS-50L发酵罐内,用林可链霉菌发酵生产林可霉素。研究发现,NH4^＋对林可霉素发酵过程具有显著的调控效应：补入硫酸铵前,发酵液中的NH4^＋浓度由3．0mmol／L消耗至1．0mmol／L以下的控制过程非常关键,这样可能使林可霉素合成酶大量合成,同时,解除了NH4^＋对谷氨酰合成酶（GS）的阻遏效应;20～24h,尽可能提高硫酸铵的平均补入速率,但最高NH4^＋的瞬时浓度应控制在19．0mmol／L以下,一方面可缩短生物量的积累时间,另一方面可避免过高浓度的NH4^＋对GS的抑制作用;24h后逐渐降低NH4^＋的平均补入速率,使主代谢流转入次级代谢;在发酵中期和后期,应将最低NH4^＋浓度控制在3．0～4．0mmol／L的范围内,避免铵离子对GS的阻遏效应,GS比活力与林可霉素的产量呈正相关关系。最终建立了动态的硫酸铵补加工艺。     

重组大肠杆菌利用木糖发酵产高纯度L-乳酸

对重组大肠杆菌JH16利用木糖产高纯度的三一乳酸进行研究。通过无氧管驯化EscherwhiacdiJH12菌株得到E．coliJH16,驯化后的菌株茵体浓度提高了31％,乙酸积累减少了43％;在摇瓶中考察不同Mg2＋浓度对EcoliJHl6产三一乳酸的影响,确定最适Mg2＋质量浓度为0．25g/L;EcoEJH16以60g/L木糖为C源,在7L全自动发酵罐中添加0．25g／LMg2＋,乳酸积累量提高了18％,达38．18g/L,乳酸纯度高达95％;E．coliJH16在30g／L木糖和30g／L葡萄糖混合C源中,优先利用葡萄糖,当葡萄糖质量浓度低于1．56g/L后,菌体开始利用木糖进行乳酸发酵,最终得到39g／L乳酸。     

提高狗蔷薇离体培养植株再生频率

以狗蔷薇（Rosa canina Inermis）为材料,以MS为基本培养基,通过对不同植物生长调节剂的组合,大幅度提高了狗蔷薇离体培养植株再生频率。结果表明,2．0mg／L 6-BA＋0．3mg／L 2,4-D的组合较为适宜,其不定芽再生率为87％,增殖率为3．0;而CPPU和2,4-D的适宜组合为1．5mg／L＋0．3mg／L,其不定芽再生率高达93％,增殖率为5．0。同时,研究结果显示,以MS＋40g／L蔗糖＋6．0g／L琼脂粉＋3．5mg／L AgNO3＋1．5mg／L CPPU＋0．1mg／L 2,4-D＋0．05mg／L GA3作增殖培养基效果最好,不定芽诱导率为89％,增殖率为5．5;利于生根的培养基为1／4MS＋20g／L蔗糖＋3．5g／L琼脂＋0．3％活性碳＋0．1mg／L IBA＋0．1mg／L NAA,生根率为91％。     

桃儿七成熟胚的离体培养研究

以MS为基本培养基,通过添加不同激素和附加物等措施对桃儿七种子成熟胚进行了无菌苗和愈伤组织诱导初步研究。研究结果表明：0．5mg／L IAA＋0．2mg／L KT＋0．3mg／L GA3处理可获得生长良好的无菌苗,诱导率达41．67％。1．0mg／L 2,4-D＋0．4mg／L KT＋0．3mg／L GA3处理愈伤组织诱导率可达36．67％,添加500mg／L水解酪蛋白（CH）或10mg／L D-生物素有益于愈伤组织的诱导。光照和变温培养有利于提高无菌苗和愈伤组织的诱导率,有效降低褐化率。     

