产藏红花素栀子愈伤组织的诱导和筛选

为解决藏红花资源问题,研究了栀子愈伤组织的诱导,并首次应用目视法和HPLC 方法对产藏红花素细胞系进行了筛选。结果表明栀子叶子愈伤组织优化的诱导条件为: 在添加1mg/L 2,4-D和 0.25 mg/L 6-BA的MS 培养基上, 25±1℃和31.74 mmol/m2s光照强度下每天光照16小时,培养15d后可获得100%的诱导率。种子愈伤组织也易诱导,在添加0.5mg/L 2,4-D 和 0.25 mg/L 6-BA的MS培养基上,25±1℃全时暗培养15d后可获得100%的诱导率。首次应用建立的目视法和HPLC 方法, 从90株细胞系中筛选出细胞系seed4,其藏红花素1 的含量是0.348mg/g,生长较快、不易褐化,兼顾了此次生代谢产物的含量和细胞的生长速度,为采用植物细胞工程法解决藏红花素资源短缺问题提供了种质资源。     

产藏红花素1(crocin)愈伤组织的诱导及其细胞系的筛选

对藏红花(cfocus sativus L)愈伤组织的诱导条件进行了优化.结果表明:Ms是藏红花芽愈伤组织的最佳诱导培养基,而B5是叶子和花愈伤组织的最佳培养基.藏红花芽、叶和花愈伤组织的最佳诱导温度分别是18℃、25℃和21℃.光照是叶子愈伤组织诱导的有利因素,但不利于芽和花愈伤组织的诱导.1.5～2.0 mg·L-1NAA和0.25 mg·L-6-BA是愈伤组织诱导的最佳激素组合.通过目视法和HPLC方法,从229株细胞系中筛选出细胞系Corml,其藏红花素1的含量是1 677 mg·g-,生长较快,且不易褐化.为采用植物细胞工程法解决藏红花素1资源短缺问题打下了基础.     

藏红花细胞悬浮培养动力学研究

基于已经建立的藏红花细胞悬浮培养体系,研究了其悬浮培养动力学.结果表明,悬浮培养时细胞的生长周期约为20 d,在20 d时生物量达到最大,为12.3 g DW/L,但是藏红花素的合成周期大约为28 d,在28 d时藏红花素的含量和产量达到最大,分别为95.8 mg/g和0.92 g/L.藏红花素的积累与细胞的生长之间的关系为半生长偶联型,为其生物反应器放大培养提供了参数等理论依据.     

应用稀土调控藏红花胚性愈伤组织的生长与分化

为提高藏红花（Crocus sativus）胚性愈伤组织的繁殖系数与出芽率,以建立藏红花离体快繁体系,解决其资源短缺问题,采用两步法,用稀土调控其胚性愈伤组织的生长与分化。结果表明,在添加了0.25mg·L-1NAA、3mg·L-16-BA和400mg·L-1CH的B5固体培养基中,0.04mmol·L-1La3＋促进胚性愈伤组织生长的效果最佳,繁殖系数为12,是不添加稀土处理组的1.48倍;在添加了0.25mg·L-1NAA、3mg·L-16-BA和400mg·L-1CH的1/2B5固体培养基中,0.06mmol·L-1Ce3＋促进胚性愈伤组织分化出芽的效果最佳,出芽率高达84.5%,是不添加稀土处理组的1.81倍,且高于国外报道的出芽率（40%）。初步解决了藏红花胚性愈伤组织生长慢和出芽率低等问题,为建立高效稳定的藏红花离体快繁体系奠定了基础。     

应用微生物与秸秆降低鸡粪氨气释放量

为减轻大量禽畜废弃物中氨气流失对环境的污染,研究和优化了微生物与秸秆等辅料对氨气释放量的影响。结果表明,F468、M1?M9等除臭微生物能显著降低氨气的释放量,其中F468是最优微生物,其它微生物与F468的配伍并没有显著增强F468降低氨气释放量的能力,有些微生物还降低了其能力,因此选择单一微生物法降低氨气释放量。单独添加辅料对降低氨气的释放影响较小,辅料与微生物的配伍可大量降低氨气的释放量。5%的F468与10%的秸秆配伍在1?5 d降低88%的释放量。应用微生物与秸秆不仅降低氨气挥发对环境的危害,也是秸秆资源化利用的有效途径之一。     