铁改性沸石对Clostridium acetobutylicum XY16固定效率及发酵性能的影响

考察4种无机铁盐改性沸石对丁醇生产菌Clostridium acetobutylicum XY16的固定效率及其发酵产丁醇性能的影响。结果表明:铁改性沸石对菌体的固定效率均优于未改性沸石,而Fe3+改性效果优于Fe2+,经FeCl3改性的沸石对菌体具有良好的吸附作用,当Fe3+-zeolite用量为180 g/L时,细胞的固定效率达到87%。在此基础上,比较了沸石负载的铁离子量对丁醇发酵性能的影响,沸石负载的铁离子量为6.0 mg/g时可显著提高丁醇发酵性能,当葡萄糖质量浓度为60 g/L时进行发酵,丁醇产量为13.5 g/L,总溶剂可达20 g/L,总溶剂的生产速率为0.385g/(L.h),比游离细胞发酵分别提高了9.5%、10.3%和40%。     

耐铵型产琥珀酸放线杆菌的选育

以Actinobacillus succinogenes NJ113为出发菌株,经硫酸二乙酯(DES)诱变,在含8～20 g/L硫酸铵平板中筛选到一株耐铵型突变株YZ25,该菌株在含8 g/L硫酸铵培养基中厌氧发酵,琥珀酸产量达32.68 g/L,比出发菌提高了180.5%,对葡萄糖收率达65.4%,副产物乙酸、甲酸产量分别下降3.5%、28.7%,琥珀酸/乙酸比值由0.63提高到2.5。在7.5 L发酵罐中,用氨水调节pH分批实验,发酵34 h琥珀酸产量达27.13 g/L,较出发菌株提高了85.3%。     

应用稀土调控藏红花胚性愈伤组织的生长与分化

为提高藏红花（Crocus sativus）胚性愈伤组织的繁殖系数与出芽率,以建立藏红花离体快繁体系,解决其资源短缺问题,采用两步法,用稀土调控其胚性愈伤组织的生长与分化。结果表明,在添加了0.25mg·L-1NAA、3mg·L-16-BA和400mg·L-1CH的B5固体培养基中,0.04mmol·L-1La3＋促进胚性愈伤组织生长的效果最佳,繁殖系数为12,是不添加稀土处理组的1.48倍;在添加了0.25mg·L-1NAA、3mg·L-16-BA和400mg·L-1CH的1/2B5固体培养基中,0.06mmol·L-1Ce3＋促进胚性愈伤组织分化出芽的效果最佳,出芽率高达84.5%,是不添加稀土处理组的1.81倍,且高于国外报道的出芽率（40%）。初步解决了藏红花胚性愈伤组织生长慢和出芽率低等问题,为建立高效稳定的藏红花离体快繁体系奠定了基础。     

稀土元素对红酵母的生长及类胡萝卜素合成的影响

探索了稀土元素镧Ｌａ^３＋、铈Ｃｅ^３＋和钕Ｎｄ^３＋对红酵母ｐｈａｆｆｉａ　ｒｈｏｄｏｚｙｍａ的生长，类胡萝卜素合成及菌体氨基酸组成的影响。三种稀土元素在所测试的浓度范围内对红酵母细胞生物量仅有轻度的抑制作用，但对类胡萝卜素的合成有促进作用。当培养基中分别加入２０ｍｇ／Ｌ的ＬａＣｌ_３、５ｍｇ／Ｌ的ＣｅＣｌ_３，和５０ｍｇ／ＬＮｄＣｌ_３时，刺激类胡萝卜素合成作用最强，产     

稀土多元复合肥和三种稀土元素的遗传毒性研究

采用蚕豆根尖细胞微核技术,研究市售稀土多元复合肥和稀土元素镧、铈、铒的化合物对蚕豆根尖细胞的遗传毒性和细胞毒性。结果表明,稀土复合肥和三种稀土元素均可诱发微核效应,在一定浓度下可损伤细胞,影响根尖的正常生长,其中稀土复合肥的微核效应表现出明显的剂量-效应关系。稀土复合肥和稀土元素镧、铈、铒的化合物对蚕豆根尖细胞具有一定的遗传毒性作用和细胞毒性作用,在施用稀土微肥和使用稀土制品时应引起重视。 Abstract：This paper presents the study of genetic toxicity and cell toxicity that is give n by rare earth multi-element compound fertilizer and a chemical compound of rar e earth elements-La3＋、Ce4＋、Er3＋ in root tip cells of Vicia faba.The technique used is micronucleus in root tip cells of Vicia faba.The experiment statistical result shows that both the rare earth compound fertilizer and the three kinds of rare earth elements can cause micronucleus ef fect and under certain concentration,they can hurt cells, affect root tip gro wth .The micronucleus effect of the rare earth compound fertilizer shows a clear relation of dosage-effect. The conclusion is that rare earth compound fertilize r and the chemical compound of rare earth elements La3＋、Ce4＋、E r3＋cause certain genetic toxicity and cell toxicity effect to root tip cells of Vicia faba.Therefore a close attention should be paid when the rar e earth multi-fertilizer and other things made by rare earth are used.     

利用响应面法优化α-糖苷酶抑制剂发酵培养基

【目的】采用响应面法对戈壁三素链霉菌PW409发酵合成α-糖苷酶抑制剂的培养基进行优化。【方法】采用Plackett-Burman法筛选影响α-糖苷酶抑制剂产生的关键因素,用最陡爬坡试验逼近关键因素的最大响应区域,采用Box-Behnken设计以及响应面分析法,得到各因素的最佳浓度,通过液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)对发酵液中α-糖苷酶抑制剂进行定量分析。【结果】发酵培养基中可溶性淀粉、KNO3和K2HPO4的浓度对α-糖苷酶抑制剂的产量影响较大。优化后的培养基组成为:可溶性淀粉9.01 g/L,KNO3 11.0 g/L,K2HPO4 0.32 g/L,MgSO4.7H2O 0.50 g/L,FeSO4.7H2O 0.01 g/L,pH 7.5。【结论】在此优化条件下,链霉菌PW409发酵液对麦芽糖苷酶的半数抑制浓度IC50为22 mg/L,抑制活性较优化前提高了近10倍。发酵液中的1-脱氧野尻霉素含量可达7.84 mg/L,较优化前提高了668倍,米格列醇的含量可达0.94 mg/L,较优化前提高了10倍。     

Reduced formation of byproduct component C in acarbose fermentation by Actinoplanes sp. CKD485-16

Acarbose fermentation was conducted by cultivation of Actinoplanes sp. CKD485-16. Approximately 2,300 mg/L of acarbose was produced at the end of cultivation along with 600 mg/L of the acarbose byproduct component C. Maltose, a known moiety of acarbose, should be maintained at high concentration levels in culture broths for efficient acarbose production. The acarbose yield increased with an increasing osmolality of the culture medium, with a maximum value of 3,200 mg/L obtained at 500 mOsm/kg. Component C was also produced in proportion to the osmolality. Conversion of acarbose to component C was accomplished with resting whole cells. Inhibitors of the conversion of acarbose to component C were sought since component C is probably derived from acarbose. Valienamine was found to be a potent inhibitor, resulting in a more than 90% reduction in component C formation at a 10 microM concentration. Effects were similar in a 1,500-L pilot fermentor with acarbose and component C yields of 3,490 and 43 mg/L at 500 mOsm/kg, respectively.     

稀土元素对红豆杉细胞悬浮培养及紫杉醇合成的影响

研究了在250mL摇瓶中,不同浓度的硝酸镧、硫酸铈铵、硝酸亚铈3种稀土化合物对细胞生长及紫杉醇分泌和释放的影响。结果表明,在培养初期加入稀土元素。3种不同稀土化合物对细胞生长影响强弱不同,但趋势相似,均使细胞的延迟期缩短。1ppm的Ce^4 促进细胞生长的效果最明显。细胞干重第17d达到10.9g/L。在指数期加入稀土元素。10ppmCe^3 刺激细胞生长的效果最明显,细胞干重最高值达到11.5g/dL,比对照高1.5g/L,而10ppm的La^3 抑制细胞的生长。经稀土元素处理后,细胞胞内和胞外紫杉醇含量都有大幅度的提高,其中以10ppmCe^3 处理,胞外紫杉醇释放率最大,达37.7%。