藏红花细胞悬浮培养体系的建立及优化

基于诱导的藏红花细胞系,通过摇瓶法,优化了其液体培养基、接种量和种龄等培养条件,以建立藏红花细胞悬浮培养体系。结果表明,将生长在固体培养基上的藏红花愈伤组织接种在MS液体培养基(添加了2mg/L2,4-D,1mg/L6-BA和300mg/LCH)中,于(22±0.3)℃,120r/min的摇床上,暗培养30d,便可获得藏红花的悬浮细胞系。经优化其培养基、接种量和种龄,将种龄为20d的细胞系,按照5%接种量接种在液体B5培养基(添加了2mg/LNAA,1mg/L6-BA和300mg/LCH)中,于(22±0.3)℃,120r/min的摇床上,培养36d,细胞生物量(13.4g/L)和藏红花素产量(0.91g/L)均达到最高。本研究建立的藏红花细胞悬浮培养体系为其生物反应器放大培养奠定了基础。     

应用微生物降低鸡粪N营养元素损失, 促进其无害化进程

为减轻大量禽畜废弃物对环境的污染, 将其资源化为优质的无害化有机肥料, 研究了微生物F468对降低鸡粪N营养元素损失和促进其无害化进程的影响。结果表明, 继代80次, F468降低鸡粪氨气挥发的能力无显著变化, 能降低鸡粪79%的N元素损失。F468还能通过降低蛔虫卵和粪肠杆菌的数量, 促进鸡粪的无害化进程。不添加F468, 蛔虫卵和粪肠杆菌达到我国无害化标准(NY884-2004)的时间分别需要25 d和20 d。加入F468后, 蛔虫卵和粪肠杆菌达到我国无害化标准的时间分别需要15 d和10 d, 均比不加微生物提前10 d达到我国无害化标准。     

除臭微生物分离和筛选方法的改进与应用

为减轻大量的禽畜废弃物对环境的污染和促进其有机肥转化的进程,在以往大量研究的基础上,改进了分离和筛选除臭微生物的方法。应用该简便方法,快速地从环境中分离和筛选出除臭微生物F468,能够降低新鲜鸡粪氨气和硫化氢释放量分别在67%和56%以上,降低风干鸡粪氨气和硫化氢释放量分别在90%和52%以上。通过形态学方法鉴定,F468初步被鉴定为绿色木霉。     

农业有机废弃物中挥发性成分的过程控制

随着养殖业的发展禽畜废弃物已经成为有机废弃物的主要来源之一,并产生了很多恶臭气体,对环境造成了严重污染。论述了恶臭气体的发生、危害及国内外物理、化学、生化和生物法过程控制的研究进展,并在此基础上提出了微生物在禽畜废弃物恶臭气体控制中的问题和研究展望。     

产藏红花素1(crocin)愈伤组织的诱导及其细胞系的筛选

对藏红花(Crocus sativus L.) 愈伤组织的诱导条件进行了优化。结果表明：MS 是藏红花芽愈伤组织的最佳诱导培养基,而B5是叶子和花愈伤组织的最佳培养基。藏红花芽、叶和花愈伤组织的最佳诱导温度分别是18℃、25℃和21℃。光照是叶子愈伤组织诱导的有利因素,但不利于芽和花愈伤组织的诱导。1.5～2.0 mg.L-1 NAA和0.25 mg.L-1 6-BA是愈伤组织诱导的最佳激素组合。通过目视法和HPLC方法, 从229株细胞系中筛选出细胞系Corm1,其藏红花素1 的含量是1 677 mg.g-1,生长较快,且不易褐化。为采用植物细胞工程法解决藏红花素1资源短缺问题打下了基础。